2019-2020年柳州市豬偽狂犬病gB與gE抗體監(jiān)測(cè)分析

周師師 黃溢泓 許宗麗 劉針伶 覃艷然 梁競(jìng)臻 王 翠 李志源 馬小蓉

廣西柳州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣西柳州545000

豬偽狂犬病在我國(guó)屬于二類傳染病，是由皰疹病毒科的偽狂犬病毒（pseudorabies virus，PRV）引起的一種急性、高度接觸性傳染病[1]。豬是該病毒的主要傳染源、天然宿主及長(zhǎng)期貯存者，常見(jiàn)癥狀為發(fā)熱、奇癢以及腦脊髓炎。攜帶PRV 的種公豬基本不表現(xiàn)臨床癥狀，但會(huì)通過(guò)精液把病毒傳染給生產(chǎn)母豬；妊娠母豬通常會(huì)出現(xiàn)繁殖障礙，流產(chǎn)，產(chǎn)死胎、木乃伊胎；仔豬則會(huì)出現(xiàn)神經(jīng)癥狀、呼吸道疾病，且死亡率較高，即使耐過(guò)，也生長(zhǎng)緩慢甚至成為僵豬[2-3]。為了解廣西柳州市養(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病病毒的免疫抗體保護(hù)水平及野毒感染情況，并為制定柳州市規(guī)模豬場(chǎng)的偽狂犬病控制與凈化方案提供更多合理、有效的科學(xué)依據(jù)，本試驗(yàn)運(yùn)用ELISA 方法對(duì)柳州市部分豬場(chǎng)共計(jì)780 份豬血清進(jìn)行了PRV gE 及gB 抗體的檢測(cè)。

1 材料與方法

1.1 樣 品

采集的豬血清涵蓋了柳州市6個(gè)縣（區(qū)）的31個(gè)豬場(chǎng)，每個(gè)豬場(chǎng)采用隨機(jī)抽樣的方法采集樣品20～40份。采集全血樣品后室溫或4 ℃靜置過(guò)夜，再8 000轉(zhuǎn)離心2 min，收集上清直接用于檢測(cè)或-20 ℃冷凍備用。

1.2 主要試劑

豬偽狂犬病毒gB 糖蛋白阻斷ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒，豬偽狂犬病毒gE糖蛋白阻斷ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒，均為西班牙海博萊生物大藥廠生產(chǎn)。

1.3 檢測(cè)方法與結(jié)果判定

檢測(cè)方法及結(jié)果判定均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.4 流行病學(xué)調(diào)查

對(duì)采樣的豬場(chǎng)進(jìn)行豬群疫病動(dòng)態(tài)調(diào)查，了解該豬場(chǎng)的飼養(yǎng)情況、免疫程序、疫苗使用情況、疫苗使用效果、發(fā)病史等，并進(jìn)行記錄。

2 結(jié)果與分析

2.1 整體檢測(cè)結(jié)果

采集的780份血清樣品中，有94份血清為gE抗體陽(yáng)性，陽(yáng)性率為13.06%；593 份血清為gB 抗體陽(yáng)性，陽(yáng)性率為82.36%。

本次采樣所覆蓋的養(yǎng)殖場(chǎng)較分散且數(shù)量較多，每個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的疫苗選擇、免疫程序等雖然都不盡相同，但僅從抗體水平來(lái)看，6 個(gè)縣（區(qū)）總體的PRV gB 抗體陽(yáng)性率達(dá)到了82.36%，已高于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)（70%）；再結(jié)合近1年來(lái)對(duì)這些養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行的流行病學(xué)調(diào)查，未發(fā)現(xiàn)有豬偽狂犬病疫情，可以推斷出目前柳州市大部分養(yǎng)殖場(chǎng)所使用的豬偽狂犬疫苗整體效果良好，對(duì)豬群能起到較好的保護(hù)作用。但是，同時(shí)可以發(fā)現(xiàn)的是PRV gE 的整體抗體陽(yáng)性率也有13.06%，說(shuō)明部分養(yǎng)殖場(chǎng)仍然存在感染豬偽狂犬病的風(fēng)險(xiǎn)。

2.2 不同縣（區(qū)）PRV gE及PRV gB抗體檢測(cè)結(jié)果

從表1 可以看出，6 個(gè)縣（區(qū)）中PRV gE 抗體陽(yáng)性率從低到高分別為融安縣、三江縣、鹿寨縣、柳江區(qū)、融水縣、柳城縣。其中，融安縣PRV gE 抗體陽(yáng)性率為0；三江縣陽(yáng)性率最低，為3.33%；柳城縣最高，達(dá)30.00%；gB 抗體陽(yáng)性率最高的為柳城縣和鹿寨縣，均達(dá)到了99.17%；最低的為三江縣，只有25.00%。除了三江縣，其余5個(gè)縣（區(qū)）PRV gB 抗體水平均能達(dá)到農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)，且柳城縣、鹿寨縣的PRV gB 抗體陽(yáng)性率接近100%，說(shuō)明大部分縣（區(qū)）都很重視豬偽狂犬的防控，疫苗的免疫效果也很好。僅三江縣的PRV gB 抗體陽(yáng)性率不高，這可能與當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖場(chǎng)的管理模式、免疫方法、引種、品種等因素有關(guān)。

表1 不同縣（區(qū)）PRV gE及PRV gB抗體檢測(cè)結(jié)果

2.3 不同季節(jié)PRV gE及PRV gB抗體檢測(cè)結(jié)果

如表2所示，根據(jù)樣品采集時(shí)間的不同，按廣西的氣候特點(diǎn)將所得結(jié)果大致分為秋夏2個(gè)季節(jié)進(jìn)行對(duì)比分析，9-11月為秋季，5-8月為夏季。秋季PRV gE 抗體的陽(yáng)性率較夏季要高，為17.81%；PRV gB 抗體陽(yáng)性率則比夏季低，為76.56%。這可能是由于柳州大部分地區(qū)屬于熱帶季風(fēng)氣候，且山地丘陵較多，9-11月氣溫及雨水變化都較大，使得疫苗效果較夏季差，PRV gE的感染率則有所上升。

表2 不同季節(jié)PRV gE及PRV gB抗體檢測(cè)結(jié)果

3 討 論

1）本監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，所采集的780份豬血清中，PRV gB 抗體水平與宋詩(shī)川[4]報(bào)道的2018-2019年柳州地區(qū)PRV gB 抗體檢測(cè)陽(yáng)性率80.85%差別不大，PRV gE 抗體陽(yáng)性率則由24.26%下降到了13.06%；且通過(guò)對(duì)采樣豬場(chǎng)的流行病學(xué)調(diào)查，暫未發(fā)現(xiàn)PRV疫情。說(shuō)明從整體來(lái)看，2018-2020年柳州地區(qū)的PRV 免疫效果保持得較好，隨著PRV 凈化工作的開展，野毒抗體的陽(yáng)性率也有所下降。

2）從各縣（區(qū)）的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)分析，部分縣（區(qū)）的免疫工作仍需加強(qiáng)，可以從免疫程序、疫苗選擇、養(yǎng)殖模式、環(huán)境管理等方面爭(zhēng)取提高PRV gB 的抗體水平，以達(dá)到對(duì)豬群的免疫保護(hù)，有效控制該病的發(fā)生和流行。同時(shí)，個(gè)別縣（區(qū)）的PRV gE 抗體陽(yáng)性率較高，說(shuō)明PRV 的野毒感染仍然較為嚴(yán)重，應(yīng)繼續(xù)開展PRV 凈化工作，加大對(duì)生物安全管理的投入，制定更合理的PRV 凈化程序，對(duì)豬場(chǎng)進(jìn)行定時(shí)抽檢，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并淘汰PRV gE 抗體陽(yáng)性豬，特別是種豬，爭(zhēng)取從源頭上杜絕PRV的傳播。

3）從季節(jié)上看，秋季天氣多變時(shí)，PRV gB 抗體陽(yáng)性率降低、PRV ggE 抗體陽(yáng)性率增高，這提示我們，在這種情況下豬群更易受到病毒的感染，疫苗效果也會(huì)減弱，這時(shí)需要更多地關(guān)注PRV 的防控和監(jiān)測(cè)，防患于未然。

目前，已有多個(gè)國(guó)家完成了豬偽狂犬病的凈化，但我國(guó)這項(xiàng)工作仍處于推進(jìn)階段，需要各級(jí)防疫人員和養(yǎng)殖場(chǎng)的配合，根據(jù)每個(gè)地區(qū)每個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的實(shí)際情況不斷優(yōu)化免疫、凈化程序，找到最適合自己的方法。有條件的養(yǎng)殖場(chǎng)在開展血清學(xué)監(jiān)測(cè)的同時(shí)，可以結(jié)合病原學(xué)監(jiān)測(cè)，以更準(zhǔn)確地確認(rèn)陽(yáng)性豬。參考其他疫病的控制和凈化，我們了解到生物安全管理也十分重要，因此，建議養(yǎng)殖場(chǎng)推行封閉式管理，施行豬群的全進(jìn)全出，對(duì)進(jìn)出場(chǎng)的車輛、工具、人員等進(jìn)行全方位的消毒；同時(shí)對(duì)豬場(chǎng)人員進(jìn)行定期培訓(xùn)，增強(qiáng)生物安全意識(shí)，確保豬偽狂犬病凈化工作穩(wěn)步推進(jìn)。