胎牛子宮類器官及內(nèi)膜上皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)

趙英博，張君濤，賀來增，張帆，李怡屏，李娟娟，閆鵬輝，張志平，鄧立新

(河南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，河南 鄭州 450046)

隨著養(yǎng)牛業(yè)的產(chǎn)業(yè)化和集約化發(fā)展，生殖系統(tǒng)疾病也越來越多，繁殖性能下降導(dǎo)致巨大損失。目前，常見的生殖系統(tǒng)疾病主要包括胎衣不下、卵巢囊腫、子宮內(nèi)膜炎和陰道炎等，嚴(yán)重影響產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，其中子宮疾病急劇上升，引起了眾多學(xué)者的關(guān)注。子宮是奶牛生殖系統(tǒng)的組成部分，主要包括外層漿膜、中層子宮肌層和內(nèi)層子宮內(nèi)膜，其中子宮內(nèi)膜是子宮干細(xì)胞的存在部位[1]，在動(dòng)物的發(fā)情、妊娠和分娩等過程中發(fā)揮著重要作用[2-4]。因此，建立成熟的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)體系對(duì)于研究子宮內(nèi)膜生理和病理具有重要意義[5]。

類器官是源于干細(xì)胞或祖細(xì)胞的衍生結(jié)構(gòu)[6]，具備類似完整器官的三維結(jié)構(gòu)和生理學(xué)功能。類器官培養(yǎng)方法的建立為組織的正常發(fā)育和疾病致病機(jī)理的研究提供了平臺(tái)[7]。目前，已經(jīng)建立了多種類器官的培養(yǎng)方法，如胃[8]、腸[9]、腎臟[10]、肝臟[11]和腦[12]等。然而對(duì)子宮類器官的研究很少，而且主要通過細(xì)胞混合培養(yǎng)或細(xì)胞支架等方法研究人子宮類器官[13-14]，國(guó)內(nèi)對(duì)于這一方面的研究更是鮮有報(bào)道。國(guó)內(nèi)對(duì)于子宮的研究多局限于體外模型和細(xì)胞方面，并已對(duì)人[15]、羊[16]、牛[17]等多種子宮內(nèi)膜進(jìn)行體外上皮細(xì)胞培養(yǎng)，已建立相應(yīng)的培養(yǎng)技術(shù)，但子宮細(xì)胞由于局限性[18]，市面尚未有相關(guān)細(xì)胞系。本試驗(yàn)通過組織學(xué)檢查選取完整的子宮內(nèi)膜組織，比較不同月齡的子宮類器官培養(yǎng)率，以子宮類器官為基礎(chǔ)分離培養(yǎng)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞，提高子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)效率，為建立完善的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞模型提供借鑒。……