氣管插管下呼吸道鮑曼不動桿菌感染患者支氣管肺泡灌洗液sTREM-1 水平檢測及臨床意義

陳璇，肖蓉，鄭浩

鮑曼不動桿菌是引發院內多耐藥菌感染最主要的病原菌之一[1]。但臨床顯示，定植與感染患者較難以分離標本進行辨別[2]。據統計，臨床分離到的鮑曼不動桿菌多數為定植，此類患者多數因濫用抗生素而誘導產生多耐藥菌，增加治療費用，給患者家庭及社會造成嚴重的經濟負擔[3]。由此可見，對定植及感染患者的精準區分在臨床中具有重要意義。但目前研究表明，臨床尚未有一種特異性檢測指標完成對定植和感染患者的準確辨別[4]。為探索一種高靈敏性、高特異性的檢測指標，本研究將100例接受氣管插管的患者分為感染組、定植組和對照組，分別對比血清降鈣素原（PCT）、白細胞介素-6（IL-6）、血清及支氣管肺泡灌洗液（BALF）中可溶性髓樣細胞觸發受體-1（sTREM-1）水平的差異，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2018 年1 月至2020 年1 月浙江省麗水市人民醫院收治的100 例接受氣管插管的患者，根據標本培養結果分為感染組、定值組和對照組。其中感染組25 例，納入標準：（1）符合呼吸機相關肺炎或醫院獲得性肺炎診斷標準[5]；（2）下呼吸道標本培養菌種僅為鮑曼不動桿菌；（3）痰或BALF 革蘭染色無白細胞吞噬或伴行細菌。定植組40 例，納入標準：（1）不符合呼吸機相關肺炎或醫院獲得性肺炎診斷標準；（2）下呼吸道標本經培養后得到鮑曼不動桿菌；（3）BALF 革蘭染色無伴行細菌或白細胞吞噬，且BALF 細菌濃度低于104cfu/ml。對照組35 例，納入標準：（1）下呼吸道標本無任何病菌；（2）臨床無感染征象。3 組一般資料差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 3 組一般資料情況

1.2 方法 取患者空腹靜脈晨血5ml置于分離膠促凝管中，在室溫下置于離心機中3 000 r/min 離心10 min，得上清液，在－80 ℃下保存備用。術前吸氧5 min 后在血氧飽和度、血壓及心電圖的監護下，將支氣管鏡經氣管導管對左肺舌葉或右肺中葉肺泡行灌洗術；同時，將支氣管鏡前端楔入左肺舌葉、右肺中葉的支氣管開口位置，分兩次經活檢孔注入100ml 37℃的無菌0.9%氯化鈉注射液，隨后立即負壓回收于無菌瓶內儲存，將儲存的回收液過濾并在4 ℃下保存，將過濾液置于離心機中離心10 min，1 000 r/min 得上清液，并在－70℃下保存備用。血清及BALF 中的sTREM-1含量采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法進行測定，PCT 水平采用免疫熒光分析法檢測，IL-6 水平采用免疫比濁法檢測。

1.3 統計方法 采用SPSS 22.0 統計軟件進行分析，計數資料采用2檢驗；符合正態分布的計量資料以均數±標準差表示，不符合正態分布的以M（P25～P75）表示，采用單因素方差分析（One-way ANOVA），兩兩比較采用LSD-t檢驗；采用ROC 曲線分析診斷的特異性和敏感性。P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3 組血清、BALF 中sTREM-1 及血清PCT、IL-6 水平比較 感染組血清PCT、sTREM-1 及BALF 中sTREM-1 水平均高于對照組和定值組（均P＜0.05）；定植組血清PCT、IL-6、sTREM-1 及BALF中sTREM-1 水平與對照組差異均無統計學意義（均P＞0.05）；感染組血清IL-6 高于對照組（P ＜0.05）。見表2。

表2 3 組血清、BALF 中sTREM-1 及血清PCT、IL-6 水平比較

2.2 ROC 曲線分析 血清IL-6、PCT、sTREM-1在鑒別鮑曼不動桿菌感染的AUC分別為0.72、0.67、0.72，特異性和敏感性分別為0.85/0.60、0.80/0.55、0.60/0.75；而BALF 中sTREM-1 鑒別鮑曼不動桿菌感染的AUC為0.91，特異性和敏感性為0.90、0.94，其特異性和敏感性更高。見表3 及圖1。

表3 ROC 曲線分析

圖1 ROC 曲線分析

3 討論

目前，臨床對下呼吸道鮑曼不動桿菌感染的診斷主觀性較強，多依賴于下呼吸道分泌物標本鏡檢、臨床癥狀、定量培養和影像學檢查等手段進行綜合判斷[6-7]。因此，探尋一種高特異性、高敏感性的生物標志物成為臨床診療的關鍵。盧惠倫等[8]表明感染患者的血清PCT 和sTREM-1 水平與健康對照組比較明顯升高，而定植患者的上述指標水平與健康對照組差異不明顯。本研究結果顯示定植組BALF中sTREM-1 水平與對照組差異無統計學意義（P＞0.05），但仍高于對照組，這說明定植患者肺部局部可能存在較為明顯的炎癥刺激。Borekci 等[9]證實當患者伴有支氣管擴張癥時，支氣管細菌定植會使肺泡或管腔出現嚴重的炎癥反應，是肺功能出現惡化的一個重要原因。

sTREM-1 屬于一種免疫球蛋白，當機體受到細菌、真菌等病原體的感染時，其sTREM-1 表達水平會呈明顯升高趨勢，并隨之分泌于體液和血液中，因此其表達水平隨病菌感染程度的增加而增加，在對早期判斷病菌感染的程度中具有較高的特異性和敏感性[10]。有研究顯示BALF 中sTREM-1水平可在早期對氣管插管下呼吸道是否存在感染的患者進行快速識別，但關于BALF 中sTREM-1 水平如何對鮑曼不動桿菌感染和定植鑒別的研究不足[11]。Hu 等[12]以小白鼠為載體，構建鮑曼不動桿菌感染與定植模型，發現鮑曼不動桿菌感染小白鼠肺組織sTREM-1水平高于定植的小白鼠，對感染和定植有較高的區分度。

本研究結果顯示BALF 中sTREM-1的AUC 為0.91，敏感性為0.94，特異性為0.90；這說明BALF 中sTREM-1 水平可較為準確的區分鮑曼不動桿菌感染和定植。血清PCT、IL-6、sTREM-1 對鮑曼不動桿菌感染和定植的特異性和敏感性均低于BALF 中sTREM-1。這是因為當局部炎癥受到刺激后，PCT、IL-6、sTREM-1 會進入體液或血液中，所以血清生物標志物無法有效區別感染位置，特異性相對較低[13-14]。而BALF標本未經血液或體液的稀釋，直接取自患者肺泡表面的襯液，使其對鮑曼不動桿菌感染與定植的特異性和敏感性均較高。另外，BALF 中sTREM-1 具有較高的診斷效能也可能與sTREM-1 特殊的表達方式有關，當機體出現急性炎癥后，sTREM-1 由巨噬細胞、中性粒細胞及單核細胞大量表達，并與接頭蛋白DAP12 進一步結合，進而使炎癥反應加重，提高敏感性[15]。