高效液相色譜法測(cè)定食品包裝薄膜中的香芹酚和百里香酚

王曉峰

（鞏義市產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)檢測(cè)中心，河南鞏義 451200）

香芹酚與百里香酚均為酚類物質(zhì)，屬于同分異構(gòu)體，具有良好的抗氧化和殺菌作用，天然的香芹酚與百里香酚存在于牛至、百里香等植物的精油中，主要被應(yīng)用于食品香料、日用化工產(chǎn)品加工、農(nóng)業(yè)及醫(yī)療行業(yè)中。將其抗菌抗氧化活性物質(zhì)添加到聚合物材料中，經(jīng)加工制成活性塑料包裝薄膜，可有效提升包裝的保鮮性能，其具有一定的殺菌功效，有效確保食品的安全，保鮮性能是普通薄膜的一倍以上[1-2]。本文以高效液相色譜法為基礎(chǔ)對(duì)包裝薄膜的香芹酚和百里香酚進(jìn)行含量測(cè)定。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

研究中高效液相色譜法中所采用的材料、試劑以及儀器如表1所示。膜。薄膜制備后按照6 dm2/L（約1.00 g）進(jìn)行裁剪，放置在真空包裝鋁/低密度聚乙烯袋中，儲(chǔ)存溫度為（23±2）℃。

表1 主要實(shí)驗(yàn)材料、試劑及儀器

1.2.2 制備樣品檢測(cè)液

研究中樣品檢測(cè)液共設(shè)置4種，用于模擬分析，其中使用超純水模擬水分較多食品、3%乙酸溶液模擬酸性食品、10%乙醇溶液模擬含酒精類食品、95%乙醇溶液模擬脂類食品。

1.2.3 提取樣品檢測(cè)液

將兩種樣品薄膜分別浸泡在不同檢測(cè)液中，并于浸泡24 h、96 h后進(jìn)行取樣，取樣前將錐形瓶振蕩搖勻，所取檢測(cè)液置于錐形瓶后加入相對(duì)應(yīng)的模擬液溶進(jìn)行稀釋（3倍量），之后將提取液進(jìn)行0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾后裝入樣品瓶，并置于4 ℃冰箱內(nèi)等待檢測(cè)[3]。

1.2.4 配制標(biāo)準(zhǔn)溶液

取香芹酚與百里香酚各0.050 g分別盛放在50 mL棕色容器中，乙腈定容，放置在-20 ℃冰箱中待用。將上述標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液用乙腈進(jìn)行稀釋，以獲得不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液（5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、50 mg/L 和100 mg/L）。

1.2.5 色譜條件

試驗(yàn)中色譜條件如表2所示。

表2 色譜分析條件

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 制備薄膜

為增加研究中數(shù)據(jù)的對(duì)比性，將制備兩種形式的樣本薄膜。①由聚乳酸復(fù)合材料、聚丁二酸-己二酸丁二酯制備成空白屬性薄膜。②由聚乳酸復(fù)合材料、聚丁二酸-己二酸丁二酯、香芹酚（ω=4%）及百里香酚（ω=4%）制備活性成分薄

2 結(jié)果與分析

2.1 香芹酚與百里香酚線性關(guān)系、檢出限及定量限測(cè)定

將不同容量的工作液在相同的色譜條件進(jìn)行測(cè)定分析，結(jié)果表明，香芹酚保留時(shí)間為6.90 min，檢出限為200 μg/kg，定量限為500 μg/kg，其回歸方程Y=6.826 5X-5.437，相關(guān)系數(shù)（R2）為0.996 4。百里香酚保留時(shí)間為7.46 min，檢出限為200 μg/kg，定量限為500 μg/kg，其回歸方程為Y=6.331 2X-5.758 1，相關(guān)系數(shù)R2為0.996 1，在不同標(biāo)準(zhǔn)工作液中香芹酚與百里香酚具有較好的線性關(guān)系。

2.2 樣品薄膜加標(biāo)回收率分析

通過(guò)樣品薄膜加標(biāo)回收試驗(yàn)，將空白屬性薄膜分別浸泡在不同的食品模擬液及流動(dòng)相溶液中，并分別添加不同濃度的香芹酚與百里香酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，獲得樣品薄膜平均回收率及RSD。由表3可知，在不同加標(biāo)量下香芹酚平均回收率在71.8～93.9%，RSD在5.4%～8.5%，百里香酚平均回收率在73.3%～103.8%，RSD在5.2%～9.0%，可見(jiàn)香芹酚與百里香酚在超純水、乙酸溶液（3%）中加標(biāo)回收效果較差，在乙醇溶液（95%）、乙腈溶液（3∶2，V/V）的回收效果基本相同，進(jìn)而說(shuō)明色譜檢測(cè)的條件較優(yōu)。因此在實(shí)際選擇時(shí)，使用乙腈溶液（3∶2，V/V）開(kāi)展模擬的遷移分析。

表3 不同食品模擬液中香芹酚和百里香酚的平均回收率及RSD（n=6）

2.3 活性薄膜檢測(cè)分析

由表4可知，改性聚乳酸活性食品包裝薄膜在乙腈溶液（3∶2，V/V）中浸泡不同時(shí)間后，其中活性物質(zhì)檢出回收率差異不大。薄膜在乙睛溶液（3∶2，V/V）遷移出的香芹酚和百里香酚出峰情況佳，并且強(qiáng)度高。本次實(shí)驗(yàn)所使用的高效液相色譜法檢測(cè)條件佳，能有效分離并檢測(cè)樣品。

表4 不同時(shí)間后香芹酚和百里香酚的回收率

3 結(jié)論

高效液相色譜法可實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本的快速、高效、精準(zhǔn)的分離測(cè)定，并且隨著微處理機(jī)技術(shù)的應(yīng)用，提升了檢測(cè)設(shè)備的分析精度及自動(dòng)化性能，可精確的實(shí)現(xiàn)并控制梯度洗脫、流動(dòng)相流量、色譜柱溫度、自動(dòng)進(jìn)樣、洗脫液收集及樣品組分信號(hào)轉(zhuǎn)換檢測(cè)等，還能進(jìn)行色譜圖像及數(shù)據(jù)的編輯處理，具有較為便捷、高效的色譜分析處理功能[4-5]。目前高效液相色譜法具有極為廣泛的應(yīng)用范圍，并且不受樣本揮發(fā)性及熱穩(wěn)定性的限制，適用于多數(shù)不同性質(zhì)的化合物的檢測(cè)分析，能有效彌補(bǔ)氣相色譜法應(yīng)用中的缺點(diǎn)。根據(jù)相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，氣相色譜法僅僅適用于20%左右的有機(jī)化合物的分析，而高效液相色譜法則更加寬泛，可應(yīng)用于80%的有機(jī)化合物。采用高效液相色譜法測(cè)定改性聚乳酸薄膜中香芹酚和百里香酚含量，回收率高，簡(jiǎn)便快速且精度高，可為香芹酚與百里香酚等相關(guān)酚類的遷移檢測(cè)及應(yīng)用提供一定的幫助。