74例獻血者ABO血型正反定型不符回顧性分析

【摘要】目的 回顧性分析本血液中心獻血者ABO血型檢測中正反定型不符的原因，為血型檢測提供指導。方法 對2021年1月到2021年7月間全自動血型分析儀檢測74例ABO血型不確定樣本進一步采用手工試管法等血型血清學方法進行檢測，對鑒定結果進行分類歸納、統計分析。結果 共有74例正反定型不符，其中由確認抗M影響6例，占8.11%; ABO亞型8例，占10.81%;抗原誤檢、漏檢11例，占14.86%;抗體誤檢、漏檢48例，占64.86%。結論 ?全自動血型分析儀在反定型抗體檢測中的錯誤是造成ABO正反定型不符的主要原因，應該摸索出最佳的檢測參數以降低錯誤率，提高準確度。并且應該與手工檢測相結合，才能準確鑒定ABO血型。

【關鍵詞】ABO正反定型不符;全自動血型分析儀;抗體漏檢

目前，由于采供血事業的蓬勃發展，各個血站的采血量逐年增加，靠手工檢測已不能滿足工作需要，血液的自動化檢測已經全面應用。但由于各個廠家所生產的設備的準確率不同，從而會影響血液質量及輸血安全。

1 材料與方法

1.1研究對象 ?本研究選取了2021年1月至2021年7月在獻血者，經全自動血型分析儀ABO血型檢測發現正反定型不符樣本74例。

1.2試劑與儀器單克隆抗A、抗B、抗A1、單克隆抗AB、單克隆抗H、ABO細胞（上海血液生物醫藥有限責任公司）;抗人球蛋白卡（珠海貝索生物技術有限公司）;離心機（久保田KA-2200）;全自動血型分析儀（貝克曼，PK7300）。

1.3 方法

1.3.1血型血清學檢測獻血者初次ABO 血型鑒定由血液檢測實驗室采用全自動血型分析儀，參照儀器說明書進行。血型參比實驗室進一步進行ABO 正反定型，采用手工試管法，參照文獻進行操作。對每個ABO正反定型不符結果進行分析，判斷其原因，進行統計。

1.3.2統計學分析分析判斷抗原、抗體漏檢和抗原、抗體多檢出情況，采用直接計數法;分析各月份正反定型不符的例數是否與檢測人數有關，采用χ2檢驗;分析 ABO亞型、不規則抗體等情況是否與性別、年齡、血型有相關性，將74例樣本分為3個年齡組，分別是30歲以下組、30-39歲組和40歲以上組，進行Fisher分析。

2 結果

2.1正反定型不符的情況分布結果見表1。

從表1可以看出，有42例抗體漏檢，其中38例是因為抗體弱凝集而導致反定型假陰性，但也有4例是強凝集而被判為陰性;反定型假陽性有6例，其中4例是因為緡錢導致機器判讀困難。

正定型假陽性10例，即檢出并不存在的ABO抗原;正定型假陰性2例，其中1例為強凝集。

ABO亞型常常既干擾正定型也干擾反定型，所以在表中單列出來。本研究共發現8例ABO亞型。

2.2 各月份檢測人數與正反定型不符的例數

經卡方分析，不符合例數與檢測人數之間沒有顯著差異性，沒有相關性。

2.3正反定型不符情況與性別、血型、年齡的相關性

從表3可以看出，正反定型不符情況與性別、年齡無相關性，而與血型有強相關性（p<0.01）。

3 討論

ABO正反定型不符可以從兩方面分析，正定型有問題或反定型有問題。ABO亞型可能導致正定型、反定型都有問題。有時血清學難以判斷結果，就需要進行ABO基因分型。

遇到ABO正反定型不符的樣本，先進行鹽水法試驗，看一下正定型和反定型的凝集情況， 4攝氏度可以加強ABO抗原抗體的凝集。

機器判讀ABO正反定型結果會有一定的錯誤率，這就要求實驗人員嚴格遵守操作規程，正確處理血樣，避免緡錢凝集干擾判讀結果。對全血自動分析儀的準確率進行評價，定期校準設備，降低錯誤率。對機器初步判斷為正反定型不符的血樣，及時送交相關科室進行人工復核。

全自動血型分析儀主要由液體分配系統、離心機、孵育器、讀數儀、清洗系統及控制系統等部分組成。使用前應對血型分析儀的主要參數進行評價并優化，關鍵參數分為固定參數與可優化參數，共有9個。固定參數是根據廠家推薦和其他實驗室的使用情況而設置，包括孵育溫度、標本紅細胞濃度、試劑紅細胞濃度、試劑加注量、稀釋標本加注量以及儀器的判定參數?？蓛灮瘏蛋ǚ跤龝r間、標準抗A、抗B血清稀釋倍數、標本血漿稀釋倍數。在每種檢測條件下的判讀準確率應該在95%以上。影響結果準確率的原因可能有：反應時間過短，凝集不完全;忘記加樣;微孔板內有異物;標準血清效價低，凝集不完全;血漿粘滯性較高，紅細胞沉降不完全等。針對這些原因應該有相應的措施，來避免假陰性假陽性反應，提高血型檢測準確率。

準確的血型檢測結果是保證臨床輸血安全的基本前提。隨著技術的發展與更新，全自動血型分析儀具有自動化、標準化、穩定化等優點，在部分大型血站實驗室已經開展應用，但其多為開放式系統，設備廠商推薦的參數主要為設備自身的試驗參數及判定參數，還需要每個科室自行摸索最佳的檢測試劑參數。

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作者簡介：于江虹，1973年8月，女，漢，吉林省長春市，本科，副主任醫師，輸血研究。