蘇 娜,于金丹,石全剛,尹昭彤
(沈陽鳥島經營管理有限公司,遼寧 沈陽 110161)
黑天鵝(Cygnus atratus)為鴨科天鵝屬的一種大型游禽,產于澳洲,棲息于湖泊、海岸、溪流等水域,主要以一些水生植物為食,偶食魚、蝦與螺類,是具有觀賞價值的珍貴野生禽類[1-3]。黑天鵝體質較強,具有一定的抗病能力,不易發病[4]。目前,國內關于黑天鵝疾病診斷方面的文獻較少。本文對沈陽鳥島經營管理有限公司死亡的1只黑天鵝進行綜合分析與診斷,確定死亡原因為東方次睪吸蟲與大腸桿菌混合感染,此結果為黑天鵝疾病的預防與治療提供參考。
2021 年6 月9 日,沈陽鳥島經營管理有限公司天鵝湖內1只黑天鵝死亡。尸體呈自然趴臥狀,身體表面無創傷,口鼻及肛門較干凈。經確認該黑天鵝死前無打斗行為,精神狀態及采食情況均正常。該黑天鵝死亡后,其余黑天鵝狀態正常,該散放區域內其他鳥禽無患病或死亡情況發生。死亡黑天鵝為沈陽鳥島自然繁殖9月齡亞成體,生長發育與成年黑天鵝相比,在體重、體長、翼展等方面均偏小,死亡黑天鵝體尺參數見表1。

表1 死亡黑天鵝體尺參數Tab.1 Death black swan body size parameters
由圖1~圖4可知,死亡黑天鵝膽囊腫大、質地變硬,膽汁渾濁、膽管發炎、堵塞;腸黏膜腫脹、充血、出血;肝臟腫大、變性[4];肺臟存在褐色壞死,心肌萎縮塌陷,腹腔內有惡臭氣味,肌胃、腺胃正常。

圖1 死亡黑天鵝肝膽管Fig.1 Death black swan liver bile duct

圖2 死亡黑天鵝腸道Fig.2 Death black swan intestine

圖3 死亡黑天鵝膽囊Fig.3 Death black swan gall bladder

圖4 死亡黑天鵝肝臟Fig.4 Death black swan liver
由圖5、圖6可知,取死亡黑天鵝膽囊、肝臟涂片,顯微鏡下觀察到有大量寄生蟲蟲卵存在。對天鵝湖水中的魚、蝦、螺等水生動物進行鏡檢,發現存在大量相同形態的寄生蟲蟲卵,因此推測水域內的魚、蝦、螺為中間宿主,該黑天鵝通過食入魚、蝦、螺等中間宿主而引發寄生蟲感染。

圖5 膽囊涂片鏡檢(×40)Fig.5 Gallbladder smear mirror(×40)

圖6 天鵝湖魚類肌肉組織涂片鏡檢(×40)Fig.6 Swan lake fish muscle tissue smear microscopy(×40)
將死亡黑天鵝肝臟樣品在無菌操作下,分別接種到血平板固體培養基、營養瓊脂培養基、麥康凱培養基及三糖鐵培養基中,觀察細菌生長特性,鑒別細菌種類[5-7];進行藥物敏感試驗,測量抑菌環直徑,選擇敏感藥物[8]。結果顯示,在樣品中培養出的細菌初步鑒定為大腸桿菌。由表2可知,該菌對頭孢曲松敏感。

表2 藥敏試驗結果Tab.2 Drug sensitivity test results

圖7 安卡拉病原PCR檢測結果Fig.7 Ankara pathogen PCR test results
通過提取死亡黑天鵝肝臟組織中的總DNA,用特異引物進行PCR,擴增目的基因片段,在954 bp 處未出現目的條帶。結果顯示,該黑天鵝未感染安卡拉病原。將死亡黑天鵝喉頭、肺臟、肛拭子樣品進行預處理[9],采用GICA 反應板進行檢測,結果顯示,該黑天鵝未感染新城疫和禽流感病原。
由圖8 可知,通過病理組織石蠟切片,HE 染色觀察發現,死亡黑天鵝肝細胞發生變性、壞死,肝細胞索紊亂,大量嗜酸性粒細胞增生浸潤。
由圖9可知,死亡黑天鵝腸道充血,腸黏膜炎性細胞浸潤,異嗜性粒細胞增多,上皮絨毛脫落。

圖9 腸道病理組織切片(HE×200)Fig.9 Intestinal pathological tissue slices(HE×200)
由表3 可知,對該黑天鵝棲息的天鵝湖水域進行水體檢測,結果表明,菌群總數、總大腸桿菌數、耐熱大腸桿菌數、大腸埃希氏菌[10]均不符合《生活飲用水衛生標準》GB 5479—2006要求。

表3 天鵝湖水體檢測結果Tab.3 Swan Lake water body test results
經安卡拉病原、GICA病原檢測及發病情況調查顯示,排除感染安卡拉、新城疫、禽流感等傳染病的可能。通過病理剖檢、顯微鏡檢查與組織切片檢查等結果與寄生蟲生活史等綜合分析,初步診斷該死亡黑天鵝為東方次睪吸蟲與大腸桿菌混合感染[11]。
根據診斷結果,本病例可采取頭孢曲松及丙硫苯咪唑進行藥物治療。由于本次黑天鵝死亡為個體發病,同一水域內其余黑天鵝與其他鳥禽均未出現發病情況,因此主要采取以下預防措施。
鵝湖為我園一處人工湖。鑒于該湖從未干塘,水體污染嚴重,大腸桿菌數超標,易引發鳥禽感染大腸桿菌疾病[12]。因此,在秋季干塘,清理湖底污物,更換水源,對水質進行監測。在干塘換水期間,對天鵝湖內魚、蝦、螺等進行徹底撲殺,采取必要措施減少或消滅中間宿主[13]。定期對天鵝湖水域進行消毒,采取每立方米水潑灑20 g次氯酸鈣的方式進行水體消毒[14]。對天鵝湖岸邊區域進行噴灑消毒,交替使用不同種類消毒劑,以保證消毒效果。對天鵝湖岸邊糞便及時清理,并采取無害化處理,避免糞便中攜帶蟲卵傳染給其他鳥禽[15]。
本次黑天鵝發病死亡后,對區域內所有水禽投喂吡喹酮進行藥物驅蟲,采集糞便進行鏡檢,均未發現存在寄生蟲蟲卵。對天鵝湖內放養的魚、蝦、螺等每月進行1 次鏡檢,對區域內的水禽每周采集1次糞便進行鏡檢[16],以便及時發現是否存在寄生蟲感染[17-18]。按防疫計劃進行預防性驅蟲,每年2次,分別在春、秋兩季,使用阿苯達唑伊維菌素粉按說明計量進行預防[19],對驅蟲效果做好跟蹤記錄。
夏季天氣悶熱潮濕,需定期更換天鵝湖岸邊墊草,避免墊草發潮變霉[20]。保證投食盆、水盆的干凈衛生,每天進行清洗與浸泡消毒,對投食區域多注意觀察,避免所飼食物發霉變質。對該區域內所有水禽定期投喂生物脫霉制劑、白頭翁散及多種維生素[21],進行疾病預防。
本次黑天鵝發病過程為東方此睪吸蟲蟲卵在天鵝湖水域內浮出毛蚴,鉆入螺類體內發育為尾蚴,后感染水域內魚類并發育為囊蚴,黑天鵝因食入感染囊蚴的魚而感染。同時,水質污染嚴重、天氣悶熱潮濕、墊草及食物易發霉變質、清理不及時等因素,引發大腸桿菌感染,最終導致黑天鵝發病死亡。