利用多介質環境逸度模型比較典型抗生素磺胺唑和恩諾沙星在水產養殖中的環境歸趨

單祥保，方龍香，施羽露，邢路暢，裘麗萍，胡庚東,，宋 超,,4①，陳家長,,4②

〔1.南京農業大學無錫漁業學院，江蘇 無錫 214081；2.中國水產科學研究院淡水漁業研究中心，江蘇 無錫 214081； 3.農業農村部水產品質量安全環境因子風險評估實驗室(無錫)， 江蘇 無錫 214081；4.農業農村部水產品質量安全控制重點實驗室，北京 100141〕

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

儀器設備：超高效液相色譜/質譜(Waters，美國馬薩諸塞州)，多管式渦旋振蕩器(Henry Troemner，美國)，高速冷凍離心機(GL-22MS，上海盧湘儀離心機儀器有限公司)，SiGMA離心機，固相萃取裝置(CNW Technologies，德國)，分析天平(AL104，梅特勒-托利多儀器上海有限公司)。

1.2 試驗方法

1.2.1試驗設計

1.2.2樣品前處理

養殖水樣品：參考黃銖玉等[18]的方法進行前處理。搖勻后每份量取200 mL試樣進行萃取濃縮。選取HLB固相萃取小柱，用5 mL甲醇和5 mL超純水依次進行活化，然后上水樣，水樣抽干后，再用5 mL甲醇分2次(3 mL+2 mL)進行洗脫，用10 mL離心管收集洗脫液。用甲醇稀釋洗脫液至一定刻度，搖勻后取部分過0.22 μm孔徑濾膜，轉移至進樣瓶中，待測。

其他樣品：參考張石云等[19]的方法進行前處理。稱取(2±0.01) g試樣于50 mL離心管中，加入10 mLφ=0.1%的甲酸乙腈振蕩混勻，以2 000 r·min-1轉速渦旋振蕩10 min，以10 000 r·min-1離心5 min(離心半徑為10 cm)。取5 mL離心后的上清液，加入用5 mL超純水活化后的增強型脂質去除凈化管中，以2 000 r·min-1渦旋振蕩5 min，以4 000 r·min-1離心5 min(離心半徑為16 cm)。將離心后的上清液全部轉入含有1.7 g MgSO4增強型脂質去除凈化管中，以2 000 r·min-1振蕩5 min，再以4 000 r·min-1離心5 min(離心半徑為16 cm)。將上層有機相過0.22 μm孔徑濾膜，轉移至進樣瓶中，待測。

若濾液中待測物濃度超出標準曲線的線性范圍，則需酌情濃縮或稀釋試樣溶液。

1.2.3儀器分析條件

1.3 數據處理及統計分析

根據液相色譜-質譜定量檢測得出不同介質下各個時間段藥物濃度后，計算2種藥物在不同介質下的整體分布水平以及動態消解變化過程，使用多介質環境逸度Ⅲ級模型[20-21]模擬藥物在養殖環境中的歸趨行為。采用Microsoft Excel 2013和SPSS 25.0軟件整理分析數據，采用Graphpad Prism 5.01和Origin軟件作圖。

2 結果與分析

2.1 磺胺唑和恩諾沙星在羅非魚池塘養殖環境中的歸趨行為

表1 不同介質中磺胺唑濃度隨時間的變化

2.2 多介質環境逸度模型模擬磺胺唑和恩諾沙星的歸趨

表2 不同介質中恩諾沙星濃度隨時間的變化

表3 磺胺甲唑和恩諾沙星的物理化學性質

2.3 磺胺唑和恩諾沙星在羅非魚養殖環境中休藥期的模擬值與實際值比較

恩諾沙星在肝臟中代謝最快，經過5.7 d恢復至初始水平，其次是腸道內容物(10.3 d)。肌肉中恩諾沙星雖整體呈下降趨勢，但至最后一批樣品檢測時仍未恢復至初始水平，說明該藥物在羅非魚肌肉中出現一定程度的富集。試驗結果與標準規定休藥時間大體保持一致。

3 討論

3.1 磺胺唑和恩諾沙星在羅非魚各組織中的降解差異分析

3.2 磺胺唑和恩諾沙星在羅非魚養殖環境中的歸趨行為差異分析

恩諾沙星未在養殖水體和底泥中檢出，分析原因，一是羅非魚具有攝食快的特點，拌料投喂給藥影響了恩諾沙星在水體、魚體和沉積物中的分配比例；二是光照條件下恩諾沙星消解速率快，而且一定范圍內隨著溫度升高，恩諾沙星消解速率加快[31]，野外試驗時池塘水溫較高，為28 ℃左右；三是從第1次拌料投喂至第2次采樣的時間間隔為6 d，抗生素已降解；四是模型分析條件下，不同介質占比不會為0；五是每種藥物在養殖環境中的分配系數具有差異，導致其在養殖水體中未達到檢測限，不利于數據分析。

3.3 磺胺唑和恩諾沙星在羅非魚養殖環境中的休藥期

4 結論