蜂王漿中藥物殘留及其檢驗方法

王 琦，劉玉玲，蘭鳳明，王 志

（吉林省養蜂科學研究所，吉林 吉林 132108）

蜂王漿是主要蜂產品之一，是蜜蜂養殖業中的重要經濟來源。它經巢內哺育蜂頭部的咽下腺和上顎腺分泌[1]，呈漿狀，顏色為乳白色、淡黃色或橙色，用于哺育蜂王和工蜂幼蟲[2]。從19 世紀末開始，人們便開始對蜂王漿的主要成分進行了研究[3]。隨著科技的發展，人們對蜂王漿的了解也逐漸加深。學者經研究發現，蜂王漿中大部分由水組成，可占其總量的62.5%～70%，少部分為干物質。干物質含量雖少，但卻富含氨基酸、蛋白質、維生素、礦物質等多種營養物質，還具有一定的生物學活性[4]。因此，蜂王漿也開始作為綠色保健食品進入了人們的視野。

蜂王漿的食品安全問題一直受到人們的廣泛關注。現代化農業生產為了提高農作物產量、減少病蟲為害，開始普遍使用化肥和農藥，這也使蜜源植物常常攜帶各種有害化學物質殘留；再加上蜂農為了治療蜂病所使用的抗生素、除螨劑等蜂藥在蜂箱中均有殘留，使有害物質被蜜蜂富集在其體內，最終影響蜂產品質量，危害人類的身體健康。對蜂王漿中幾種主要的藥物殘留及其檢驗方法進行了綜述。

1 有機磷農藥

1.1 簡介

從20 世紀開始，為防止農作物的病、蟲、草害，農藥被廣泛應用于農作物生產中。如今，大部分的除草劑、殺蟲劑均為更易降解的有機磷農藥，典型的有機磷農藥有敵敵畏、樂果、滅線磷、三唑磷等。

有機磷農藥是指含磷元素的有機化合物農藥，絕大多數為殺蟲劑，對人體的危害從劇毒到低毒不等。農民在農業生產過程中使用農藥，采集蜂在直接接觸后有很大概率死亡。而蜜源植物或從其體表、或從土壤、水源中將有機磷農藥富集在植物體內，經蜜粉傳遞至蜂群中制成蜂糧，最終由蜜蜂消化吸收，因此，其在蜂王漿、蜂蜜、蜂花粉等蜂產品中均可能存在一定殘留。

1.2 檢測方法

SN/T 2577-2010[5]中采用氣相色譜法測定蜂王漿中有機磷農藥殘留量，該方法使用乙腈提取測試樣品中的有機磷農藥，提取液經凝膠色譜柱凈化，使用火焰光度檢測器的氣相色譜儀測定， 使用外標法定量。 Emmanouel 等[6]將實驗樣品經C18 固相萃取技術純化并分離試驗樣品，采用氣相色譜法進行測定蜂王漿中有機磷和有機氯農藥的殘留量。李櫻紅等[7]將蜂王漿樣品通過乙腈提取并進行初步處理后，采用HLB 固相萃取小柱富集凈化，使用高效液相色譜- 串聯質譜法測定了蜂王漿中包括蠅毒磷在內的7 種不同農藥的殘留。

2 殺螨劑

2.1 簡介

蜂螨寄生在蜂體，以吸食蜜蜂血淋巴為生，造成蜜蜂壽命縮短、采集力下降等問題，嚴重時會導致群勢迅速降低，造成巨大損失。常見的蜜蜂寄生螨有大蜂螨、小蜂螨等。為了解決這一難題，殺螨劑應運而生，如氯殺螨、甲基克殺螨、殺螨酯、樂殺螨等。

嚴格來說，殺螨劑也是屬于農藥的一種，與上述有機磷農藥有所重疊。但不同的是，殺螨劑直接在蜂巢中使用。殺螨劑雖然對蜜蜂無害，但仍會被蜜蜂吸收進體內，同時在蜂產品中有所殘留，最終影響蜂產品品質。

2.2 檢測方法

SN/T 2571-2010[8]中采用氣相色譜- 質譜法檢測殺螨劑殘留量，通過1 : 1 的正己烷和丙酮混合試劑提取殘留的殺螨劑，然后使用弗羅里硅土柱凈化，通過氣相色譜- 質譜- 負化學源測定，外標法定量。曾銀歡[9]將蜂王漿離心處理后使用乙腈+ 水進行樣品萃取，建立了液相色譜串聯質譜的測定方法，對市場購買的蜂王漿樣品中的殺螨劑（四螨嗪、喹螨醚、吡螨胺、噻螨酮、乙螨唑等10 種） 殘留進行了測定，相關系數均大于0.99。

3 抗生素類

3.1 簡介

抗生素類與殺螨劑類似，大多屬于直接用于蜂箱內的蜂藥。抗生素種類繁多，憑借其優異的殺菌性能在多種蜂病的治療當中均有應用。如鹽酸土霉素可用于治療美洲幼蟲腐臭病和歐洲幼蟲腐臭病、使用制霉菌素治療白堊病、煙曲霉素治療孢子蟲病等[10]。

3.2 檢測方法

GB/T 22945-2008[11]中使用磷酸溶液提取鏈霉素、雙氫鏈霉素和卡娜霉素，經過三氯乙酸沉淀蛋白，苯磺酸和羧酸型固相萃取柱精華，采用液相色譜串聯質譜法測定其在蜂王漿中的殘留量。李曉東等[12]將樣品采用QuEch-ERs 技術進行提取凈化，UPLC-MS/MS 法同時定性、定量分析了蜂王漿中14 種喹諾酮類藥物殘留。葉有標等[13]采用高效液相色譜- 串聯質譜法分別對干粉和鮮王漿兩種不同狀態下的蜂王漿中四環素類抗生素進行了測定，結果符合產品質量安全標準要求。SN/T 2664-2010[14]中對四環素類抗生素殘留量采用放射受體分析法測定，該方法通過提取出的四環素類抗生素與[3H]標記的金霉素共同競爭結合特異的受體位點，經反應后[3H]測定衰變發出的β 粒子數放射性量值對四環素殘留進行定量分析。SN/T 3027-2011[15]中采用酶聯免疫法測定蜂王漿中氟喹諾酮類抗生素的殘留量。薄海波等[16]通過酸性Na2EDTA-Mcllvaine 緩沖溶液將蜂王漿中蛋白質沉淀并提取其中的藥物殘留通過反相液相色譜柱分離，紫外檢測器監測，外標法定量，結果滿足相關規定的要求。

4 其他藥物

侯建波等[17]使用液相色譜- 串聯質譜法測定了蜂王漿中新煙堿類藥物及其代謝產物的殘留量。譚韓英等[18]利用氣相色譜法測定了蜂王漿中氟胺氰菊酯的殘留量。 SN/T 2573-2010[19]和SN/T 2574-2010[20]中介紹了氣相色譜- 質譜法測定殺蟲脒和雙甲脒及其代謝產物殘留量的監測方法。雙甲脒還可采用液相色譜- 質譜法、質譜法進行測定。

5 展望

近年來，隨著農藥、化肥、食品添加劑等化學產品的大規模使用，食品安全問題開始廣受人們關注。蜂王漿中各類農藥、抗生素的殘留量直接影響著蜂王漿的產品質量，也與人們的生命健康安全息息相關。因其巨大危害，蜂王漿中藥物殘留的允許檢出指標均為mg/kg 量級，屬于痕量分析，因此對監測設備的精密度要求極高。目前，氣相色譜法、高效液相色譜法、質譜法等高精度儀器分析方法應用廣泛。此外，質譜儀憑借其通用性、高精度等優點也被作為氣相色譜、高效液相色譜的檢測器使用，即氣相色譜- 質譜法和高效液相色譜- 質譜法，高效、高精度，但也有價格昂貴等問題。因此，更廉價、簡單便捷、高效、高精度的檢測方法研究一直是該領域的研究方向。