孕婦地中海貧血篩查以及基因檢測結果分析與臨床意義

莊建全，姜 玲（通訊作者）

（重慶市萬盛經開區人民醫院 重慶 400800）

地中海貧血（簡稱地貧），也被稱作珠蛋白生成障礙性貧血，主要是突變或者缺失珠蛋白基因引起的肽鏈合成障礙所致，也是一種遺傳性溶血性貧血，主要有β 地貧和α 地貧。相關調查數據顯示，世界范圍內β 地貧或者α 地貧基因攜帶者占比1.7%，新生兒中有4.4/10 000 地貧[1]。現階段臨床針對該疾病仍未有根治方案，主要進行產前基因診斷和篩查，是控制地貧發生的主要手段，進而降低此類缺陷胎兒出生率。本次研究選擇本院2019 年3 月—2020 年2 月進行地貧篩查的1 083 例孕婦，針對地貧篩查以及基因檢測結果進行分析，內容報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年3 月—2020 年2 月本院進行地貧篩查的1 083 例孕婦，對其臨床資料進行回顧性分析，孕婦年齡20 ～40 歲，平均年齡（31.25±3.69）歲，孕周14 ～29 周，平均孕周（21.36±2.31）周。

1.2 方法

（1）初篩查方法：選擇β-地貧、α-地貧基因檢測試劑，能夠檢測突變型β-地貧19 種（17 個位點）、突變型α-地貧3 種、缺失型α-地貧3 種。對β-珠蛋白基因突變區、α-珠蛋白基因突變區、α-珠蛋白缺失區使用生物素標記引物開展特異性擴增操作，選擇標記不同突變類型或者與缺失型地貧探針尼龍膜與擴增產物開展導流雜交，之后根據化學顯色詳情進行結果評估。

（2）基因檢測：對初篩陽性孕婦血液標本進行DNA提取，開展基因檢測確定基因型，包括缺失型α 地貧有3 種：--SEA、-α3.7、-α4.2；突變型α 地貧有3 種：CS、QS、WS；β 地貧突變型有17 種：CD41-42、CD43、I V S-∥-654、C D17、C D14-15、-28、-29、C D71-72、βE、IVS-I-1、CD27-28、IVS-I-5、CAP、Int、CD31、-30、-32。

1.3 統計學方法

選用統計軟件SPSS 21.0 處理數據，計量資料以均數±標準差（x-± s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數資料以率[n（%）]表示，兩組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 孕婦地貧篩查結果

對1 083 例孕婦開展MCH 以及MCV 檢查結果顯示，73 例表型陽性患者，占比6.74%。開展PCR+導流雜交法分析結果顯示，46 例擬確診α-地貧患者，占比4.25%；25 例擬確診β-地貧患者，占比2.31%；2 例α/β 地貧患者，占比0.18%。3 種不同類型的地貧患者篩查結果差異有統計學意義（P＜0.05）。在確診率上，β 地貧、α 地貧高于α/β 地貧，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 孕婦地貧篩查結果

2.2 地貧孕婦基因分布詳情

46 例α 地貧患者中，占比最高的為36.96%-SEA/αα；25 例β 地貧患者中占比最高的為48.00%17M突變雜合子；2 例α/β 地貧患者中，α3.7 復合654M雜合子與SEA復合CS復合17M雜合子各占50.00%，見表2。

表2 地貧孕婦基因分布詳情

3.討論

地貧屬于一種單基因先天性遺傳性疾病，可按照缺少不同的珠蛋白肽鏈分成多種類型，其中α、β 地貧占比最高，該疾病臨床表現以貧血為主，在國內南方南海區域發病率較高。該疾病發病后因長時間貧血而引起機體缺乏營養，進而降低免疫力，增加感染性疾病發生風險。此外地貧患者紅細胞自身能力較差，無法大量輸送氧氣，情況嚴重時影響正常生活。常染色體隱性基因是該疾病致病基因，紅細胞體積低于健康人，且一些血紅素水平較低。該疾病對機體產生最嚴重的影響則為貧血，主要長時間貧血會影響部分臟器，使其功能出現衰退情況，此外還會影響骨髓造血功能，增加造血量以減少骨板厚度，產生骨質疏松等異常情況。與此同時，還會過度吸收鐵而產生肝脾腫大、心功能衰竭等嚴重疾病，不利于機體正常運作。目前該疾病仍未有有效根治治療手段，僅通過輸血以延續生命。造血干細胞移植是現階段該疾病最有效治療手段，其治療成功率在70%左右，然而治療費用昂貴，大多數患者經濟有限無法承擔。

相關流行病學研究數據顯示，南方海南、廣西等發病率較高，有20%以上人群存在致病基因，云南、四川等區域人群有6%的致病基因攜帶率[2]。如果夫妻2 人攜帶相同類型致病基因，子女致病基因攜帶率為50%、正常率為25%，重型率為25%[3]。現今國際上認為預防地貧的最有效方式為淘汰重型患兒。而該疾病篩查方案為基因診斷以及實驗室檢測，如脆性試驗、血紅蛋白電泳、PCR+導流雜交法等。目前本院產科產前常用的篩查方案為PCR+導流雜交法。本結果顯示，1 083 例孕婦開展PCR+導流雜交法檢查結果顯示，73 例表型陽性患者，占比6.74%。開展PCR+導流雜交法分析結果顯示，46 例擬確診α-地貧患者，占比4.25%；25 例擬確診β-地貧患者，占比2.31%；2 例α/β 地貧患者，占比0.18%。3 種不同類型的地貧患者篩查結果，差異有統計學意義（χ2=40.723，P＜0.05）。在確診率上，β 地貧、α地貧高于α/β 地貧，差異有統計學意義（P＜0.05）。這就說明PCR+導流雜交法聯合應用有助于孕婦地貧篩查，是篩查α、β 地貧的有效血液學指標，但由于極易漏診靜止型α-地貧，還需進行基因檢測。

β-地貧患兒與新生兒出生時無明顯異常，然而3 個月后則會逐漸產生貧血現象，此外還會合并面色蒼白、智力遲鈍、肝脾腫大等現象，如不治療多數患兒會在5 歲之前死亡；α-地貧患兒一般會出現早產或者妊娠期死亡，且早產后病死率較高；α-地貧復合β-地貧或者單一地貧患兒需終生輸血治療，以延續生命。此外，還要定期對血清鐵蛋白進行檢測，預防缺鐵性貧血的發生。血清鐵蛋白檢測費用低、操作簡單，然而誤診和漏診率較高。而血紅蛋白電泳也是常用檢測手段之一，但是重復性檢測難度大、準確率較低。還有部分患者脆性試驗以及MCV 檢測均正常，其漏診率為3%左右[4]。本研究對擬確診患者進行基因檢查顯示，46 例α 地貧患者中，占比最高的為36.96%-SEA/αα；25 例β 地貧患者中占比最高的為48.00%17M 突變雜合子；2 例α/β 地貧患者中，α3.7 復合654M 雜合子與SEA 復合CS 復合17M 雜合子各占50.00%。這就說明本地區以α 地貧為主，其中標準型-SEA/αα 基因型最多，和其他地區研究結果相似，但是其他基因型占比部分研究結果有一定差異性，可能是不同人群和不同區域地貧構成基因突變譜也有顯著差異[5]。由于該疾病治療難度大、無根治方法等，需有效預防，其預防方案則是婚前篩查、產前基因診斷和篩查，避免地貧患兒出生，減少致病基因攜帶率，提高人口質量，確保優生優育。

綜上所述，孕婦地貧篩查以及基因檢測意義重大，能夠及早發現胎兒是否攜帶疾病基因和基因分型，預防中重型地貧患兒的出生，減少地貧基因攜帶率。