王運盛,楊明海,國欣欣,李祥翔,趙素芬,蔣鵬,盧巖,張成林,*
(1.北京動物園,北京 100044; 2.圈養野生動物技術北京市重點實驗室,北京 100044)
在導致野生動物患病的眾多生物性致病因素中,寄生蟲最為常見,但由于缺乏有效的野生動物寄生蟲診斷標準,導致寄生蟲感染的圈養野生動物缺乏及時有效的治療手段,造成預后不良,給野生動物的飼養繁育工作增加了極大的困難[1]。在野生動物寄生蟲病的診斷工作中,病理學診斷的應用較為少見,可以作為診斷參考的野生動物寄生蟲病的病理學資料相對匱乏。本文對北京動物園內由于絳蟲感染死亡的烏鴉組織樣本進行病理學觀察,為今后野生動物寄生蟲病的病理學診斷提供參考依據。
游客在北京動物園內游覽期間撿到死亡烏鴉一只,送至北京動物園獸醫院進行死后診斷。
1.2.1病理樣本采集
烏鴉剖檢后取肝、腸、胰腺組織,迅速投入10%的福爾馬林液,進行病理組織切片前處理。
1.2.2 H.E.染色
石蠟切片分別經二甲苯Ⅰ、Ⅱ脫蠟5min,之后浸入無水乙醇/二甲苯(1∶1)混合液中5min,依次經無水乙醇Ⅰ、無水乙醇Ⅱ、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇、50%乙醇梯度復水,下行至雙蒸水中,蘇木精染色 10min,1%鹽酸酒精分色數秒,水洗返藍15min,再依次通過50%乙醇、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇梯度脫水后,伊紅染色1min,95%乙醇洗滌3次,再經無水乙醇Ⅰ、Ⅱ各5min,二甲苯Ⅰ、Ⅱ各透明5min,最后用中性樹膠封片。切片放置于37℃溫箱內過夜烘干后鏡檢,光學顯微鏡下觀察烏鴉組織病理學變化情況。
肝臟表面被膜增厚;腸道臌脹,腸黏膜水腫充血;腸道中有大量寄生蟲,肉眼觀察寄生蟲呈條帶狀乳白色、扁平,根據觀察到的寄生蟲顏色、大小、形態結構等特征,參照《獸醫寄生蟲學》[2]中的相關內容進行比對鑒定,確診為禽絳蟲。
肝臟:鏡下觀察可見肝被膜高度增生,肝被膜結締組織水腫,淋巴細胞浸潤,少量紅細胞,肝細胞排列紊亂,肝竇中紅細胞增多;肝組織瘀血出血現象嚴重。多數肝細胞腫脹,細胞發生顆粒變性、壞死(圖1A)。
胰腺:鏡下觀察可見胰腺發生壞死,壞死的胰腺細胞正常結構消失,與未發生壞死的胰腺細胞形成明顯分界;大多壞死區域腺泡組織細胞消失,僅見殘存的細胞核碎片和多量淋巴細胞,未壞死區域大量紅細胞充斥于胰腺細胞之間(圖1B)。
腸道:低倍鏡下腸絨毛全部消失,僅殘存腸腺組織;腸壁變薄,腸黏膜下層結締組織松散,部分淋巴細胞分散其中(圖1C)。腸內容物為大量絳蟲,鏡下可見絳蟲體節呈片片分節狀(圖1D、圖1E);高倍鏡下可見絳蟲節片內的睪丸和卵巢組織(圖1F)。

圖1 烏鴉臟器病理學觀察
經組織病理學診斷,本病例烏鴉由于在絳蟲的持續感染下,出現肝被膜水腫增厚、肝細胞壞死,胰腺壞死,腸絨毛脫落、壞死,最終導致烏鴉死亡。
禽絳蟲屬于危害禽類較為嚴重的一種寄生蟲,在養殖業,禽絳蟲多見于感染雞,故禽絳蟲病也稱之為雞絳蟲病[3]。禽絳蟲病在養殖業中呈高傳播率的主要原因為環境因素(家禽在養殖過程中食入絳蟲卵囊感染的螞蟻、蝸牛、甲蟲等[4]),禽類吞食絳蟲卵囊后,卵囊在禽腸道(主要是十二指腸)內發生溶解,幼蟲脫卵囊后通過吸盤和頂突在小腸壁上附著、生長;造成十二指腸發生腸黏膜脫落,腸道出血、水腫、腸炎;絳蟲不斷繁殖,搶奪腸道內營養,破壞腸道對營養物質的消化吸收,臨床上感染禽類表現出腹瀉、血便;持續性消瘦、營養不良;此時病禽抵抗力降低,極易感染其他禽類疫病(如禽流感、新城疫、傳染性支氣管炎等),造成大面積發病,甚至死亡[2]。
近年來,隨著養殖業的發展,我國已有多個省、市、自治區報道過禽絳蟲的傳播、感染,由于絳蟲引起的禽類發病率和死亡率呈逐年上升趨勢[5],給養殖業造成了巨大的經濟損失。在圈養野生動物領域,由于野生動物的特殊性以及各地圈養條件的參差不齊,導致相關寄生蟲病原檢查工作嚴重滯后,缺少關于圈養野生動物絳蟲病的系統性調查論述,這給該病的防治工作帶來了極大的挑戰。在禽絳蟲病的診斷工作中,更多的還是依靠臨床剖檢診斷、病理學診斷、糞便蟲卵檢查等方法。由于專業野生動物病理學診斷平臺的欠缺,相關疾病的病理學診斷可用的鑒別、參考資料幾乎沒有。
因此,在對寄生蟲導致野生動物死亡進行診斷時,對寄生蟲進行快速分類、辨別,并結合病理診斷結果確定后續治療措施,可成為今后野生動物死后診斷的一個發展方向。