奧拉西坦聯合丹紅注射液對缺血性腦卒中患者BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白表達水平的影響

劉 潔 任利霞

1.黃河三門峽醫院醫院感染管理科，河南三門峽472000；2.黃河三門峽醫院藥學部，河南三門峽472000

缺血性腦卒中又稱作腦梗死，是由局部腦組織區域血液供應障礙導致腦組織損傷等的一種腦組織缺氧性壞死疾病[1]。研究顯示，約35%的急性缺血性腦卒中患者會在發病后3個月發生認知功能障礙，嚴重影響了患者的生活質量[2-3]。奧拉西坦是一種γ-氨基丁酸（GABA）類益智藥，能夠改善患者的學習能力，保護患者的神經系統，但也有可能會使患者出現精神興奮和睡眠障礙等情況[4]。腦卒中在祖國醫學中歸屬于中風的范疇，其基本病機為血瘀阻絡，因此采用丹紅注射液治療能夠改善血液流動情況，有助于患者康復[5]。同時，丹紅注射液還能扶正祛邪、醒腦開竅，可促進患者神經功能和腦組織康復[6]。基于此，本研究探究以上兩種藥物聯合應用對缺血性腦卒中患者的治療效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取黃河三門峽醫院2015年10月至2018年10月收治的100例缺血性腦卒中患者。納入標準：①發病時長＜48 h；②符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南》及國家中醫藥管理局腦病急癥科研協作組的《中風病診斷與療效評定標準》中的診斷標準[8]，且經過相應的影像學檢查確診。排除標準：①合并惡性腫瘤或重要臟器器質性病變者；②由于其他病因導致患者出現認知障礙；③對奧拉西坦或丹紅注射液過敏者。通過抽簽法將100例缺血性腦卒中患者隨機分為觀察組及對照組，每組各50例。觀察組男27例，女性23例；年齡27～83歲，平均（59.19±3.88）歲；平均病程（12.65±8.35）h；病灶位置：單側31例，雙側19例；文化水平：本科及以上17例，中學22例，小學及以下11例。對照組男26例，女24例；年齡26～82歲，平均（60.04±3.76）歲；平均病程（12.47±8.54）h；病灶位置：單側30例，雙側20例；文化水平：本科及以上18例，中學23例，小學及以下9例。兩組患者性別、年齡、平均病程、病灶位置及文化水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究患者均知情同意，本研究經本院醫學倫理委員會審核通過。

1.2 方法

兩組均給予血管擴張、溶栓、降顱壓、抗血小板、促進細胞代謝等常規治療。對照組在常規治療的基礎上聯合奧拉西坦（石藥集團歐意藥業有限公司生產，生產批號：262150921，規格5 ml∶1 g）治療，將其加入0.9%氯化鈉注射液100 ml中靜脈滴注，2.0 g/次，1次/d，治療15 d。觀察組在對照組基礎上給予丹紅注射液（山東丹紅制藥有限公司生產，生產批號：15080847，規格10 ml/支）治療，將20 ml丹紅注射液加入250 ml木糖醇注射液中靜脈滴注，1次/d，治療15 d。

1.3 觀察指標及評價標準

1.3.1 臨床療效評價 以蒙特利爾認知評估量表（MoCA）評分作為療效評價標準。顯效：MoCA評分＞6分；有效：MoCA評分4～6分；無效：MoCA評分＜4分。總有效率=（顯效+有效）例數/總例數×100%。

1.3.2 炎癥因子指標 兩組患者在治療前后于清晨空腹狀態下抽取5 ml外周靜脈血，以3000 rpm離心30 min，分離上層血清，采用酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測白細胞介素-6（IL-6）、超敏C-反應蛋白（hs-CRP）水平，試劑盒購自北京百晶生物技術有限公司，所有操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.3.3 蛋白表達水平 兩組患者在治療前后于清晨空腹狀態下抽取5 ml外周靜脈血，BCL-2一抗兔多克隆抗體購自美國abcam公司，BAX一抗兔多克隆抗體購自瑞士Enzo life公司，Caspase-3一抗兔多克隆抗體購自美國abcam公司。二抗山羊抗兔IgG購自北京北京百晶生物技術有限公司。采用蛋白免疫印跡（western blot）法檢測BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白表達水平，DAB顯色，以GAPDH做內參，并采用Image-Pro Plus 6.0軟件分析圖像，統計BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白表達水平。

1.4 統計學分析

本研究采用SPSS 26.0統計學軟件進行數據分析，患者臨床療效等計數資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗，組間兩兩比較采用卡方分割法，炎癥因子水平、蛋白水平等正態分布的計量資料以（）表示，采用獨立樣本t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組臨床療效比較

研究期間無病例脫落情況發生。觀察組治療總有效率為96.00%（48/50），明顯高于對照組的80.00%（40/50），差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組臨床療效比較[n（%）]

2.2 兩組炎癥因子水平比較

治療前兩組患者IL-6、hs-CRP水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；治療后兩組患者的炎癥因子水平均得到顯著改善，且觀察組各因子水平顯著低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組炎癥因子水平比較（± s）

表2 兩組炎癥因子水平比較（± s）

組別 n IL-6（ng/L） hs-CRP（mg/L）治療前 治療后 t值 P值 治療前 治療后 t值 P值觀察組 50 105.13±10.07 75.02±6.82 17.506 0.000 4.27±1.06 2.19±0.38 13.061 0.000對照組 50 104.88±9.39 93.16±7.47 6.907 0.000 4.31±1.14 3.36±0.61 5.196 0.000 t值 0.128 6.751 0.182 11.512 P值 0.898 0.000 0.856 0.000

2.3 兩組蛋白表達水平比較

治療前兩組患者BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白表達水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；治療后兩組患者各蛋白表達水平得到顯著改善，且觀察組BCL-2水平明顯高于對照組、BAX及Caspase-3水平明顯低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 兩組蛋白表達水平比較（± s）

表3 兩組蛋白表達水平比較（± s）

組別 n BCL-2 BAX Caspase-3治療前 治療后 t值 P值 治療前 治療后 t值 P值 治療前 治療后 t值 P值觀察組 50 0.32±0.06 0.88±0.11 31.603 0.000 1.06±0.22 0.32±0.06 22.946 0.000 1.67±0.23 0.58±0.10 30.732 0.000對照組 50 0.33±0.05 0.59±0.09 17.857 0.000 1.04±0.20 0.61±0.08 14.115 0.000 1.63±0.19 0.92±0.18 19.182 0.000 t值 0.905 14.428 0.476 20.506 0.948 11.676 P值 0.367 0.000 0.635 0.000 0.345 0.000

3 討論

缺血性腦卒中由于發病機制比較復雜、臨床治療難度較大，無法被徹底根治，及時恢復供血可改善患者缺氧表現、縮短病程和減少后遺癥的發生[9]。但由于該病好發生于中老年人，出現后遺癥的風險較高，多為神經認知功能和運動功能障礙[10]。故在缺血性腦卒中的發病過程中，及時改善梗死區血液循環、加強神經功能保護，對減緩疾病的發生發展具有一定意義。中醫辨證治療在缺血性腦卒中治療中的應用越來越普遍，得到了廣泛肯定。丹紅注射液的主要成分為紅花和丹參提取物，其中紅花能夠潤燥散腫，丹參能夠通絡活血、啟閉開竅[11]。奧拉西坦是新一代的腦代謝改善藥物，研究發現其藥效是吡拉西坦的3～5倍，能夠顯著改善腦組織代謝能力，幫助患者恢復腦組織缺氧缺血導致的腦功能障礙[12-13]。

認知功能對于缺血性腦卒中患者的生活能力具有較大的影響，出現認知功能障礙的患者幾乎無法正常生活。本研究發現，觀察組臨床療效明顯高于對照組（P＜0.05）。提示采用奧拉西坦聯合丹紅注射液治療缺血性腦卒中的效果更佳，可顯著改善患者的認知功能。以往研究認為，奧拉西坦能夠通過血腦屏障，有選擇性地作用于紋狀體、海馬體和大腦皮層，并激活、改善和保護受損神經細胞功能[14]。

IL-6是機體免疫反應的重要因子，能夠促進免疫反應細胞的增殖和分化。hs-CRP是炎癥反應的標志物，同時還是一種致炎因子。hs-CRP能夠通過激活補體途徑促使心室重構，導致心肌受損，加重腦組織供血不足的情況，會使缺血性腦卒中患者的病情加重。本研究發現，治療后觀察組炎癥因子水平明顯低于對照組（P＜0.05）。提示奧拉西坦聯合丹紅注射液治療缺血性腦卒中能夠降低炎癥因子水平，與以往的研究結果一致[10]。研究發現[15]，丹紅注射液中的紅花黃色素和丹參酮能夠促進血管內皮細胞的生長，減少血小板聚集，調節纖維蛋白酶原平衡，同時丹紅注射液可擴張腦部血管，改善血液黏稠度，提高病灶血液流量和營養供給。

細胞凋亡發生在多個生理、病理過程中，BCL-2家族的構成比例是調控細胞凋亡的關鍵因素，BCL-2能夠抑制細胞凋亡，BAX能促進細胞凋亡，Caspase-3的激活能有效促進細胞凋亡。研究顯示，BCL-2能夠阻止CytC的釋放，抑制Caspase-3的激活反應，從而阻止神經元細胞的凋亡。本研究中，治療后觀察組各項蛋白表達水平明顯優于對照組（P＜0.05）。提示奧拉西坦聯合丹紅注射液治療對BCL-2、BAX、Caspase-3等的調節作用更加顯著，可通過對細胞凋亡的抑制來保護神經元細胞，從而促進缺血腦卒中患者康復。

綜上所述，聯合應用奧拉西坦和丹紅注射液的治療方案能夠有效提高缺血性腦卒中的臨床療效，緩解機體炎癥反應，這可能與其對BCL-2、BAX、Caspase-3蛋白表達水平的調節作用有密切關系。本研究入選病例有限，且隨訪時間較短，結果可能產生誤差，聯合治療的遠期效果還有待于大樣本研究，在今后的研究中希望可以擴大樣本量以及進行多中心的試驗證實。