臨床微生物檢測系統的性能驗證及注意事項

文 馮佼 （四川省鄰水縣人民醫院）

本篇文章的主體中心在于分析并總結臨床微生物常用檢測系統的性能以及有關注意事項，并提出在臨床微生物檢驗自動化水平持續提升的基礎上，儀器的性能評價也是需要重視的。檢測系統的性能評估是提升臨床微生物檢驗質量的基本前提，以此推進ISO15189醫學實驗室認可，并保障微生物實驗室的服務與檢測水平得到不斷提升。

制訂科學的驗證計算

可由醫院實驗室的主管人員對驗證計劃進行制訂，在此基礎上還要確定驗證計劃的起始時間、共同參與的工作人員以及計劃花費的時間等。比如，有醫藥行業標準必須嚴格根據行業的有關標準加以校對，若無參考標準，儀器即需根據我國規定的行業標準（YY/T0654-2008）文件來加以校對，一般情況下，儀器廠家均會授權相應的工程師來加以校對，現場還需安排相關人員確認監督，若無校對，即可要求對應的廠商進行解決，直至與國家標準文件報告相符合即可。實驗室的技術人員以及微生物檢測負責人要對系統分析性能加以評價，確保系統性能的正常工作。

依照計劃完成微生物檢測系統性能驗證

精密度驗證可參照CLSI（美國 臨床實驗室標準化研究所）出具的EP15-A2文件，取出2個水平質控品，并對其展開檢測工作。應注意的問題的是相同批號質控品必須完善準備，批間批內驗證的過程中切不可產生質控品不足引發的批號更換現象。重復性精密度也就是我們通常所說的批內精密度，于室內質控需要確保在控的基礎上將呈現不同水平（濃度）質控品于插入至患者樣本中，并在此基礎上實施檢測，對其標準差、均值、變異系數等加以計算，對項目的批內精密度進行驗證（總誤差可＜1/4CLIA’88）。

中間精密度也就是臨床說的批間精密度，于室內質控（同樣保證在控）的基礎上，2個不同濃度質控品插入標本實施檢測，每一次均要測定兩遍，取兩個檢測數據的平均值，連續檢測20天，對其標準差、均值以及變異系數加以計算。驗證的批間精密度，其評判可＜1/3CLIA’88。而在此需注意的問題是，對于一些允許總誤差相對小的項目檢測，若未嚴重控制其質量，將無法準確通過評語，這還需要從操作手、試驗材料、環境、儀器以及方法等不同環節上加以控制。

對于準確度的驗證可依照CLSI EP9A2文件來實施，對檢測系統加以統計，并參與12個月的衛生部間質評成績，使用本實驗室的檢測值，并在此檢測衛生部門臨檢中心發入出的室間質控品，對其檢測值以及靶值的相對偏倚加以計算，同時統計其平均值，偏倚值總誤差可＜1/2CLIA’88。值得注意的是，驗證過程中最好能保證有12個月的室間質控成績，并且還應進行間質評，以優良為最佳。

差異結果的解決措施：由CLSIM52文件來為差異性結果指導相關的解決方法，在鑒定驗證的過程中，可由原來已經過驗證系統與新系統檢測相同的菌株，若2個系統檢測結果呈現出明顯差異，即可運用第3種方式加以檢查仲裁。在情節藥敏實驗驗證時，若2個系統的檢測結果呈現出顯著差異性，實驗室即可對藥敏結果出現差異菌株進行二次檢測，舊系統與新系統中用同一培養液一式三份或平行展開二次檢測。如果二次檢測的結果相一致，即表明驗證已通過，若2個系統二次檢測結果還存在差異性，即可通過CLSI參考方法對檢測的差異問題進行解決。

微生物檢測系統性能驗證的風險評估與人員培訓

（1）風險評估。實驗室在對系統性能展開驗證之前，還需對其藥敏檢測系統以及商品化鑒定的有關風險進行評估與思考，這類風險具體包含了系統變化相關風險、錯誤結果風險等，可根據CLSI EP23文件來加以評定，同時，還應與實際情況相結合來制定實驗室的風險評估方案，將評估結果記錄下來，以供查驗核對。

（2）人員培訓。在實驗室安裝藥敏檢測與微生物鑒定系統后，要注意由廠家的技術人員對醫院微生物實驗室的相關人員進行培訓教育，為了保證工作人員的學習質量，還可配合考核來檢查，合格后即可進行下一步的審核報告與儀器操作工作。廠家與工作人員在性能驗證前要檢測并保障儀器系統的正常運行。據實驗室相關系統對工作人員的培訓情況與考核成績記錄下來。實驗室對藥敏系統與微生物鑒定性能驗證方案即包含了工作人員在檢測中得到可重復且正確鑒定以及藥敏結果的工作能力。

結束語

臨床微生物檢驗在臨床醫學檢驗中屬于一項重要的學科，但是因為手工操作相對較多，而自動化程度低，所以無法與其他專業組產生對比性。隨著ISO15189醫學實驗室認可對實驗室質量以及能力要求的提升，臨床微生物檢驗作為檢驗科的基本組成部分，其檢驗能力與質量也要不斷提升。近些年以來，臨床醫生物檢驗自動化水平有所提升，它的檢驗系統的性能評價也將十分重要。從上文可知，美國的CLSI文件體系藥敏與微生物鑒定系統性能驗證上具有一定的參考性，此文件體系相對較嚴格，執行大成本也不低，它可從正確度與精密度指標來進行驗證，所出具的質控要求相對明朗，值得臨床推廣使用。