能力驗證過程中出現的問題及解決方法

鶴壁市農產品檢驗檢測中心 張艷麗 劉宏偉 宋保軍 劉小麗 王麗娟 王風英 張斌

能力驗證是通過實驗室間的比對結果來確定實驗室檢測能力的活動。通過能力驗證，可使實驗室了解分析項目的整體水平和自己所處的位置，進一步提高自身技術能力和管理水平。筆者將近10 年的能力驗證分享如下：

一、標液不出峰

（一）問題

2008 年9 月27 日，檢測15 號樣品，標液濃度2.0 μg·mL-1，稀釋成0.2 μg·mL-1，發現久效磷不出峰，其他峰也較之前峰面積減小，判斷可能有漏氣地方。

（二）解決方法

檢查進樣墊、襯管上的“O”型圈、檢查色譜柱兩端的石墨墊，發現接檢測器的石墨墊有松動，重新擰緊，進樣后久效磷出峰。

二、標液重合

（一）有機磷標液重合問題

2012 年2 月21 日，檢測10 號樣品，標液進樣后，發現二嗪農與氧化樂果完全重合，用DB1701 色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）。

（二）解決方法

10 號樣品中出峰時間與標液中的二嗪農或氧化樂果重合，改變程序升溫后，仍不分離，更換相同型號的VF1701 色譜柱，二嗪農與氧化樂果分離，判斷出10 號樣品中添加的是二嗪農。

三、標液定性

要求使用未失效新打開的標液。如果標液稀釋后放的時間較長，可能會降解。如果出現多峰，定性成了問題。

（一）丙溴磷出2 個峰

2020 年10 月8 日，115 號樣品，準備過程中先進標液確定保留時間，丙溴磷標液是3 個月前打開的，進氣相色譜儀后，出現2 個峰，但是用新買的丙溴磷標液打開后，只出1 個峰。

（二）解決方法

將新買的2 支丙溴磷標液都打開，進行稀釋進樣，只出1 個峰，同時盲樣樣品中也只出1 個峰，確定舊丙溴磷降解，不能使用。標液最好現用現買，放的時間長了會降解。

（三）三唑酮、三氯殺螨醇的定性

氣相色譜儀以保留時間定性，當2 種農藥完全重合時無法判斷，這時要更換柱子或用氣質聯用儀或液質聯用儀進行判斷。

（四）解決方法

如果想讓它們分離，要換不同極性的色譜柱，比如要用DB1701 色譜柱，還可以用氣質聯用儀，用MRM 方法掃描，用4 個離子對來判斷。

四、標液重現性

儀器穩定，標液重現性較好時，才能準確計算樣品的結果。

（一）峰面積越來越小

2012 年2 月21 日，做10 號能力驗證樣品，配甲拌磷與二嗪農混合標液0.2 μg·mL-1，在第1 天早上、晚上及第2 天早上分別進樣，甲拌磷標液的峰面積越來越小，但二嗪農標液的峰面積穩定。

（二）解決方法

配混合標液進樣，如果兩種標液峰面積同時增大或減小，與儀器有關，可能與進樣墊、襯管、色譜柱等漏氣或污染有關。但一種標液正常，另外一種標液峰面積不斷減小，可能與標液質量有關。打開另外1支新的甲拌磷，還是同樣的問題，可能是這一批次的標液都有問題。購買其他批次的甲拌磷，稀釋后進樣，2 天內峰面積穩定。

（三）峰面積越來越大

配制敵敵畏、甲基對硫磷的標液0.5 μg·mL-1，隨著進樣次數的增加，峰面積逐漸增大。

（四）解決方法

峰面積逐漸增大，與襯管污染、色譜柱污染有關，色譜柱要老化，切柱頭，需要關機再開機，時間太長。因此，可以先換襯管，使用新的高惰性襯管，再次進樣，峰面積穩定。

五、平行樣品不平行

（一）前處理問題

2012 年的能力驗證，10 號樣品，按照NY/T 761-2008 標準要求進行前處理，2 個平行樣品的結果相差近一半，相對偏差較大。

（二）解決方法

先排查儀器的問題，認為問題出在前處理上，取空白樣品，在樣品中做加標試驗，氮吹時在同一根氮吹針上完成，2 個平行樣品結果相近，取盲樣所剩的乙腈液體，在這根氮吹針上重新做前處理，得出的數據與原樣品平行。原因是不同的氮吹針上調節的氣流不同，氮吹近干環節沒有把握好，導致平行樣品不平行。

（三）樣品問題

2018 年能力驗證時，一盒筍瓜樣品、一盒蘋果樣品，從每盒里取3 個平行樣品進行檢測，得出的結果不平行。

（四）解決方法

當能力驗證樣品是1 個空白樣和1 個盲樣，需要一次性解凍所有樣品，用玻璃棒充分攪勻，再進行超聲，混勻器上混勻后，把所有盲樣同時分裝成三等份樣品。取1 份先進行檢測，即定性實驗和初步定量實驗，需要通過對比盲樣與空白樣確認出添加的農藥和各自的添加水平，在定性實驗和初步定量實驗結果確定后，再拿出另外2 個盲樣做正式實驗，同時進行與加標濃度同一水平的加標實驗，計算不同農藥的回收率。這樣處理是為了避免樣品多次解凍、多次稱量造成的誤差。

六、回收率低

能力驗證時，除了做盲樣，同時要做加標回收，確保前處理過程及儀器沒問題。

（一）加標回收率低問題

甲胺磷、敵敵畏、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯等都出現過回收率低的問題。有機磷回收率低大都出現在氮吹環節，有機氯及菊酯類大都出現在氮吹、用弗羅里矽柱凈化等環節。

（二）解決方法

有機磷類在氮吹時，氮吹近干的狀態是燒杯里面有一滴時，取出，用吸耳球吹一下，燒杯底下潮濕即可。如果燒杯底完全干了，則回收率低。有機氯及菊酯類在氮吹時要注意，用弗羅里矽柱凈化時，要先淋洗弗羅里矽柱，再倒入樣品液，弗羅里矽柱不能干。洗脫過程要自然流下，不要用外力擠壓，容易造成樣品不平行。

七、基質效應

（一）農殘檢測基質效應問題

2014 年能力驗證時，做14 號樣品，用丙酮配制混標，同時做加標回收，發現水胺硫磷的回收率高達140%，其他組分的回收率也較高。

（二）解決方法

用筍瓜基質配混合標液，使用高惰性襯管進樣減少目標物的吸附，農藥加標回收率正常。用標液的峰面積來計算盲樣，得出最終結果。

八、重現性不好

（一）問題

重現性不好，多是漏氣、襯管污染、色譜柱污染、進樣針堵塞等引起的。2020 年6 月8 日能力驗證時，樣品峰面積，連進2 針，重現性相差21%。

（二）解決方法

檢查進樣口與色譜柱等都未發現問題。檢查進樣針，進樣針無折斷，卸下清洗時，發現針芯有一段變黑，可能是磨損所致，更換新的進樣針，重新進2 針，重現性在3%以內，問題解決。

九、出平頭峰

（一）問題

2020 年6 月8 日能力驗證時，三唑酮標液配制0.1μg·mL-1時出現平頭峰，盲樣進樣后，三唑酮也出現平頭峰。

（二）解決方法

出現平頭峰，可能是濃度超載后峰面積不準確。解決平頭峰有兩種方法：一是稀釋樣品，標液也同樣進行稀釋，稀釋時要注意計算準確，得出準確的稀釋倍數。二是調節儀器的靈敏度，GC450 氣相色譜儀上ECD 檢測器有1 與10 兩種靈敏度，數字越大，響應值越大，峰面積越大，兩者相差10 倍，調節成1 的靈敏度后，不再出平頭峰，峰高且尖銳，準確計算出樣品含量。

為順利通過能力驗證，必須要加強培訓與練習，對能力驗證出現的問題進行總結，對關鍵點進行嚴格把控，組織人員進行加標回收、質控樣等試驗，對出現的問題及時解決。