蝴蝶蘭組織培養(yǎng)關(guān)鍵技術(shù)探析

韓穎

摘要：蝴蝶蘭具有“洋蘭王后”的美稱，其植株從葉腋中抽出長長的花梗，開出形如蝴蝶飛舞般的花朵，深受花迷們的青睞。蝴蝶蘭是通過組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖培育的。若要蝴蝶蘭長久延續(xù)發(fā)展，其組培快繁技術(shù)十分重要。組培苗能夠保持母本性狀，減少組培苗變異和具有植株整齊等特點(diǎn)。文章針對蝴蝶蘭組織培養(yǎng)關(guān)鍵技術(shù)中外植體選擇、培養(yǎng)基成分以及培養(yǎng)條件等進(jìn)行探討，以期提高蝴蝶蘭組培苗的生產(chǎn)效益。

關(guān)鍵詞：褐變;蝴蝶蘭;外植體;組織培養(yǎng)

蝴蝶蘭其花的結(jié)構(gòu)和形態(tài)近似蛾蝶，屬于蘭科蝴蝶蘭屬。蝴蝶蘭花型優(yōu)美，且色彩艷麗，花期較長，是蘭科蝴蝶蘭屬中一種極具觀賞價(jià)值的花卉。蝴蝶蘭為附生蘭，喜歡溫暖、遮蔭且濕度大的環(huán)境。蝴蝶蘭的繁殖方法分為有性繁殖和無性繁殖兩種。目前，花卉市場上的蝴蝶蘭的繁殖培育方式大多是通過組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行的。因此，在繁殖培育中所采用的技術(shù)措施需要合理有效，并且是低成本，為了使育苗生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)達(dá)到工廠化和規(guī)模化，需要保證蝴蝶蘭組培苗保持母本性狀、減少變異等，以提高生產(chǎn)效益。

1? 外植體選擇

蝴蝶蘭外植體材料的選擇非常重要，蝴蝶蘭組織培養(yǎng)一般選用花梗芽為外植體。其優(yōu)勢在于取材和消毒方便，同時(shí)蝴蝶蘭花梗芽的誘導(dǎo)率較高，是一種理想的外植體材料。合適的外植體能縮短誘導(dǎo)時(shí)間、減少變異率。蝴蝶蘭組織培養(yǎng)苗可通過外植體誘導(dǎo)原球莖獲得，也可以通過誘導(dǎo)叢生芽獲得，通過叢生芽誘導(dǎo)途徑技術(shù)可保持遺傳穩(wěn)定性，且難度較低，周期短，因此，叢生芽誘導(dǎo)途徑更適用于工廠化生產(chǎn)。而原球莖誘導(dǎo)途徑變異率高，且誘導(dǎo)時(shí)間長。但增殖系數(shù)較高、數(shù)量大。

花梗培養(yǎng)整個(gè)過程對母本的生長和花芽分化并不會(huì)造成影響，而且操作簡便，可以依靠此方法進(jìn)行培育難以誘導(dǎo)原球莖的蝴蝶蘭品種，使用外植體材料易獲得較多的不定芽為帶腋芽的花梗節(jié)段。可見，花梗是蝴蝶蘭組培快繁的最佳外植體。這是因?yàn)榛üＵT導(dǎo)原球莖的效率高于其他外植體材料。

2? 培養(yǎng)基成分

在蝴蝶蘭品種、外植體材料和組織培養(yǎng)階段，一般需要添加不同濃度的植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，但要以低無機(jī)鹽濃度的MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)。培養(yǎng)基成分中，植物激素添加的種類和濃度起到了至關(guān)重要的作用。在蝴蝶蘭的工廠化生產(chǎn)中，決定原球莖發(fā)生誘導(dǎo)速度的主要是植物激素6-BA、NAA濃度，而椰子汁、香蕉泥和土豆泥等會(huì)明顯影響對蝴蝶蘭組培苗的一致性。

壯苗生根階段直接影響到工廠化生產(chǎn)的種苗質(zhì)量，為試管苗的移栽和成活奠定基礎(chǔ)。在組培苗壯苗生根階段，為了促進(jìn)植物發(fā)根，培養(yǎng)基的生長素濃度通常需要提高，細(xì)胞分裂素濃度藥下調(diào)。此外，培養(yǎng)基中添加多種天然添加物，對蝴蝶蘭組培苗的生根壯苗有明顯的促進(jìn)作用，如椰子汁、香蕉汁、蘋果汁等，移栽成活率也較高。

3? 培養(yǎng)條件

在花梗誘導(dǎo)叢生芽過程中適宜的溫度十分重要。溫度較低腋芽轉(zhuǎn)化為花芽有利，而溫度較高則有利于腋芽轉(zhuǎn)化為營養(yǎng)芽。此外，光照強(qiáng)度對蝴蝶蘭試管苗生長影響也很大，蝴蝶蘭幼苗對溫度的要求比較高。光照過強(qiáng)會(huì)灼傷葉片，使葉片老化，甚至枯死，溫度過低，會(huì)導(dǎo)致葉片變黃、脫落，甚至死亡。

4? 植物組織培養(yǎng)褐變

褐變是因植物組織多酚氧化酶與其酚類底物結(jié)合，如不注意往往會(huì)因褐化而導(dǎo)致死亡。尤其是切取莖尖進(jìn)行脫除病毒的步驟需要特別重視。在氧的作用下，植物組織多酚氧化酶與其酚類底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)形成醒類物質(zhì)。酉昆類物質(zhì)會(huì)對植物材料造成毒害，因其是褐色物質(zhì)，對植物體內(nèi)酶的活性造成影響，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致材料死亡。

目前，常用的褐化抑制劑有兩大類，即抗氧化劑和吸附劑。抗氧化劑主要有維生素、谷胱甘肽等，吸附劑主要包括活性炭、檸檬酸等。谷胱甘肽和檸檬酸抑制褐化的效果一般，但二者對植物生根以及叢生芽誘導(dǎo)影響較小。活性炭可以有效抑制蝴蝶蘭褐化，因?yàn)樗奈叫詷O強(qiáng)。但是，培養(yǎng)基中添加活性炭有很多不利因素，也就是對蝴蝶蘭組培苗生根和叢生芽的誘導(dǎo)都產(chǎn)生不利影響。但如果添加抑制劑，也能有效地抑制褐化情況發(fā)生。但需要按時(shí)更換培養(yǎng)基和及時(shí)切除材料的褐化部位。

5? 病毒感染

建蘭花葉病毒和齒蘭環(huán)斑病毒是主要的侵染病毒，可以導(dǎo)致植株生長不良，對蝴蝶蘭葉片造成嚴(yán)重?fù)p傷，該病毒具有侵染性強(qiáng)、潛伏期長的特點(diǎn)。從外部表現(xiàn)看，受到病毒侵染后的蝴蝶蘭觀賞性會(huì)有很大程度的降低，其經(jīng)濟(jì)效益也同時(shí)降低。侵染病毒的原因主要是由操作不規(guī)范引起的，一般是造成交叉感染。因此，選取健康的蝴蝶蘭植株外植體時(shí)，需要進(jìn)行及時(shí)消毒，這是十分重要的，同時(shí)還有接觸到的操作儀器和器具等都是如此。

6? 結(jié)語

蝴蝶蘭組織培養(yǎng)對外植體的培養(yǎng)條件是十分嚴(yán)格的，要高度重視褐化問題和病毒感染問題。規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化的工廠化育苗在蝴蝶蘭組培苗的生產(chǎn)中是十分必要的。培育出高品質(zhì)的優(yōu)良幼苗，需要通過高投入高產(chǎn)出的經(jīng)營模式來完成，只有如此才能取得規(guī)模經(jīng)濟(jì)的效果和良好的收益。

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