O型血孕婦產(chǎn)前不規(guī)則抗體效價(jià)與ABO型新生兒溶血癥關(guān)系研究

李彩梅，席真艷

(榆林市第二醫(yī)院輸血科，陜西 榆林 719000)

ABO型新生兒溶血癥(ABO hemolytic disease of newborn，ABO-HDN)是母體對(duì)胎兒紅細(xì)胞發(fā)生同種免疫反應(yīng)所致的溶血性疾病，嚴(yán)重者可引起核黃疸、膽紅素腦病，死亡風(fēng)險(xiǎn)高，因此如何有效防治ABO-HDN至關(guān)重要[1-3]。ABO血型系統(tǒng)以外的所有紅細(xì)胞血型抗體稱為不規(guī)則抗體，其可通過(guò)母嬰血型不合妊娠、輸血等免疫刺激產(chǎn)生的IgG抗體經(jīng)胎盤進(jìn)入胎兒血液循環(huán)，再通過(guò)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)破壞血型不相容的胎兒紅細(xì)胞[4-5]。因此，對(duì)孕產(chǎn)婦開展產(chǎn)前不規(guī)則抗體(IgG抗A/B效價(jià))檢測(cè)十分必要，也是臨床防治ABO-HDN的重要手段之一[6-7]。鑒于此，本研究將接受IgG抗A/B效價(jià)篩查的O型血孕婦作為研究對(duì)象，回顧性分析其IgG抗A/B效價(jià)檢測(cè)結(jié)果，明確O型血孕婦產(chǎn)前IgG抗A/B效價(jià)與ABO-HDN的關(guān)系，為ABO-HDN的臨床防治提供參考意見。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年12月至2019年12月在本院接受IgG抗A/B效價(jià)檢測(cè)的孕婦為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：孕婦血型為O型；臨床資料完整，能夠滿足研究需求。排除標(biāo)準(zhǔn)：夫婦血型為O-O型。最終納入1578例，其中年齡20～39歲，平均(30.17±2.05)歲；孕齡16～40周；夫婦血型A-O型694例，B-O型530例，AB-O型354例；56例孕婦的患兒出生后發(fā)生黃疸，母體IgG抗A/B效價(jià)高，新生兒血型鑒定明確為母嬰ABO血型不合，間接膽紅素增高，新生兒直接抗球蛋白實(shí)驗(yàn)(陽(yáng)性提示紅細(xì)胞表面包被不完全抗體)、游離實(shí)驗(yàn)(陽(yáng)性提示血清中存在游離IgG抗體)和放散實(shí)驗(yàn)(陽(yáng)性提示紅細(xì)胞膜上有抗體吸附)實(shí)驗(yàn)中任意1項(xiàng)陽(yáng)性，臨床確診為ABO-HDN。

1.2 研究方法 采集孕婦凝血、抗凝血2 ml血液樣本，EDTA-K2抗凝，制備血清、0.8%紅細(xì)胞懸液備用。微柱凝膠法檢測(cè)IgG抗A/B血型效價(jià)，篩查母體不規(guī)則抗體，不規(guī)則抗體篩檢卡(國(guó)械注準(zhǔn)20163400856)、HDN母體IgG抗A/B效價(jià)檢測(cè)卡(國(guó)械注準(zhǔn)20163400869)均購(gòu)自江蘇力博醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司，所有操作均嚴(yán)格參照試劑盒說(shuō)明書。將經(jīng)2-巰基乙醇處理后的血清用0.9%氯化鈉溶液進(jìn)行倍比稀釋，再將0.8%紅細(xì)胞懸液(A或B)加入微柱凝膠卡反應(yīng)室。加入倍比稀釋后的血清各50 μl，37 ℃條件下孵育15 min后離心15 min，觀察其凝集情況。陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：1+凝集強(qiáng)度，此血清稀釋倍數(shù)的倒數(shù)則為IgG抗A/B效價(jià)。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較不同夫婦血型中IgG抗A/B效價(jià)篩查結(jié)果及發(fā)生ABO-HDN孕婦中不同IgG抗A/B效價(jià)占比。②以ABO-HDN是否發(fā)生為條件將研究對(duì)象分為ABO-HDN組和非ABO-HDN組，比較兩組孕婦臨床資料，包括年齡、妊娠次數(shù)、孕齡、新生兒性別、分娩方式及IgG抗A/B效價(jià)，并分析ABO-HDN發(fā)生的影響因素。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，比較采用χ2檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)。IgG抗A/B效價(jià)與ABO-HDN的關(guān)系采用Logistic回歸分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 1578例O型血孕婦IgG抗A/B效價(jià)篩查結(jié)果 見表1。1578例O型血孕婦中，IgG抗A/B效價(jià)≥256者占比45.44%(717/1578)。夫婦血型A-O型、B-O型、AB-O型中，IgG抗A/B效價(jià)≥256者占比分別為49.86%(346/694)、41.89%(222/530)、42.09%(149/205)。不同夫婦血型中IgG抗A/B效價(jià)≥256者占比比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=9.754，P=0.008)，A-O型中IgG抗A/B效價(jià)≥256者占比顯著高于B-O型和AB-O型(H=10.224、11.663，均P=0.001)。

表1 1578例O型血孕婦IgG抗A/B效價(jià)篩查結(jié)果[例(%)]

2.2 發(fā)生ABO-HDN孕婦中不同IgG抗A/B效價(jià)占比比較 發(fā)生ABO-HDN的孕婦中，IgG抗A/B效價(jià)≥256者占比98.21%(55/56)，而IgG抗A/B效價(jià)<256者僅占1.19%(1/56)，前者明顯高于后者(χ2=104.143，P=0.000)。

2.3 ABO-HDN組和非ABO-HDN組孕婦臨床資料比較 見表2。兩組孕婦年齡、孕齡、新生兒性別、分娩方式比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，但妊娠次數(shù)、IgG抗A/B效價(jià)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。

2.4 ABO-HDN發(fā)生影響因素分析 見表3。以ABO-HDN為因變量(是=1，否=0)，將妊娠次數(shù)(1次=0，>1次=1)、IgG抗A/B效價(jià)一(<256=0，256=1，512=2，≥1024=3)、IgG抗A/B效價(jià)二(<256=0，≥256=1)作為協(xié)變量，進(jìn)行Logistic回歸分析。結(jié)果顯示，妊娠次數(shù)>1次、IgG抗A/B效價(jià)≥256是ABO-HDN發(fā)生的獨(dú)立影響因素，其中妊娠次數(shù)>1次是保護(hù)因素。

表2 ABO-HDN組和非ABO-HDN組

表3 ABO-HDN發(fā)生影響因素分析

3 討 論

ABO-HDN是因母嬰血型不合，母親對(duì)胎兒紅細(xì)胞發(fā)生同種免疫反應(yīng)所引起的溶血性疾病，重癥可引發(fā)核黃疸，甚至致死[8-9]。機(jī)體紅細(xì)胞血型系統(tǒng)極為復(fù)雜，包括ABO、Rh、P、MN等多個(gè)血型系統(tǒng)，臨床將ABO血型抗體以外的所有紅細(xì)胞抗體均定義為不規(guī)則抗體，即不符合Landsteiner法則的抗體，包括完全抗體(IgM)及不完全抗體(IgG)[10-11]。既往研究[12-13]報(bào)道，正常人群中不規(guī)則抗體陽(yáng)性率約0.3%～2%。妊娠、輸血免疫刺激則均是不規(guī)則抗體產(chǎn)生的重要原因，不規(guī)則抗體IgG可經(jīng)胎盤進(jìn)入胎兒血液循環(huán)，破壞紅細(xì)胞，最終引起HDN，以胎兒或嬰兒水腫、黃疸、貧血、肝脾腫大為主要臨床表現(xiàn)，嚴(yán)重者可并發(fā)膽紅素腦病，預(yù)后不良[14-15]。同時(shí)，產(chǎn)后出血是產(chǎn)科常見并發(fā)癥，也是導(dǎo)致產(chǎn)婦死亡的重要原因，而選擇相配合的血液制劑則是贏得寶貴搶救時(shí)間的關(guān)鍵，因此對(duì)孕婦開展不規(guī)則抗體篩查十分必要，不僅可降低HDN發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，亦是為產(chǎn)婦輸血提供參考依據(jù)。

本研究1578例O型血孕婦中，IgG抗A/B效價(jià)≥256者占比45.44%，夫婦血型A-O型、B-O型、AB-O血型中IgG抗A/B效價(jià)≥256者占比分別為49.86%、41.89%、42.09%，這與房篤智等[16]報(bào)道的45.69%接近。A-O型中，IgG抗A/B效價(jià)≥256者占比顯著高于B-O型和AB-O型，提示血型可能與O型血孕婦血清IgG抗體效價(jià)存在一定關(guān)聯(lián)，這與葉海輝等[17]的報(bào)道存在差異。另外，56例發(fā)生ABO-HDN的孕婦中，IgG抗A/B效價(jià)≥256者占比98.21%，而IgG抗A/B效價(jià)<256者僅占1.19%。為進(jìn)一步明確IgG抗A/B效價(jià)與ABO-HDN的關(guān)系，本研究將1578例孕婦所生新生兒按是否發(fā)生ABO-HBN分組，結(jié)果顯示兩組妊娠次數(shù)、IgG抗A/B效價(jià)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Logistic回歸分析結(jié)果顯示，妊娠次數(shù)>1次、IgG抗A/B效價(jià)≥256均是ABO-HDN發(fā)生的獨(dú)立影響因素。較妊娠次數(shù)為1次孕婦，>1次的O型血孕婦新生兒發(fā)生ABO-HDN的風(fēng)險(xiǎn)降低0.424倍。而較IgG抗A/B效價(jià)<256孕婦，IgG抗A/B效價(jià)256、512、≥1024的O型血孕婦新生兒發(fā)生ABO-HDN的風(fēng)險(xiǎn)分別增加2.951倍、3.056倍、3.501倍，可見其風(fēng)險(xiǎn)隨著IgG抗A/B效價(jià)增加而上升。這與既往報(bào)道[18]結(jié)論相似，均提示IgG抗體效價(jià)與HDN發(fā)生率呈正相關(guān)關(guān)系。IgG是唯一可穿過(guò)胎盤的免疫球蛋白，因此IgG性質(zhì)的抗體理論上均可引起HDN，隨著抗體效價(jià)的上升，一旦超過(guò)機(jī)體保護(hù)機(jī)制，便可導(dǎo)致ABO-HDN發(fā)生。本研究中，Logistic回歸分析也顯示，較IgG抗A/B效價(jià)<256的孕婦，IgG抗A/B效價(jià)≥256的O型血孕婦新生兒發(fā)生ABO-HDN的風(fēng)險(xiǎn)增加5.709倍，因此臨床對(duì)不規(guī)則抗體IgG效價(jià)≥256的O型血孕婦=應(yīng)高度重視。

研究[19-20]指出，HDN發(fā)生、嚴(yán)重程度不僅與IgG抗A/B效價(jià)有關(guān)，IgG抗體亞類、IgG轉(zhuǎn)運(yùn)至胎兒效率、胎兒脾臟功能成熟度、人類白細(xì)胞抗原相關(guān)抑制抗體亦在HDN發(fā)生中起重要作用，因此不規(guī)則抗體篩查尚不能作為HND的預(yù)測(cè)指標(biāo)。但結(jié)合當(dāng)前研究，孕婦不規(guī)則抗體篩查所示IgG抗A/B效價(jià)與胎兒出生后24 h內(nèi)膽紅素水平正相關(guān)[21]，這也提示產(chǎn)前IgG抗A/B效價(jià)控制的必要性，尤其是對(duì)于血清IgG抗A/B效價(jià)≥256的孕婦，應(yīng)給予動(dòng)態(tài)持續(xù)監(jiān)測(cè)，結(jié)合產(chǎn)前血漿置換等干預(yù)措施降低HDN風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，對(duì)孕婦開展不規(guī)則抗體篩查十分必要，并應(yīng)重視IgG抗A/B效價(jià)≥256的孕婦，依據(jù)IgG效價(jià)進(jìn)行積極的產(chǎn)前干預(yù)，最大限度地降低HDN風(fēng)險(xiǎn)。但本研究也存在一定局限性，如樣本數(shù)量相對(duì)較少，產(chǎn)前不規(guī)則抗體篩查與HDN的相關(guān)性仍有待擴(kuò)大樣本量后深入探究。