自發性腦出血患者血清CXCL1、CXCR2表達水平及臨床意義

張皓春，陳忠，文澤賢，劉春平，蒲國明，劉素君

自發性腦出血(spontaneous intracerebral hemorrhage，SICH)是由非外傷性腦實質血管破裂引起的最常見腦血管疾病之一，具有較高的病死率[1]。腦水腫是SICH發生后的重要繼發性病變，腦水腫的形成會導致腦組織顱內壓升高，造成患者神經功能障礙，威脅患者生命[2]。研究腦損傷相關機制，可能為SICH病情程度的判斷和預后預測提供生物標志物。研究表明，炎性細胞因子在SICH后繼發性損傷過程中有重要的作用[3]。趨化因子是一種抗炎細胞因子，CXC趨化因子配體1(CXCL1)是與SICH有關的中樞基因，在SICH中表達顯著上調[4]。CXC趨化因子受體2(CXCR2)是CXCL1的受體，研究表明CXCL1/CXCR2可促進順鉑誘導腎損傷過程中的炎性反應[5]。目前還未見CXCL1、CXCR2在SICH中的臨床研究，本研究通過檢測CXCL1、CXCR2在SICH患者血清中的水平，并分析二者的臨床意義，以期為SICH疾病嚴重程度判斷和預后的預測提供理論基礎，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2019年5月—2020年10月達州市中心醫院腦血管病科和神經內科收治的125例SICH患者為研究對象(SICH組)，男69例，女56例，年齡45～74(60.35±7.14)歲；病程0.5～5.6(3.15±1.42)h；病因：高血壓性腦出血42例，腦動脈硬化性腦出血59例，其他24例；出血部位：丘腦42例，基底節區75例，其他8例；基礎疾?。焊哐獕?1例，糖尿病35例，高脂血癥31例；用藥史：服用他汀類藥物35例，抗血小板藥物42例。根據美國國立衛生研究院卒中量表(NIHSS)評分[6]評價SICH患者神經功能缺損程度：0～4分為輕度42例，5～20分為中度47例，>20分為重度36例[7]；根據腦出血量將患者分為小量出血(<15 ml)52例，中量出血(15～30 ml)41例，大量出血(>30 ml)32例。同期選取醫院體檢健康者130例為健康對照組，男71例，女59例，年齡43～75(59.48±7.83)歲。2組研究對象性別、年齡比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準(倫審字2019-0127號)，所有受試者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 SICH患者選擇標準 (1)納入標準：①符合“中國腦出血診治指南(2019)”中關于SICH的診斷標準[8]；②經磁共振成像和頭顱CT證實，且為首次發病；③發病時間<6 h；④臨床資料完整。(2)排除標準：①繼發性腦出血患者；②合并顱腦損傷等其他原因導致的腦出血；③心、肝、腎等重要臟器疾病患者；④合并免疫性疾病患者；⑤合并惡性腫瘤患者。

1.3 觀測指標與方法

1.3.1 酶聯免疫吸附(ELISA)法檢測血清CXCL1、CXCR2水平： SICH組于入院當日、健康對照組于體檢當日清晨，采集2組研究對象肘靜脈血5 ml于離心管中，4℃離心提取血清，于-80℃冰箱中保存待測。采用ELISA雙抗體夾心法檢測血清中CXCL1、CXCR2水平，嚴格按照試劑盒說明書進行試驗操作。試劑盒均購自武漢菲恩生物科技有限公司。

1.3.2 隨訪： 對SICH患者出院90 d后采用門診短期預后隨訪，隨訪開始日期為患者出院之日，隨訪截止日期為2021年2月28日。所有SICH患者均完成隨訪，無失訪。根據改良Rankin量表(mRS)評分[9]評價患者預后，mRS評分0～2分為預后良好亞組78例，mRS評分3～6分為預后不良亞組47例。

2 結 果

2.1 2組受試者血清CXCL1、CXCR2水平比較 與健康對照組比較，SICH組血清CXCL1、CXCR2水平顯著升高(P<0.01)，見表1。

表1 2組受試者血清CXCL1、CXCR2水平比較

2.2 SICH患者不同臨床病理特征血清CXCL1、CXCR2水平比較 不同性別、年齡、病程、病因、出血部位及有無高血壓史、糖尿病史、高脂血癥SICH患者血清CXCL1、CXCR2水平比較差異無統計學意義(P>0.05)；神經功能缺損程度輕度、中度、重度患者血清CXCL1、CXCR2水平依次升高(P<0.05)；腦出血量小量、中量、大量患者血清CXCL1、CXCR2水平依次升高(P<0.05)；預后不良亞組SICH患者血清CXCL1、CXCR2水平顯著高于預后良好亞組(P<0.01)，見表2。

表2 125例SICH患者不同臨床病理特征血清CXCL1、CXCR2水平比較

2.3 SICH患者血清CXCL1、CXCR2水平相關性分析 SICH患者血清CXCL1與CXCR2水平呈正相關(r=0.714，P=0.000)。

2.4 Logistic回歸分析影響SICH患者預后不良的危險因素 以SICH患者預后情況為因變量，以表1、2中P<0.05指標(神經功能缺損程度、腦出血量及血清CXCL1、CXCR2水平)作為自變量進行多因素Logistic回歸分析，結果顯示腦出血量大及血清CXCL1、CXCR2升高是SICH患者預后不良的危險因素(P<0.01)，見表3。

表3 Logistic多因素回歸分析影響SICH患者預后不良的危險因素

2.5 血清CXCL1、CXCR2水平對SICH患者預后不良的預測價值 ROC曲線結果顯示，血清CXCL1水平預測SICH患者預后不良的AUC為0.712，血清CXCR2水平為0.714，二者聯合為0.823，優于二者單獨預測(Z=2.746、2.500，P=0.006、0.012)，見表4、圖1。

表4 血清CXCL1、CXCR2水平對SICH患者預后不良的預測價值

注：SICH.自發性腦出血；CXCL1.CXC趨化因子配體1；CXCR2.CXC趨化因子受體2

3 討 論

腦出血是臨床上常見的腦卒中類型，發病機制復雜，高血壓是最常見的系統性危險因素，與所有年齡段的發病率和病死率增加有關，隨著人口老齡化的加劇及抗凝或抗血小板藥物的大量使用，SICH發病率也逐年升高[10]。SICH發病急，且病情進展迅速，治療不及時會導致患者發生腦損傷或腦死亡等，致死率高，預后差，幸存者可遺留偏癱、失語等嚴重殘疾，給患者家庭和生活帶來沉重的負擔[11]。SICH損傷主要包括原發性損傷和繼發性損傷，原發性損傷是指SICH發生后，血液在腦組織中迅速聚集，導致顱內壓升高，腦組織缺血、缺氧等造成腦組織損傷[12-14]。腦水腫是SICH繼發性損傷主要病變類型，在SICH患者神經功能損傷過程中有重要的作用[15]。其損傷機制較為復雜，炎性反應在腦水腫引起神經損傷中占據重要作用，可能是導致SICH患者預后不良的主要因素之一[16]。因此，探討炎性因子在SICH中的臨床意義，可能為發掘SICH預后的生物標志物提供理論基礎。

趨化因子是一種大小為8～14 kD，由細胞分泌的小細胞因子或信號蛋白，具有定向細胞趨化作用[17]。趨化因子的生物學效應是由G蛋白偶聯的趨化因子受體介導的，CXCL1屬于趨化因子中的促炎性細胞因子，CXCR2主要表達于中性粒細胞、單核細胞、CD8+T細胞等細胞表面，是CXCL1主要趨化因子受體，二者相互作用在炎性反應中起重要作用[18]。Fu等[19]研究表明，SICH模型大鼠中CXCL1水平顯著高于假手術組。本研究結果表明，SICH患者血清CXCL1、CXCR2水平顯著高于健康對照組，提示CXCL1、CXCR2水平可能與SICH的發生有關。進一步研究表明，血清CXCL1、CXCR2水平升高是SICH發生的危險因素。血源性白細胞和中性粒細胞深入腦實質并破壞血腦屏障，會導致炎性反應、腦水腫及神經損傷的發生[20]。趨化因子和趨化因子受體共同促進免疫細胞募集到中樞神經系統，CXCL1是一種主要募集中性粒細胞的趨化因子，Wu等[21]研究表明，CXCL1、CXCR2對神經炎性反應期間大腦中性粒細胞的募集至關重要。Li等[22]研究表明，CXCL1表達降低會導致中性粒細胞向大腦的浸潤減少，從而減少缺血性腦卒中模型小鼠炎性反應，減輕小鼠缺血性腦卒中后腦損傷。猜測CXCL1、CXCR2可能通過引起神經炎性反應，導致SICH患者腦水腫及神經損傷的發生，影響患者預后，具體機制有待進一步研究。本結果提示，血清CXCL1、CXCR2可能是反映SICH疾病嚴重程度的潛在生物標志物，提示通過動態檢測血清CXCL1、CXCR2可能為臨床上SICH患者預后的預測提供依據。

綜上所述，SICH患者血清CXCL1、CXCR2水平顯著升高，且與SICH患者疾病嚴重程度和預后有關，可能是臨床上預測SICH預后的潛在生物標志物。然而本研究納入病例數較少，結果可能存在一定的誤差，下一步需擴大樣本量，進一步研究二者在SICH中的臨床意義。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻聲明

張皓春：設計研究方案，實施研究過程，論文撰寫；陳忠、文澤賢：提出研究思路，分析試驗數據，論文審核；劉春平：實施研究過程，資料搜集整理，論文修改；蒲國明：進行統計學分析；劉素君：課題設計，論文撰寫