甘草配方顆粒制備工藝和質量標準研究

張書嘉，程雪麗，高 路，方婷婷

（江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司生產部，江蘇連云港 222000）

中藥甘草為豆科甘草屬植物甘草的根和根莖，性平、味甘，具有和中緩急、調和諸藥的功效，通常用于調和諸藥或治療脾胃氣虛證、攣急疼痛、咳嗽痰多、癰腫瘡毒等情況，在臨床中有著廣泛的應用。中藥配方顆粒是在傳統(tǒng)中醫(yī)理論指導基礎上，利用現代化科技手段將常規(guī)中藥飲片按照科學生產工藝制備而成的，可供臨床調劑所用的顆粒狀成品。中藥配方顆粒不僅實現了中藥生產自動化，確保了成品的質量，同時還有效避免了傳統(tǒng)調劑過程中中成藥難以隨癥加減的情況，也使得藥物服用更加便捷，對于提高患者用藥依從性有著積極的作用。本文通過建立甘草配方顆粒的制備工藝和質量標準，為有效控制產品質量，提高臨床用藥安全性提供參考。

1 材料

1.1 試藥

甘草對照藥材（成都新荷花中藥飲片有限公司，批號為200715）購自同仁堂藥房；甘草苷（品號為200411，含量為98.62%），甘草酸銨（批號為201005，含量為99.35%）：均購自中國食品藥品鑒定研究院；甘草飲片（批號分別為2001009、2003022以及2008002）購自中藥飲片廠，經藥物研究所專業(yè)研究員鑒定；甲醇，乙腈均為色譜純；其他試劑均為分析純；實驗用水均為去離子水。

1.2 儀器

高效液相色譜（LC-10ATvp，日本島津公司）；暗箱三用紫外分析儀（ZF-7，上海佳鵬科技有限公司）；分析天平（SB210S型，北京賽多利斯天平公司）；數顯式恒溫水浴鍋（HH-5型，常州翔天實驗儀器廠）；薄層層析硅膠板（G型，青島海洋化工有限公司）；Chemstation工作站（美國Agilent公司）；超純水系統(tǒng)（Milli-QA10型，美國默克密理博公司）；數控超聲波清洗器（KQ-600型，昆山市超聲儀器有限公司）。

2 方法及結果

2.1 甘草提取工藝

根據研究需要設計預實驗，并根據預實驗所得結果，應用L9（3）4正交表開展實驗研究。以甘草酸轉移率和出膏率作為考察指標，以煎煮次數、提取時間以及加水量作為藥物制備的三個影響因素，因素水平見表1。

表1 因素水平

2.2 實驗設定及結果

精準稱取預備好的每個批次甘草飲片各3份，每份10g，共計9份樣本，按照正交設計表的各項實驗設計方法進行煎煮加工，將所得的煎煮液進行濃縮，測定制備好的煎煮液中甘草酸的轉移率、出膏率，見表2、表3。

表2 甘草顆粒加水煎煮正交實驗

續(xù)表

表3 方差分析表

通過表2和表3能夠看出，三項影響因素對甘草浸成品影響效果分別為A＞C＞B，且A3＞A2＞A1、C3＞C2＞C1、B2＞B3＞B1，即各項因素中以煎煮次數對成品質量影響最大。考慮到生產成本和節(jié)約能耗等問題，在確保有效成分提取充分的前提下，綜合各個因素的影響效果，最終確定制備工藝為煎煮提取3次，每次1h，加水量為10倍量。

2.3 甘草配方顆粒制備

根據相關理論，按照干膏與輔料配比1∶1的比例加入輔料乳糖等，將濃縮藥液泵入制粒機內，采用全自動顆粒制粒機制得甘草配方顆粒。制備時設定參數為進風溫度90℃，物料溫度為60℃，霧化壓力I為0.15MPa，霧化壓力II為0.20MPa。

2.4 甘草配方顆粒定性鑒別

精準稱取配方顆粒1.0g，加入純水40mL充分溶解后使用正丁醇振蕩提取3次，每次為20mL，將3次提取的正丁醇液混合，使用水洗滌3次，每次為20mL。蒸干正丁醇液后在殘渣內加入甲醇5mL，充分溶解后制得供試品溶液。再以同樣方法制備同體積的陰性對照和對照藥材溶液。使用乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水作為展開劑，展開取出后常溫晾干，再以10%的硫酸乙醇作為顯色劑，在105℃條件下加入，直至可見清晰的斑點，再在365mm紫外燈下對甘草苷TLC色譜圖進行觀察，結果可見，供試品與對照藥材的色譜圖顯色情況基本接近。

2.5 含量測定

以上述方法制備好適量的對照品溶液，然后再精準稱取甘草配方顆粒1g，置入到具塞錐形瓶內，加入70%的乙醇100mL，密封后稱取質量，超聲45W 30min，冷卻后稱重。再以70%的乙醇來補足缺失的質量，搖晃均勻后濾過，提取濾液再次過微孔濾膜。將制備好的供試品溶液和對照品溶液在365mm波長下行色譜分析，結果可見，制備好的供試品溶液內相關成分含量與對照組溶液基本接近。

2.6 精密度實驗

精準稱取對照品溶液10μL，按照上述色譜條件對對照品樣本重復測定6次，結果可見，甘草苷、甘草酸的峰面積RSD值分別為1.29%和2.03%，可見儀器的精密度較好。

2.7 穩(wěn)定性實驗

精準稱取同一批次的供試品溶液10μL，在靜置0、4、8、12以及24h時，對樣品進的甘草酸和甘草酸行色譜鑒定，結果可見，甘草苷、甘草酸的峰面積RSD分別為2.68%和1.60%，可見制備好的甘草配方溶液在24h內穩(wěn)定性較好。

2.8 重復性實驗

分別精準稱取同一個批次的樣品5份，按照上述甘草配方顆粒制備方法制成供試品溶液，按照設計好的色譜條件對其甘草苷和甘草酸苷含量進行測定，計算所得RSD分別為1.89%和0.91%，可見該制備方案操作重復性較好。

2.9 加樣回收實驗

精準稱取制備好的甘草配方顆粒粉末0.5g，平行6份，置入到50mL量瓶內，按照1∶1的比例加入對照品溶液，然后按照上述方法制備供試品溶液，精準抽取10μL，在365mm紫外燈下行色譜鑒定，并對回收率進行計算。結果可見，甘草苷和甘草酸平均加樣回收率為98.42%和97.51%，RSD則分別為1.92%和2.21%。

2.10 樣本含有量測定

精準稱取不同3個批次制備好的甘草配方顆粒各1g，按照上述方法制備成供試品溶液，精準抽取1μL后，設定好的色譜條件下行進樣測定，計算指標的含有量，結果可見甘草苷和甘草酸含有量RSD分別為2.49%和2.72%。

3 討論

甘草苷以及甘草酸都是甘草的有效活性成分，具有良好的水溶性，能夠被熱水所提出，因此目前常作為甘草質控觀察指標。本次研究采用正交實驗對甘草配方顆粒制備工藝進行研究，結果顯示，以煎煮提取3次，每次1h，加水量為10倍量組為制備工藝制備所得甘草配方顆粒具有良好的穩(wěn)定性和可重復性，該參數不僅有效提高了成品質量，還能夠最大程度上降低成產成本，有利于大規(guī)模生產應用。

4 結論

以煎煮提取3次，每次1h，加水量為10倍量組為制備工藝制備所得甘草配方顆粒具有良好的穩(wěn)定性和可重復性，該制備工藝設計合理，質量穩(wěn)定，質控方法簡便，適宜工業(yè)化批量生產。