2 型糖尿病患者SLC22A1、Cllorf65 基因多態(tài)性與二甲雙胍療效關(guān)系探討

朱琳

山東第一醫(yī)科大學(xué)附屬東阿醫(yī)院內(nèi)分泌科，山東聊城 252200

現(xiàn)階段受到社會(huì)整體經(jīng)濟(jì)水平與人們生活習(xí)慣等因素的影響，2 型糖尿病患者基數(shù)持續(xù)擴(kuò)增，已經(jīng)成為對(duì)國(guó)民生命健康威脅性最大的一種慢性疾病[1]。臨床在規(guī)范化治療2 型糖尿病期間，常規(guī)方案為二甲雙胍，因?yàn)樵撍幬锊粌H可以改善患者機(jī)體的胰島素敏感性，同時(shí)還能促進(jìn)肝臟的葡萄糖吸收率，避免肝糖原大量分解，最終抑制患者病情[2]。不過(guò)受到患者個(gè)體差異性的影響，給予二甲雙胍后所取得的降糖效果也有一定的差異性，查閱既有研究資料發(fā)現(xiàn)，2 型糖尿病患者中二甲雙胍應(yīng)答效果較差的占比在30%左右[3]。患者口服二甲雙胍后機(jī)體處理藥物（經(jīng)膽小管、腎小管排泄）的過(guò)程中會(huì)受到多藥及毒性化合物外排轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的影響，所以認(rèn)為患者SLC22A1、C11orf65 基因多態(tài)性與二甲雙胍治療效果之間存在一定的關(guān)聯(lián)性[4]。基于此，該次選擇該院于2018年5月—2019年5月期間收治的108 例2 型糖尿病患者為研究對(duì)象。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇該院收治的108 例2 型糖尿病患者為研究對(duì)象，男68 例、女40 例，年齡最小為35 歲，最大為59 歲，平均（47.17±12.06）歲。 納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合WHO提出的2 型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)者；②年齡介于35～60 歲之間；③本人及（或）家屬知情且授權(quán)該次研究者。 排除標(biāo)準(zhǔn)：①1 型糖尿病者；②遺傳性糖尿病者；③存在糖尿病并發(fā)癥者；④合并心腦血管疾病者；⑤合并肝腎功能障礙者； ⑥近期存在其他降糖藥物治療史者；⑦研究用藥過(guò)敏，或有嚴(yán)重不良反應(yīng)者；⑧感染性疾病、精神疾病者等。 該研究由醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 方法

所有患者入院后均單純給予二甲雙胍口服治療，并分別于患者治療前后，檢查患者的糖尿病指標(biāo)。

所用試劑：生理鹽水；實(shí)驗(yàn)室自制滅菌等離子水；DNA 提取液10%NH4CL、DNA 保存液、 測(cè)序反應(yīng)通用試劑盒（安徽大千生物工程有限公司）；胰島素測(cè)定試劑盒以及Bio-Rad Laboratories（美國(guó)西門(mén)子）；糖化血紅蛋白A1c 檢測(cè)試劑盒（Inc）。 儀器：XH-D 渦旋混勻儀（江蘇康健醫(yī)療用品有限公司）；HC-2516 高速離心機(jī)、KDC-1042 離心機(jī)（安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司）；LX-400 掌上離心機(jī)（麒麟貝爾儀器制造有限公司）；RT-CyclerTM436/TL998A 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（西安天隆科技有限公司）；ADVIA Centaur XP 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)、Bio-Rad Laboratories （美國(guó)西門(mén)子提供）；ARIANTⅡ全自動(dòng)血紅蛋白測(cè)試系統(tǒng)（Inc）；XN9000 全自動(dòng)血液分析儀（sysmex 株式會(huì)）。

給藥方法：取鹽酸二甲雙胍片（國(guó)藥準(zhǔn)字H2002 3370），以15 d 為間隔時(shí)間結(jié)合患者血糖水平調(diào)整給藥劑量，日給藥劑量最大不能超過(guò)2 500 mg；給藥周期為90 d，期間嚴(yán)禁飲酒。 此外于患者空腹?fàn)顟B(tài)下采集2 mL 患者的外周血，以2 mLEDTA 抗凝管保存，離心后將血漿、血細(xì)胞分離，提取基因組DNA 并以-20C°患者中儲(chǔ)存。 參考《藥物代謝酶和藥物作用靶點(diǎn)基因檢測(cè)技術(shù)指南（試行）》中的熒光原位雜交法（FISH）對(duì)患者的SLC22A1、C11orf65 基因型進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)

通過(guò)OCR-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（PCR-RFLP）對(duì)患者的SLC22A1、C11orf65 基因多態(tài)性分布頻率進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)比分析患者治療前與隨訪1年后糖尿病指標(biāo)[空腹血糖（FPG）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）]與基因型之間的關(guān)聯(lián)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料的表達(dá)方式為（±s），采用t 檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料的表達(dá)方式為[n(%)]，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者SLC22A1、C11orf65 基因位點(diǎn)分型與等位基因頻率

該研究所納入的108 例患者中，完成全程治療的為79 例，參考Hardy-Weinberg 遺傳評(píng)定定律，其中SLC22A1 基因分型包括AA、GA、GC， 而C11orf65 基因分型包括AA、AC 與CC。 見(jiàn)表1。

表1 患者SLC22A1、C11orf65 基因位點(diǎn)分型與等位基因頻率（%）

2.2 治療前后不同SLC22A1 基因型患者糖尿病指標(biāo)對(duì)比

不同SLC22A1 基因型的患者治療前后在糖尿病指標(biāo)方面的改變并不顯著， 組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見(jiàn)表2。

表2 治療前后不同SLC22A1 基因型患者糖尿病指標(biāo)對(duì)比

2.3 治療前后不同C11orf65 基因型患者糖尿病指標(biāo)對(duì)比

C11orf65 CC 型患者相對(duì)比AA 型、AC 型患者而言，F(xiàn)PG 水平較低， 且CC 型患者的HbA1c 水平與HOMA-IR 水平也明顯低于AA 型、AC 型患者， 組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見(jiàn)表3。

表3 治療前后不同C11orf65 基因型患者糖尿病指標(biāo)對(duì)比

3 討論

但隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的持續(xù)發(fā)展，降糖藥物的研發(fā)成果也越來(lái)越多，導(dǎo)致臨床常見(jiàn)的降糖藥物種類(lèi)十分豐富，但目前首選的單藥治療方案仍為二甲雙胍[5-6]。 在中國(guó)2 型糖尿病防治指南（2017 版）中表明，即使肥胖的患者存在較多的胰島素注射治療史，仍可以給予二甲雙胍療法抑制其血糖水平[7]；在人體藥效動(dòng)力學(xué)、藥物動(dòng)力學(xué)方面，二甲雙胍的分布、吸收與排泄等過(guò)程均會(huì)受到多種類(lèi)型蛋白的影響， 所以認(rèn)為患者SLC22A1、C11orf65 基因多態(tài)性與二甲雙胍治療效果之間存在一定的關(guān)聯(lián)性。

C11orf65 屬于蛋白編碼基因，是11 號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框65 英文縮寫(xiě)，查閱既有研究資料可知，其關(guān)聯(lián)因素為T(mén) 細(xì)胞造血干細(xì)胞白血病，在其基因位點(diǎn)變異對(duì)二甲雙胍降糖功能影響方面的研究資料非常少[8]；SLC22A1 屬于溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)家族，主要表達(dá)于肝臟，其功能為轉(zhuǎn)運(yùn)二甲雙胍并使其進(jìn)入肝細(xì)胞進(jìn)行代謝，SLC22A1→G 改變可使408 位氨基酸發(fā)生Met→Val(M408V)的轉(zhuǎn)變，轉(zhuǎn)運(yùn)體編碼區(qū)單核苷酸多態(tài)性導(dǎo)致的同義突變及非同義突變或可影響轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的功能[9-11]。

該研究顯示：C11orf65 CC 型患者相對(duì)比AA 型、AC 型患者而言，F(xiàn)PG 水平較低（P＜0.05）；且CC 型患者的HbA1c 水平與HOMA-IR 水平也明顯低于AA型、AC 型患者（P＜0.05）。 這與閔翼[12]等的研究結(jié)果：SLC22A1 基因不同分型患者治療前后糖尿病指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但C11orf65 基因不同分型患者治療前后糖尿病指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）， 具體數(shù)據(jù)如下：AA-AC 之間的FPG 均差為（-0.369），HbA1c 均差為（-0.040），HOMA-IR 均差為（-0.098）；AA-CC 之間的FPG 均差為（-0.898），HbA1c均差為（-0.161），HOMA-IR 均差為（-0.294）；AC-CC之間的的FPG 均差為（-0.529），HbA1c 均差為（-0.121），HOMA-IR 均差為（-0.196）；基本一致。 可見(jiàn)2型糖尿病患者的C11orf65 基因多態(tài)性改變會(huì)直接影響其二甲雙胍治療效果。

綜上所述，2 型糖尿病患者臨床接受二甲雙胍治療， 臨床療效會(huì)受到C11orf65 基因多態(tài)性改變的影響。