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顯色培養基在檢測食品中沙門氏菌的應用研究

2021-12-02 03:00:57范志龍
食品安全導刊 2021年14期
關鍵詞:實驗檢測

本文通過對顯色培養基沙門氏菌檢測方法進行研究,通過相關實踐檢測分析和對比,沙門氏菌是影響食品公共衛生安全的重要因素之一。

隨著這些年的發展,顯色培養基成為當前一種新型的食品沙門氏菌培養基。在以往培養基的基礎之上,增加了一種新型的具有組合式的特異發色性酶底物,一旦特異酶在細菌發酵過程中顯現出特異性的發色底物以后,那么當目標菌落呈現出不同顏色,此時就能對目標菌落進行有效的鑒別和分離措施,也可以通過計數的方式進行。

其中沙門氏菌有一種非常重要的性質就是食源性。目前,沙門氏菌在進行檢測時依舊沿用傳統生化的方式進行,這個過程包括了分離培養、增菌、生化鑒定、血清鑒定等多個步驟。這樣的方式所需要的時間久,通常是需要一周的時間,并且操作的難度大,準確度低。為此,這些年以來沙門氏菌顯色培養基由于其操作簡單、具有很強的選擇性、所需要的時間較短,從而被全面推廣。這與其他顯色培養基相比較而言,更能被人們所接受。通過總結這些年顯色培養基在進行沙門氏菌檢測時,結合技術人員所培養得出的成果,從而獲得以下經驗:

培養基的菌落種類

進口類沙門氏菌顯色培養基對于市面上常見的幾種進口沙門氏菌可以有以下幾種:美國BD、法國AES、法國科馬嘉、英國OXOID 等品種,它們的共同特點是菌落小、沙門氏菌所實驗的菌落顏色對比十分明顯。進口沙門氏菌在進行顯色培養基過程中使用最為廣泛的屬法國 CHROMagar 顯色培養基,所呈現出顏色則為紫色[1]。

國產類的沙門氏菌顯色培養基沙門氏菌培養顯色培養基在使用過程中較為簡便,從而降低了檢測的整體工作量。我國許多培養基都是靠自主研發,當前,國產類的沙門氏菌顯色培養基在使用過程中主要有以下三種銷售量最多:廣東環凱、北京陸橋以及青島海博。其中北京陸橋的通過顏色可以判斷出這跟法國科馬嘉的顯色培養基的效果是相同的;對于沙門氏菌會呈現出紫紅色,那么不是沙門氏菌則呈現出藍綠色或者是沒有顏色。在2009 年廣東環凱沙門氏菌顯色培養基獲得了全國的發明銀獎,對沙門氏菌其顏色則呈現出粉紅色,如果是大腸桿菌或是大腸菌落則呈現出顯藍色,枸櫞酸桿菌則會呈現出紫色,對于其他菌落顯無色或者黃色。

沙門氏菌培養基應用研究

從1974 年開始法國 CHROMagar公司便開始進行顯色培養基的相關研究,為此,從2000 年開始沙門氏菌顯色培養基就開始投入使用,對于所研究可以從兩大方面進行分析: 其一,沙門氏菌顯色培養基跟以往的選擇性的培養基進行比較,可以發現沙門氏菌培養基可以全面取代以往的選擇性的培養基;其二,是屬于國產類的沙門氏菌培養基與國外的沙門氏菌培養基對比實驗。

培養基及試劑沙門氏、志賀氏、腸道菌、GN 增液菌、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)、瓊脂(SS、HE)。北京陸橋生物技術有限責任公司所制定出培養基試劑:腸道綜合雙糖管以及對腸桿菌科鑒定進行編碼。沙門氏菌顯色培養基產地來自法國科馬嘉公司,那么則由鄭州的博騫生物技術研究所進行分裝。對于沙門氏菌、大腸埃希氏菌以及志賀氏族進行診斷的血清選購來自蘭州生物制品研究所。上面所使用的試劑都是在有效期內[2]。

所用儀器和設備生物安全柜、顯微鏡、電熱恒溫培養箱、電子天平、高壓滅菌鍋。

實驗方法在實驗過程中初了所使用的顯微鏡和培養基配置之外,具體的實驗操作應該在100— 1000 級具有生物特性的潔凈室內。

第一,菌株檢測方法按照 GB/T4789— 2008 中相應操作規程進行;第二,菌株的篩選和鑒定經過初篩在CAS、SS、HE 分離平板上挑取相應的疑似菌落接種雙糖鑒別生化管,初篩符合者,血清玻片凝集試驗和鏡檢,系統生化鑒別實驗。

討論

沙門氏菌成為引起人們食物中毒或者是導致腸道腹瀉的病原菌之一,成為重要的腸道病原菌。其中通過添加了特異的顯色底物的方式就能更快檢測出樣品中所含的沙門氏菌,從而快速地提高檢測的準確率。當前沙門氏菌檢測的方法依舊沿用之前的生化方法,其中包括了亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液增菌、分離培養、血清型鑒定生化鑒定等多個步驟,這個過程一般需要一個星期,操作起來比較繁瑣,并且不能很好地保證和滿足微生物檢測要求,所以,要快速檢查沙門氏菌顯色培養基這個是非常重要的環節。通過顯色培養基進行微生物鑒定的方法,成為這些年配置新型快速檢測關鍵技術,就能直接根據沙門氏菌的實驗菌落的顏色,從中獲取相關的變化進行初步的鑒定,從而能有效減少其他的干擾因素。在腸道相關的診斷部門來看,其對食物的采集并不是很規范,對于培養基而言有其局限性等眾因素的影響,從而使以往的檢測分離方法的靈敏度降低。 由于顯色培養基具有高靈敏度、高效率等優點,作為一種新型的微生物檢測技術,這種方式得到人們普遍的認可。對于沙門氏菌在 CAS 顯色平板上,其所呈現出的菌落顏色非常容易辨別出來是紫色,然而不是沙門氏菌則會表現為藍色或者是灰白色,則充分說明 CAS 平板的沙門氏菌檢出率都普遍高于 SS 以及HE 平板,從而有效簡化相關的程序,節約時間,由此可見,在進行顯色培養基時,是屬于有價值的分離鑒定平板,可以作為以往平板的補充[3]。

結語

總而言之,對于CAS 平板而言其具有易鑒別、選擇性好的特點,其最大的優勢是對普通培養基的選擇,尤其在面對突發事件的處理過程,通過選擇CAS 平板的鑒定方式就能取得很好的結果。通過將顯色培養基與以往的檢測技術結合的方式能對食物性致病的菌落進行檢測,能快速地獲取到結果,最終成為微生物快速檢測技術發展的重要方向。

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