趙麗瓊,唐當柱,陳津禾,王曉芳,楊 艾,金文艷
(昆明衛生職業學院,昆明 650101)
當前,國內外學者對滇重樓進行了大量的研究[1],但是關于重樓藥材品質的研究依然處于有結果、無結論的局面[2]。基于此,本課題組通過對比曲靖、玉溪、大理滇重樓種植基地所種植的同一品種的滇重樓品質,探討其主要活性成分差異與根際土壤因子的相關性,以期為進一步研究滇重樓品質差異、野生變家種及規范化種植提供參考,繼而實現滇重樓的大規模培育和大面積推廣。
本次研究所用儀器如下:日本島津集團生產的型號為UV-2450的紫外可見分光光度計;梅特勒-托利多儀器上海有限公司生產的型號為ML204的分析天平;上海悅豐儀器儀表有限公司生產的型號為FP640的火焰光度計;江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司生產的型號為BS-2F的振蕩培養箱;杭州奧利龍儀器有限公司生產的型號為PHB-10的pH計。
1.2.1 供試藥材
滇東選擇曲靖市馬龍區大莊鎮民村村基地種植的高稈大葉滇重樓,當地海拔為1 980 m;滇中選擇玉溪市紅塔區春和街道馬井村基地種植的高稈大葉滇重樓,當地海拔為1 900 m;滇西選擇大理白族自治州祥云縣云南驛鎮前所村基地種植的高稈大葉滇重樓,當地海拔為2 200 m。
1.2.2 土壤
在曲靖、玉溪、大理3地滇重樓種植基地采集土樣,每個采樣區選取3個點,采集土層深度分別為0~5、6~10、11~15 cm。3個點共采集土壤1 kg左右,將其混合得到樣品。對樣品登記編號后(S1、S2和S3)進行預處理,裝瓶送檢,得到滇重樓根際土壤樣本3份,作為本次研究對照組。
在宣威海岱滇重樓種植基地隨機抽取栽培滇重樓的種植土壤,采用對角線法在種植地的對角線交叉點處定點(離地表5 cm處),取6~15 cm深處的土壤,取其平均值,預處理后編號(S4)送檢,作為本次研究試驗組。
2019年4月21日,在對照組和試驗組中種植同一品種滇重樓。對照組種植土壤不進行人為改善。試驗組種植土壤進行人為改善:根據肥料效應試驗,改變土壤氮、磷、鉀含量,在2019年4月21日以撒施的方式第一次施入磷肥(第1年作為基肥),在2019年4月和2020年4月、6月和8月以撒施的方式分4次施入氮肥。每次施肥完成后徹底澆透水。下面分析具體的測定方法。
一是滇重樓根莖品質測定。采用高效液相色譜法測定滇重樓根莖的皂苷含量,同時測試和對比兩組滇重樓根莖的總黃酮、總多糖含量。二是滇重樓根際土壤養分測定。測定指標包括速效氮、磷、鉀含量以及有機質含量、pH。三是滇重樓根際土壤酶活性測定。測定對象有蔗糖酶、磷酸酶、過氧化氫酶、多酚氧化酶、蛋白酶和脲酶。
采用SPSS17.0統計軟件中的獨立樣本t檢驗,分別比較不同土壤下滇重樓根莖的品質,分析品質差異的顯著性。
兩組滇重樓根莖品質的比較結果如表1所示。

表1 兩組滇重樓根莖品質比較
兩組根際土壤化學指標的比較結果如表2所示。

表2 兩組根際土壤化學指標比較
2.3.1 試驗組
根際土壤酶活性與pH、有機質含量以及速效磷含量均為顯著正相關關系(P<0.05);根際土壤蔗糖酶活性與pH、有機質含量為極顯著正相關關系(P<0.01);根際土壤酸性磷酸酶活性與有機質、速效氮含量為極顯著正相關關系(P<0.01);根際土壤中性磷酸酶、堿性磷酸酶活性與有機質含量為極顯著正相關關系(P<0.01),與速效氮含量為顯著正相關關系(P<0.05);根際土壤過氧化氫酶活性與有機質含量呈極顯著正相關(P<0.01);根際土壤蛋白酶活性與有機質含量和速效氮含量為極顯著正相關關系(相關系數分別為0.806、0.718,P<0.01)。
2.3.2 對照組
根際土壤脲酶活性與pH為顯著正相關關系(P<0.05);根際土壤酸性磷酸酶活性與有機質含量為極顯著正相關關系(P<0.01),與速效磷含量為顯著正相關關系(相關系數為0.501,P<0.05);根際土壤中性磷酸酶活性與有機質含量為極顯著正相關關系(P<0.01);根際土壤蛋白酶活性與有機質含量為極顯著正相關關系(P<0.01)。
兩組滇重樓根莖品質的總皂苷含量與速效鉀含量表現出顯著的負相關關系(P<0.05);總多糖含量與種植地土壤的堿性磷酸酶活性表現出顯著正相關關系(P<0.05);總黃酮含量與種植地土壤的蔗糖酶活性表現出顯著正相關關系(P<0.05)。
滇重樓的干燥根莖是傳統醫學中一味功效顯著的中藥材[3]。近年來,市場對于滇重樓的需求激增,同時滇重樓的人工種植技術尚不完善且種植周期長、種植成功率低、種植條件苛刻,加之野生滇重樓資源瀕危,使得滇重樓的價格幾度飆升[4]。為了穩定滇重樓價格、保證滇重樓的市場供給,發展和完善滇重樓人工種植技術迫在眉睫[5]。
本次研究發現,在通過施肥對試驗組土壤進行改良后,試驗組滇重樓的根莖品質明顯優于未進行土壤改良的對照組,數據顯示,試驗組滇重樓根莖總皂苷、總黃酮含量明顯更高(P<0.05),總多糖含量明顯更低(P<0.05)。同時,研究發現,滇重樓根莖的總皂苷與土壤的多酚氧化酶活性正相關(P<0.05),總黃酮與pH、脲酶活性以及速效鉀負相關(P<0.05),總多糖與堿性磷酸酶活性負相關(P<0.05)。研究結果表明,改善土壤肥力能夠直接影響土壤活性,實現滇重樓品質的提升[5]。
滇重樓種植地土壤活性因子和養分與滇重樓根莖品質密切相關。在人工種植滇重樓時,要合理調整種植地土壤的養分含量和比例。通常,為了提升滇重樓根莖的總皂苷、總黃酮含量,降低總多糖含量,施肥時應當有意識地增加氮肥和磷肥,控制鉀肥。