絕經后2型糖尿病女性Wnt3a基因多態性與骨代謝的相關性

向清淋 李軍 丁瑞 高群 伍雅敏 侯澤鑫

石河子大 醫學院第一附屬醫院內分泌代謝科，新疆 石河子 832000

糖尿病是一種由多種基因及多種環境因素共同作用的慢性代謝性疾病[1]，大部分糖尿病患者是2型糖尿病。骨質疏松是糖尿病常見的并發癥。骨質疏松及2型糖尿病已經越來越成為影響中老年健康的慢性流行性疾病。Wnt信號通路被認為是骨質疏松癥和糖尿病共同發病機制之一。作為Wnt家族重要成員之一，Wnt3a可以通過多種途徑參與細胞生理過程，如通過Wnt/β-catenin調控細胞的更新和分化。目前已有研究表明Wnt3a基因多態性與2型糖尿病、骨質疏松癥有明顯相關性[2]。Wnt3a 蛋白升高時，抑制成骨細胞增殖，進而導致骨量丟失。但不同種族人群基因的作用機制可能不同，目前Wnt3a基因與我國人群骨密度和骨代謝情況的關聯尚缺乏相關研究；其基因多態性與絕經后T2DM女性骨密度、骨代謝情況的相關性尚不明確。

本研究通過測定絕經后女性外周血Wnt3a基因多態性并分析與骨密度、骨代謝和血脂代謝的相關性。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取石河子社區絕經后T2DM女性81例，檢測rs708114位點基因多態性，根據rs708114位點基因多態性分為TT組(n=19)和CC/TC組(n=62)。同時檢測rs752107基因多態性，根據s752107基因多態性分為CC組(n=44)和CT/TT組(n=37)。T2DM的診斷標準符合1999年WHO推薦的糖尿病診斷標準，BMD的判斷標準符合2017年WHO推薦的診斷標準。本研究通過醫院倫理委員會批準，研究對象均簽署知情同意書。

1.2 納入標準

①絕經后，意識清楚，語言表達能力正常；②同意參與本研究。

1.3 排除標準

①1型糖尿?。虎谌焉锾悄虿?；③急慢性的心、肝、腎臟疾病；④惡性腫瘤；⑤先天性骨質疏松癥；⑥消化道疾?。虎唛L期口服激素或對骨有作用的藥品者；⑧甲狀腺功能亢進、等內分泌代謝疾??；⑨其他疾病引起的絕經。

1.4 研究方法

1.4.1一般資料及生化指標測定：年齡、絕經年限、身高、體重、腰圍、臀圍、計算腰臀比(WHR)、體質指數(BMI)；使用全自動生化分析儀測定空腹血糖(FPG)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血鈣(Ca)、血磷(P)。高壓液相法測糖化血紅蛋白(HbAlc)，雙能X線骨密度儀測股骨頸骨密度(F-BMD)等指標。

1.4.2基因多態性檢測：運用飛行時間質譜分析技術對Wnt3a基因rs752107、 rs708114位點多態性進行檢測，結果用Sequenom 軟件進行分型。

1.5 統計學處理

2 結果

2.1 TT組、CC/TC組一般臨床資料比較

兩組患者年齡、絕經年限、體質指數、腰臀比等一般資料比較，差異無統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 組間一般基線資料比較Table 1 Comparison of general baseline data between the

2.2 TT組、CC/TC組患者生化指標和股骨頸骨密度比較

與CC/TC組比較，TT組患者FPG顯著升高[(8.84±3.65) mmol/L vs (7.10±1.68) mmol/L,P=0.005]；HbA1c顯著升高[(8.11±1.78)% vs (7.15±0.87)%，P=0.002]；血清Ca顯著升高[(2.34±0.20) mmol/L vs (2.24±0.15) mmol/L,P=0.032]。兩組患者TG、HDL-C、LDL-C、血清P差異無統計學意義(P>0.05)。TT組ALP、F-BMD有增高趨勢，但差異未見統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 組間生化指標和股骨頸骨密度比較Table 2 Comparison of biochemical indexes and bone mineral density of the femoral neck between the

2.3 CC、TC/TT組一般臨床資料比較

兩組患者年齡、絕經年限、體質指數、腰臀比等一般資料比較，差異無統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 組間一般基線資料比較Table 3 Comparison of general baseline data between CC and TC/TT groups

2.4 CC、TC/TT組生化指標比較

CC組和TC/TT組患者HbA1c、TG、HDL-C、LDL-C、血清Ca、血清P、ALP和F-BMD等指標差異均無統計學意義(P>0.05)。CC組FPG有增高趨勢，但差異未見統計學意義(P>0.05)。見表4。

表4 CC、TC/TT組生化指標比較Table 4 Comparison of biochemical indexes between CC and TC/TT group

3 討論

糖尿病是骨密度降低和骨代謝異常的危險因素[3]，因為高血糖會導致成骨細胞、破骨細胞活性降低，嚴重者可導致成骨細胞凋亡、損傷骨細胞外基質[4-6]。絕經后，卵巢功能逐漸衰退，女性體內雌激素逐漸降低，抑制成骨作用而促進破骨活動，因此容易出現骨質疏松。Wnt 家族調控了骨組織的生長發育[7]，Wnt3a是其激活經典通路。相關研究[8-9]發現，Wnt3a 蛋白升高時，抑制成骨細胞增殖，進而導致骨量丟失。

本研究探討了Wnt3a基因rs752107位點、rs708114 位點與絕經后T2DM女性骨代謝的相關性，結果發現rs708114 位點與骨密度和骨代謝指標無明顯相關性。提示本人群rs752107位點不是T2DM女性骨代謝異常的易感基因。但國外Rafael等[2]研究顯示rs752107位點與骨代謝有關，與本研究不一致。這一差異可能是由于rs752107位點多態性對骨量的作用本身也受環境、地域、種族的影響，不同人種間具有不同的遺傳背景，同時2型糖尿病及骨質疏松也是多基因、多位點、多環境危險因素共同影響的疾病[10-12]。本研究發現rs708114 位點基因多態性分布與血清Ca水平有關，與骨密度、血清P等無明顯相關性，血清Ca水平是骨代謝的重要指標[13]。研究顯示rs708114位點基因多態性與先天性脊柱側凸遺傳易感性有關[14]。rs708114位點基因多態性與2 型糖尿病、骨密度是否相關尚缺乏相關研究。但由于本研究僅觀察到rs708114位點與血清Ca水平有關，因此需要進一步研究證實二者相關性。且P1NP、CTX及OCN也是骨代謝的重要指標，但本研究未檢測，為其中一個不足之處。

本研究探討了Wnt3a基因rs752107位點、rs708114 位點與絕經后T2DM女性血糖代謝的相關性，顯示Wnt3a基因rs752107位點與血糖代謝無關。而rs708114 位點與FPG、HbA1c明顯相關。FPG、HbA1c是絕經后T2DM患者血糖代謝的重要指標，FPG反映當前血糖控制情況，而HbA1c則反映一段時間內患者血糖控制情況[15-19]。FPG、HbA1c水平升高，說明患者血糖控制不理想，病情嚴重，更容易發生心腦血管不良事件，是T2DM患者預后不良的獨立預測指標。說明Wnt3a基因rs708114 位點突變與T2DM的易感性有關，且與患者病情嚴重度有一定關聯。本研究還探討了Wnt3a基因rs752107位點、rs708114 位點與絕經后T2DM女性血脂代謝的相關性，結果發現Wnt3a基因rs752107位點、rs708114 位點與血脂代謝無明顯相關性。

綜上所述，新疆石河子地區絕經后2型糖尿病女性Wnt3a基因rs708114位點基因突變與血糖代謝有關。新疆石河子地區絕經后2型糖尿病女性Wnt3a基因rs708114位點基因突變可能與骨代謝有關，但尚需要進一步臨床研究證實。新疆石河子地區絕經后2型糖尿病女性Wnt3a基因rs752107位點與骨代謝、糖代謝均無明顯相關性。新疆石河子地區絕經后2型糖尿病女性Wnt3a基因rs752107位點、rs708114 位點與血脂代謝均無明顯相關性。