老年腦膠質瘤組織中骨膜蛋白及EMT標記物的表達及臨床意義

潘曉燕 范宜娟 楊瀅瑜 陳榮 湯芃芃

(上海寶山區仁和醫院 上海復旦大學附屬華山北院寶山分院病理科，上海 200431)

腦膠質瘤在顱內腫瘤中占比較高，高級別腦膠質瘤較多見，且惡性程度高，侵襲能力強，病情進展快〔1〕。目前，腦膠質瘤主要治療方式為手術聯合放化療，能有效緩解病情，但緩解時間較短，患者5年生存率不足5%〔2〕。因此，尋找腦膠質瘤新的標記物和新的治療靶點至關重要。上皮-間質轉化(EMT)能通過促進腫瘤細胞擴散至遠處，增加腫瘤的惡性行為，導致轉移〔3〕。研究表明，EMT與腦膠質瘤惡性程度相關，EMT標記物上皮鈣黏蛋白(E-cad)、纖連蛋白(Fn)、波形蛋白(Vim)、神經鈣黏蛋白(N-cad)能在一定程度上反映腫瘤惡性程度〔4〕。骨膜蛋白(POSTN)可誘導腫瘤細胞活化，促進腫瘤細胞侵襲和遷移〔5〕。有研究發現，POSTN能通過調控EMT過程，參與腫瘤的發生發展過程〔6〕。但是，目前關于POSTN、EMT與腦膠質瘤惡性程度關聯的相關研究較少。基于此，本研究分析老年腦膠質瘤組織中骨膜蛋白及EMT標記物的表達及臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性收集上海寶山區仁和醫院2017年1月至2020年4月完成神經外科手術的105例老年腦膠質瘤患者臨床資料，患者腦膠質瘤標本、正常組織標本均保存完整。患者中男58例，女47例；年齡63～81歲，平均年齡(72.54±5.53)歲；腫瘤直徑2.11～5.94 cm，平均直徑(3.88±0.54)cm；分級：Ⅰ級10例，Ⅱ級36例，Ⅲ級22例，Ⅳ級37例。

1.2入選標準 (1)納入標準：①符合《中國腦膠質瘤分子診療指南》〔7〕中腦膠質瘤診斷標準；②年齡>60歲；③在上海寶山區仁和醫院首次手術切除；④經手術病理確診為腦膠質瘤；⑤實驗室數據庫中有可用的組織蠟塊。(2)排除標準：①合并其他惡性腫瘤；②其他疾病史及治療史；③臨床資料不完整。

1.3免疫組織化學染色法 10%中性甲醛固定、石蠟包埋的組織標本4 μm厚連續切片，常規脫蠟、脫水，抗原修復，阻斷內源性 過氧化物酶，Envision二步法進行免疫組織化學染色，二氨基聯苯胺顯色，蘇木素復染，常規脫水透明，封片。免疫組織化學染色評定標準：隨機選取5個高倍鏡視野觀察，細胞質或細胞核出現黃色或棕黃色為陽性細胞。根據染色程度進行惡性程度評分：無染色0分，淡黃色1分，黃色2分，棕黃色3分。根據陽性細胞百分比進行評分：陽性細胞百分數≤5%為0分，>5%且≤25%為1分，>25%且≤50%為2分，>50%且≤75%為3分，惡性程度>75%為4分。染色程度與陽性細胞百分比相乘的結果作為最終評定惡性程度標準：0分為陰性(-)，1～4分為弱陽性(+)，5～8分為中等陽性()，9～12分為強陽性()。

1.4統計學方法 采用SPSS24.0軟件進行秩和檢驗、Kendall′s tau-b相關性分析檢驗。

2 結 果

2.1腦膠質瘤組織和正常組織中POSTN及EMT標記物表達 腦膠質瘤組織中POSTN、Fn、Vim、N-cad表達高于正常組織，E-cad表達低于正常組織，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 腦膠質瘤組織和正常組織中POSTN及EMT標記物表達〔n(%),n=105〕

2.2不同級別腦膠質瘤組織中POSTN及EMT標記物表達 高級別腦膠質瘤組織中POSTN、Fn、Vim、N-cad表達高于低級別腦膠質瘤組織，E-cad表達低于低級別腦膠質瘤組織，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同級別腦膠質瘤組織中POSTN及EMT標記物表達〔n(%)〕

2.3POSTN及EMT標記物表達與腦膠質瘤惡性程度的相關性 腦膠質瘤組織中POSTN、Fn、Vim、N-cad表達與腦膠質瘤惡性程度呈正相關(r=0.545、0.671、0.624、0.630，P<0.05)；E-cad表達與腦膠質瘤惡性程度呈負相關(r=-0.649，P<0.05)。

2.4POSTN與EMT標記物表達相關性 POSTN與Fn、Vim、N-cad表達正相關(r=0.173、0.481、0.168，P<0.05)；POSTN與E-cad表達呈負相關(r=-0.410，P<0.05)。

3 討 論

腦膠質瘤侵襲性強、增殖快，目前仍無法通過手術清除，術后通常需聯合化療〔8〕。但是，腦膠質瘤患者由于膠質瘤、血腦屏障水腫，造成腦組織間隙靜水壓升高，對化療藥物的濃度造成影響，可能會影響化療效果，容易導致復發〔9〕。

在腫瘤侵襲過程中，EMT現象具有重要的作用〔10〕。POSTN是一種糖蛋白，分子質量相對較高，具有多功能性，參與細胞外基質的組成〔11〕。研究表明，POSTN高表達和腫瘤轉移具有密切的聯系，會增加預后不良的風險〔12〕。本研究結果說明，惡性程度越高的腦膠質瘤組織POSTN表達越高，EMT越嚴重。由此推測，POSTN、EMT標記物可能與老年腦膠質瘤的發生發展相關。進一步經相關性分析，結果顯示，腦膠質瘤組織中POSTN、Fn、Vim、N-cad表達與腦膠質瘤惡性程度呈正相關；E-cad表達與腦膠質瘤惡性程度呈負相關。分析原因為：POSTN能使腫瘤細胞中Wnt信號加強，從而調節腫瘤微環境，促進腫瘤細胞的生長，強化腫瘤細胞的生存能力，促進腫瘤惡化〔13，14〕。作為一種基質蛋白，POSTN也能影響細胞的黏附過程促進腫瘤的侵襲與增殖，參與腫瘤血管、淋巴管的形成，促進轉移〔15〕。EMT現象與腦膠質瘤惡性程度的相關性已被證實，如李楠等〔16〕研究。本研究說明，POSTN可能通過影響EMT，參與腦膠質瘤的發生發展。分析原因為：POSTN參與癌癥壞死進程，對局灶性黏附激酶等生存信號及前侵襲信號具有調節作用，從而影響轉移癌癥細胞的活性，促進EMT現象〔17〕。Ouanouki等〔18〕研究中使用花青素抑制POSTN后，Fn、Vim表達降低。說明，POSTN可能是調節EMT標記物的關鍵信號中間蛋白，可見POSTN調控EMT過程影響膠質瘤發生、發展的相關機制有一定的研究價值，可在未來進一步進行研究分析明確。

綜上所述，老年腦膠質瘤的發生發展與組織中POSTN表達、EMT標記物有一定聯系，檢測POSTN及EMT標記物或可指導老年腦膠質瘤病情評估。