Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌患者血清PON-1活性與代謝綜合征指標(biāo)的相關(guān)性分析

谷冀暉，豆秋彥

(徐州醫(yī)科大學(xué)附屬連云港醫(yī)院，江蘇 連云港 222000)

子宮內(nèi)膜癌(endometrial carcinoma，EC)是發(fā)達(dá)國家常見的婦科惡性腫瘤之一。根據(jù)國際癌癥研究機(jī)構(gòu)統(tǒng)計(jì)[1]顯示，2018年全球新發(fā)EC 38萬例，2020年新發(fā)升至42萬例，而且其死亡率正逐步上升，是發(fā)病率和死亡率均在上升的少數(shù)癌癥類型之一。Ⅰ型EC既屬于激素依賴性腫瘤，又屬于代謝性疾病，其發(fā)病機(jī)制是機(jī)體的代謝紊亂，尤其是糖脂代謝的異常。代謝綜合征(metabolic syndrome)患者體內(nèi)多同時(shí)存在多種代謝異常，如肥胖、胰島素抵抗、高血壓和血脂異常等[2]。越來越多的流行病學(xué)證據(jù)表明，代謝綜合征可以增加EC、乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、肝癌等癌癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。代謝綜合征的發(fā)病機(jī)制與機(jī)體慢性炎癥狀態(tài)及脂質(zhì)氧化應(yīng)激密切相關(guān)，所以其又被稱為“代謝性炎癥”[3]。血清對氧磷酶-1(paraoxonase-1，PON-1)是體內(nèi)抗炎癥反應(yīng)的重要成員之一。PON-1作為機(jī)體保護(hù)因素其活性在代謝綜合征患者中明顯下降[4]。脂質(zhì)相關(guān)氧化應(yīng)激反應(yīng)與EC的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[5]。基于PON-1的抗氧化特性，PON-1活性的改變不僅會(huì)增加糖尿病、高血壓及動(dòng)脈粥樣硬化等多種疾病的患病風(fēng)險(xiǎn)[6-7]，還可能參與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程[8-12]，但是目前鮮有研究報(bào)道Ⅰ型EC患者血清PON-1活性與代謝綜合征指標(biāo)的相關(guān)性。本研究通過測量血清PON-1的活性及代謝綜合征相關(guān)指標(biāo)，分析血清PON-l活性是否為Ⅰ型EC和代謝綜合征這兩種疾病相互關(guān)聯(lián)的重要因素之一。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月至2020年9月于徐州醫(yī)科大學(xué)附屬連云港醫(yī)院就診并進(jìn)行手術(shù)的45例Ⅰ型EC患者為研究組;另以同期收治因其他婦科疾病(子宮平滑肌瘤等)行分段診刮術(shù)或子宮切除術(shù)的50例子宮內(nèi)膜正常患者為對照組。收集患者的一般資料及病理資料。術(shù)后以國際婦產(chǎn)聯(lián)盟(International Federation of Obstetrics and Gynecology，F(xiàn)IGO)2009年的手術(shù)-病理分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分期。所有患者術(shù)前均無放療、化療、內(nèi)分泌治療史及其他惡性腫瘤病史。本研究通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 樣本采集

于手術(shù)當(dāng)日清晨6時(shí)(前一日晚22時(shí)起禁食、水)采取患者肘靜脈血液樣本5 ml:一份離心，留取血清待檢測；一份送至徐州醫(yī)科大學(xué)附屬連云港醫(yī)院檢驗(yàn)科待檢測。

1.3 PON- 1活性檢測

采用內(nèi)源性同型半胱氨酸硫內(nèi)酯法，利用紫外分光光度儀進(jìn)行測定。PON-1水解內(nèi)源性同型半胱氨酸硫內(nèi)酯，生成同型半胱氨酸，與衍生化試劑5,5-二巰基-2,2-二,硝基苯甲酸(5，5′-Dithio bis-2-nitrobenzoic acid，DTNB)進(jìn)行偶聯(lián)后，在412 nm處有最大吸收峰，測定并計(jì)算單位時(shí)間酶促反應(yīng)在412 nm處吸光度的增加量為PON-1的酶活性。

1.4 血清葡萄糖、HDL- C、LDL- C、TG水平的測定

患者血清葡萄糖、HDL-C、LDL-C、TG水平由徐州醫(yī)科大學(xué)附屬連云港醫(yī)院檢驗(yàn)科統(tǒng)一完成測定。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 26.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料和二分類等級資料的相關(guān)分析采用二列相關(guān)分析，計(jì)量資料之間相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組各項(xiàng)指標(biāo)對比

比較兩組患者的年齡、體質(zhì)量、身高、BMI、空腹血糖、舒張壓，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；研究組患者平均腰圍為(78.3±0.65) cm，大于對照組的(67.9±1.35) cm，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組各項(xiàng)指標(biāo)比較

2.2 兩組觀察指標(biāo)比較

研究組患者血清中PON-1表達(dá)活性、HDL-C水平低于對照組，LDL-C、TG水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義, 見表2。

表2 兩組血清PON-1的活性及HDL-C、LDL-C、TG水平比較

2.3 研究組PON- 1活性與臨床病理特征之間的關(guān)系

PON-1活性在子宮內(nèi)膜癌的病理分級、FIGO分期、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而在宮頸內(nèi)膜受累間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表3。

表3 研究組血清PON-1活性與臨床病理特征的關(guān)系

2.4 研究組血清PON- 1活性與HDL- C、LDL- C、TG水平的相關(guān)性

研究組患者血清PON-1活性與HDL-C水平呈正相關(guān)，隨著血清PON-1活性的降低，HDL-C水平逐漸降低(r=0.123 3，P=0.031)；研究組患者血清PON-1活性與LDL-C水平呈負(fù)相關(guān)，隨著血清PON-1活性的降低，LDL-C水平逐漸升高(r=-0.389，P=0.044)；研究組患者血清PON-1活性與TG水平呈負(fù)相關(guān)，隨著血清PON-1活性降低，TG水平逐漸升高(r=-0.271，P=0.020)。見圖1。

圖1 血清PON-1活性與HDL-C、LDL-C、TG水平相關(guān)性分析

3 討 論

EC是女性生殖系統(tǒng)較為常見的惡性腫瘤之一，屬于代謝綜合征類疾病的一種。EC的臨床分型有Ⅰ型(雌激素依賴型)和Ⅱ型(非雌激素依賴型)，其中Ⅰ型EC患者約占EC總數(shù)的65%[13]。流行病學(xué)調(diào)查[14]顯示，Ⅰ型EC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)與代謝綜合征的各個(gè)組成部分密切相關(guān)。代謝綜合征代表一系列可以嚴(yán)重?fù)p害健康的代謝紊亂狀態(tài)，其特征是腹型肥胖、胰島素抵抗、葡萄糖不耐受、高血壓和血脂異常。在一項(xiàng)關(guān)于Ⅰ型EC與代謝綜合征的相關(guān)性分析[15]中，超過50%的Ⅰ型EC患者符合代謝綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)。并且，患有代謝綜合征的EC患者的總生存率是未患有代謝綜合征的1/3[16]。代謝綜合征導(dǎo)致癌癥發(fā)生的機(jī)制與高胰島素血癥、胰島素抵抗、高血糖、高雌激素血癥、胰島素樣生長因子水平增高等因素密切相關(guān)[17]。根據(jù)2013年中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì)(Chinese Diabetes Society, CDS)修訂標(biāo)準(zhǔn)[2]，MS診斷標(biāo)準(zhǔn)為:腹型肥胖(女性腰圍大于85 cm)、空腹血糖>6.1 mmol·L-1或先前診斷患有糖尿病、血清TG水平>1.70 mmol·L-1、HDL-C水平<1.04 mmol·L-1、高血壓或既往診斷患有高血壓。本研究組符合代謝綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者共29例(占該組總?cè)藬?shù)72.5%)，對照組15例(占該組總?cè)藬?shù)30%)。研究組患者BMI為(25.7±1.32) kg·m-2，大于對照組的(23.6±1.08) kg·m-2,由此可在一定程度上提示，Ⅰ型EC患者多具有肥胖的特點(diǎn)。而且研究組患者腰圍平均值大于對照組患者，提示腹型肥胖可能影響Ⅰ型EC的患病風(fēng)險(xiǎn)。一項(xiàng)對3 000多名女性血清TG與Ⅰ型EC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系進(jìn)行的前瞻性研究[18-19]發(fā)現(xiàn)，血清TG水平與Ⅰ型EC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)呈正相關(guān)，在矯正BMI后，這種風(fēng)險(xiǎn)仍然存在。本研究組患者血清LDL-C、TG水平明顯高于對照組，HDL-C水平明顯低于對照組。血脂異常與Ⅰ型EC患病風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)的可能機(jī)制有：(1) 過量脂肪酸激活線粒體活性氧(reactive oxide species，ROS)的產(chǎn)生通路，從而誘導(dǎo)細(xì)胞氧化應(yīng)激。ROS的過度表達(dá)與細(xì)胞中的脂質(zhì)、蛋白質(zhì)及DNA相互作用，導(dǎo)致膜和酶功能的改變，誘導(dǎo)細(xì)胞損傷，最終導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。(2) 脂質(zhì)激活雌激素受體依賴途徑，賦予EC細(xì)胞的無限轉(zhuǎn)錄活性，促進(jìn)EC細(xì)胞的增殖。(3) 循環(huán)游離脂肪酸升高通過雌激素受體信號α(estrogen signal receptor α, ERα)和哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶點(diǎn)(mammalian target of rapamycin，mTOR)信號通路,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖及侵襲[20]。

PON-1是血清對氧磷酶家族中的重要一員，由肝臟合成并釋放入血。PON-1屬于HDL-C相關(guān)蛋白，在降低LDL-C相關(guān)脂質(zhì)氧化物過程中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。基于PON-1的抗氧化特性，PON-1活性的改變不僅會(huì)增加糖尿病、高血壓及動(dòng)脈粥樣硬化等多種疾病的患病風(fēng)險(xiǎn)[21]，還可能參與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程。PON-1在肺癌、乳腺癌、膀胱癌、甲狀腺癌、結(jié)直腸癌等多種惡性腫瘤患者血清中的表達(dá)活性均低于健康對照組[22]。本研究組血清PON-1表達(dá)活性明顯低于對照組。PON-1活性可能隨著全身氧化應(yīng)激狀態(tài)、炎癥反應(yīng)相關(guān)脂蛋白組分的改變而變化。另外，PON-1基因的表達(dá)下調(diào)使細(xì)胞線粒體分裂速度加快，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的生長速度加快及侵襲性增強(qiáng)[23]。本研究組FIGO分期為Ⅰ～Ⅱ期患者血清PON-1表達(dá)活性低于Ⅲ～Ⅳ期。隨著EC細(xì)胞分化程度的降低，血清PON-1活性逐漸降低。另外，研究組無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者血清PON-1活性大于有淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移者，肌層浸潤≤1/2者血清PON-1活性大于肌層浸潤>1/2者,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。無宮頸內(nèi)膜受累EC者血清PON-1活性雖然大于有宮頸內(nèi)膜受累者，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這可能與本研究中納入宮頸內(nèi)膜受累人數(shù)較少有關(guān)。因此，血清PON-1的表達(dá)活性可在一定程度反映Ⅰ型EC病變的嚴(yán)重程度及EC細(xì)胞的侵襲性。另外，Arenas等[24]發(fā)現(xiàn),乳腺癌患者未行放療前血清PON-1活性降低，行放療后血清PON-1活性和濃度均增高。原因可能是PON-1作為機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，其具有抗氧化、抗炎和抗感染的特性，而PON-1活性的增強(qiáng)從某種程度上可以反映機(jī)體免疫系統(tǒng)的增強(qiáng)，從側(cè)面反映出患者總體臨床狀況的改善。是否在Ⅰ型EC患者中也存在此類放療前后PON-1活性改變的結(jié)果，還須補(bǔ)充相關(guān)實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行進(jìn)一步的分析與研究。

PON-1能水解人體因氧化應(yīng)激而產(chǎn)生的內(nèi)源性自由基，將氧化自由基與可代謝性水性衍生物結(jié)合，通過HDL-C的載體，使脂質(zhì)過氧化中的有機(jī)磷化合物和致癌脂溶性自由基被清除，其抗氧化活性與脂代謝有密切關(guān)系。Samra等[25]研究發(fā)現(xiàn)，未結(jié)合PON-l的HDL-C將失去抗氧化功能。氧化型LDL-C是脂質(zhì)過氧化氫(lipid hydroperoxide，LOOH)的主要形式，與氧化應(yīng)激相關(guān)的癌變有關(guān)。EC患者血清中PON-1活性低于正常子宮內(nèi)膜組，LOOH水平顯著升高，且血清PON-1活性與LOOH水平呈負(fù)相關(guān)[26]。本研究中EC患者血清PON-1表達(dá)活性與血清HDL-C水平呈正相關(guān)，與血清LDL-C、TG水平呈負(fù)相關(guān)。PON-1活性降低可能通過影響HDL-C水平，進(jìn)而影響機(jī)體抗氧化能力。再者，血清TG、LDL-C能夠激活免疫細(xì)胞產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，誘導(dǎo)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強(qiáng)，脂代謝紊亂，可能又反作用于PON-1，使其活性下降。血脂代謝異常可能是Ⅰ型EC與代謝綜合征這兩種疾病共同的病理生理基礎(chǔ)因素之一。

綜上所述，PON-1活性作為代謝綜合征與EC相互關(guān)聯(lián)的重要因素之一，在Ⅰ型EC的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，其活性可作為EC患者輔助診斷的臨床指標(biāo)。