偽狂犬病病毒變異株UL3、UL46和UL50基因失活株的構建與生物學特性分析

殷涵臻，張傳健，曾榮愚，費榮梅，王繼春

(1. 南京農業大學動物醫學院，江蘇 南京 210095；2. 江蘇省農業科學院動物免疫工程研究所，江蘇 南京 210014；3. 江蘇省農業科學院國家獸用生物制品工程技術研究中心，江蘇 南京 210014；4. 江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協同創新中心，江蘇 揚州 225009；5. 天康制藥(蘇州)有限公司，江蘇 蘇州 215000)

偽狂犬病病毒(pseudorabies virus，PRV)又稱豬皰疹病毒1型(suid herpesvirus，SuHV-Ⅰ)，最早由匈牙利科學家所分離[1]。該病毒可引發偽狂犬病(pseudorabies，PR)，許多家畜和野生哺乳動物感染該病會出現神經、呼吸和生殖系統等的癥狀，如瘙癢(小鼠)、繁殖障礙(母豬)、呼吸困難(成年豬)、嘔吐抽搐(仔豬)等[2]。20世紀50年代，我國豬場首次暴發PR，后使用源自匈牙利的弱毒苗Bartha-K61使該病得到了有效控制[3]。然而，2011年以來，PRV變異株在我國豬群中暴發流行，其致病力和傳播力明顯高于傳統毒株，傳統的Bartha-K61已無法提供完全保護[4-5]，新型疫苗的研制迫在眉睫。

TK、PK、gE/gI等為PRV重要的毒力因子，對病毒在哺乳動物機體中的潛伏、入侵有重要作用[6]。科研工作者常把這些基因作為基因工程疫苗的首選靶基因。1985年，Kit等[7]構建了第一株PRV TK基因缺失疫苗。目前，應用變異株研發的gE/gI、gE/TK和TK/gE/gI缺失株可提供有效的保護，但對初生PRV陰性仔豬存在嚴重的安全隱患[8]，暗示其他基因可能影響其毒力。

UL3屬于早期核蛋白，編碼237個氨基酸，大小約為34 kDa[9]。目前UL3的功能尚未明確。研究發現，UL3對單純皰疹病毒1型(herpes simplex virus type 1，HSV-1)體外復制無顯著影響[10]，但可與UL4、ICP22等相互作用從而影響蛋白質在細胞內的定位[11]。Barbara等[9]發現，UL3蛋白缺失不影響PRV在兔腎細胞上增殖，但關于UL3對動物致病力的影響還未見報道。……