葡萄糖酸鈣鋅口服液聯合布拉酵母菌散劑治療輪狀病毒性腹瀉的效果

吳 用，孫 冕，黃淑芹，林 容

輪狀病毒感染是引起嬰幼兒腹瀉的常見原因之一，如患兒腹瀉癥狀得不到有效控制，一旦發生脫水癥狀甚至可引起患兒死亡。由于輪狀病毒感染性腹瀉的發病機制尚未完全明確，臨床上尚缺乏特效治療藥物[1]。常規的抗病毒、補液等方法可在一定程度上控制腹瀉病情，但不能糾正患兒腸道菌群紊亂狀態。布拉酵母菌散劑是一種真菌類口服微生態制劑，在感染性腹瀉、非特異性腹瀉、腸易激綜合征等疾病的治療中比較常用，可糾正腸道菌群紊亂、抗毒素、保護腸道上皮細胞[2]。鋅是維持小腸上皮細胞結構和功能完整性的重要微量元素，鋅缺乏可進一步加重腹瀉的嚴重程度[3]。葡萄糖酸鈣鋅口服液是臨床上常用的鋅制劑，有研究將其應用于輪狀病毒性腹瀉的輔助治療中，發現其可縮短患兒高熱、嘔吐、腹瀉等癥狀持續時間，有利于提高療效[4]。但其對患兒胃腸功能是否存在保護作用相關研究較少。本研究收集三亞市人民醫院120例輪狀病毒感染患兒作為研究對象，觀察葡萄糖酸鈣鋅口服液聯合布拉酵母菌散劑對其癥狀控制及胃腸功能的影響，以期為臨床治療提供參考，現報道如下。

1 對象與方法

1.1 對象 選取2017年8月—2019年10月三亞市人民醫院收治的120例輪狀病毒感染患兒作為研究對象，根據治療方法分為常規組與聯合組，各60例。納入標準：①符合《諸福棠實用兒科學》[5]中輪狀病毒的相關診斷標準，即腹瀉多呈水樣或蛋花湯便，大便培養無致病菌生長，大便輪狀病毒抗原陽性，大便輪狀病毒弱陽性或陽性；②腹瀉時間12～72 h；③入院前未服用過相關治療藥物；④臨床資料完整。排除標準：①肝腎功能障礙、先天性心臟病、先天性腸道發育不全者；②嚴重營養不良者；③伴有明顯的重要器官衰竭癥狀者；④嘔吐不能口服給藥者；⑤過敏體質。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 常規組給予飲食指導、合理補液、抗病毒[口服利巴韋林5 mg/（kg·次），2次/d]、預防或糾正電解質紊亂等常規治療。聯合組在常規組治療基礎上給予葡萄糖酸鈣鋅口服液（澳諾制藥有限公司）聯合布拉酵母菌散劑（法國百科達制藥廠）治療。布拉酵母菌散劑1袋/次，1次/d，溫涼水沖服。葡萄糖酸鈣鋅口服液3 ml/次，3次/d，口服。連續治療3 d。

1.2.2 胃腸激素檢查方法 分別于治療前、治療3 d后抽取患兒外周靜脈血3 ml，在4 ℃下以轉速3000 r/min、離心半徑8 cm、離心時間10 min分離血清，采用酶聯免疫吸附法檢測血清胃泌素（gastrin,GAS）、胃動素（motilin,MOT）、血管活性腸肽（vascularly active intestinal peptide,VIP）水平。檢測儀器：美國Beckman免疫分析儀，試劑盒生產廠家：上海酶聯生物科技有限公司。上述實驗操作步驟嚴格遵照試劑盒說明書。

1.2.3 腸道菌群檢查方法 分別于治療前、治療3 d后取患兒新鮮糞便1 g置于無菌采集管，采用實時熒光定量PCR法檢測腸道菌群。采用CA公司QIAamp DNA Stool Mini Kit試劑盒提取糞便中菌群總DNA。設計腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌特異性引物，并在BLAST基因庫對比引物特異性，引物設計由上海基康公司合成。采用質粒標準品構建標準曲線。分別進行上述3種細菌的實時熒光定量PCR，結果以細菌拷貝數的常用對數/g濕糞表示。

1.3 觀察指標 ①臨床治療總有效率；②癥狀改善時間（退熱、止瀉、止吐、大便性狀正常）、住院時間；③用藥期間不良反應發生情況。

1.4 療效判斷[6]①顯效：治療3 d后，體溫恢復正常，大便性狀、量和次數恢復正常，脫水、嘔吐、發熱等癥狀、體征完全消失。②有效：治療3 d后，體溫逐漸下降至正常，大便次數和性狀顯著改善，脫水、嘔吐、發熱等癥狀、體征未完全消失。③無效：未達到上述標準，癥狀未改善或加重。總有效率=（顯效+有效）/患者例數×100%。

1.5 統計學處理 使用SPSS 19.0軟件處理數據，計量資料呈正態分布，用±s描表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，組內比較采用自身配對t檢驗。計數資料用例（%）表示，率的比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 2組一般資料比較 2組性別、年齡、發病至入院時間、入院時體溫及脫水程度等一般資料比較，差異均無統計學意義（P均＞0.05）。見表1。

表1 2組一般資料比較Table 1 Comparison of general data between 2 groups

2.2 2組療效比較 聯合組總有效率為93.33%，明顯高于常規組的80.00%，差異具有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 2組療效比較[例（%）]Table 2 Comparison of curative effect between 2 groups[cases(%)]

2.3 2 組癥狀改善時間、住院時間比較 聯合組退熱時間為（1.69±0.42）d、止瀉時間為（2.28±0.45）d、止吐時間為（1.92±0.44）d、大便性狀正常時間為（2.30±0.45）d、住院時間為（4.82±1.37）d，均短于常規組，差異均具有統計學意義（P均＜0.05）。見表3。

表3 2組癥狀改善時間、住院時間比較（±s，d）Table 3 Comparison of symptom improvement time and hospitalization time between 2 groups(±s,d)

表3 2組癥狀改善時間、住院時間比較（±s，d）Table 3 Comparison of symptom improvement time and hospitalization time between 2 groups(±s,d)

組別 n退熱時間 止瀉時間 止吐時間 大便性狀正常時間 住院時間常規組 60 2.28±0.47 3.05±0.67 2.47±0.49 3.12±0.74 6.21±1.54聯合組 60 1.69±0.42 2.28±0.45 1.92±0.44 2.30±0.45 4.82±1.37 t值 7.251 7.390 6.469 7.334 5.224 P值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

2.4 2 組腸道菌群含量比較 治療前，2組糞便標本中腸道菌群含量組間比較，差異均無統計學意義（P均＞0.05）。治療后，2組糞便標本中雙歧桿菌、乳酸桿菌含量較治療前上升，腸桿菌含量較治療前下降，且聯合組糞便標本中腸道菌群含量改善程度均高于常規組（P均＜0.05）。見表4。

表4 2組腸道菌群含量比較（±s，1og 拷貝數/g濕糞）Table 4 Comparison of intestinal flora contents between 2 groups(±s,log copies/ g wet manure)

表4 2組腸道菌群含量比較（±s，1og 拷貝數/g濕糞）Table 4 Comparison of intestinal flora contents between 2 groups(±s,log copies/ g wet manure)

注：常規組治療前后比較，自身配對t檢驗：腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌依次為t=9.006，P=0.000；t=4.214，P=0.000；t=4.022，P=0.000。聯合組治療前后比較，自身配對t檢驗：腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌依次為t=13.230，P=0.000；t=11.523，P=0.000；t=8.573，P=0.000

組別 n 腸桿菌 雙歧桿菌 乳酸桿菌治療前 治療后 差值d 治療前 治療后 差值d 治療前 治療后 差值d常規組 60 7.71±0.36 7.15±0.32 0.56±0.04 7.48±0.45 7.85±0.51 0.37±0.06 7.15±0.56 7.58±0.61 0.43±0.05聯合組 60 7.64±0.58 6.54±0.28 1.10±0.30 7.52±0.48 8.64±0.58 1.12±0.10 7.11±0.52 8.04±0.66 0.93±0.14 t值 0.794 13.820 0.471 49.816 0.405 26.053 P值 0.629 0.000 0.639 0.000 0.686 0.000

2.5 2組胃腸激素水平比較 治療前，2組胃腸激素水平組間比較，差異均無統計學意義（P均＞0.05）。治療后，2組GAS、MOT、VIP水平均較治療前下降，且聯合組GAS、MOT、VIP水平下降幅度均高于常規組（P均＜0.05）。見表5。

表5 2組胃腸激素水平比較（±s，μg/L）Table 5 Comparison of gastrointestinal hormone levels between 2 groups(±s,μg/L)

表5 2組胃腸激素水平比較（±s，μg/L）Table 5 Comparison of gastrointestinal hormone levels between 2 groups(±s,μg/L)

注：常規組治療前后比較，自身配對t檢驗：GAS、MOT、VIP依次為t=11.309，P=0.000；t=18.965，P=0.000；t=13.363，P=0.000。聯合組治療前后比較，自身配對t檢驗：GAS、MOT、VIP依次為t=14.028，P=0.000；t=19.419，P=0.000；t=17.280，P=0.000

組別 n GAS MOT VIP治療前 治療后 差值d 治療前 治療后 差值d 治療前 治療后 差值d常規組 60 1258.54±254.63 845.61±123.14 412.93±131.49 561.47±79.58 323.02±56.14 238.45±23.44 614.56±214.02 212.35±92.47 402.21±121.55聯合組 60 1238.56±261.11 728.59±105.44 509.97±155.67 549.96±101.44 271.56±45.19 278.40±56.25 628.46±198.88 152.37±77.42 476.09±121.46 t值 0.424 3.689 0.692 5.078 0.369 3.330 P值 0.672 0.000 0.491 0.000 0.713 0.001

2.6 2組用藥期間不良反應情況 2組患兒均未發生不良反應及變態反應。

3 討 論

輪狀病毒是引起嬰幼兒秋、冬季腹瀉常見的病原體，由于3歲以下的嬰幼兒腸道功能尚未發育成熟，因此是輪狀病毒性腹瀉的高發群體[7]。目前，輪狀病毒性腹瀉的發病機制尚未完全闡明，尚無特效治療方法[8]。因此尋找安全、有效的治療方案對改善輪狀病毒性腹瀉患兒預后有益[9]。

輪狀病毒性腹瀉具有一定的自限性，臨床治療以抗病毒、補液等綜合治療為主。布拉酵母菌是臨床常用的腸道微生態制劑，可干擾腸道致病菌定植、生長，促進腸道分泌蛋白酶水解有害菌產生的毒素[10]。有研究發現，布拉酵母菌治療輪狀病毒腹瀉具有良好的效果，可減輕腹瀉癥狀，減少患兒住院時間，同時抑制患兒免疫炎癥反應，降低血清TNF-α、IL-6等炎癥因子的表達，但仍有相當一部分患兒的療效欠佳，腹瀉癥狀不能得到及時、有效的緩解[11]。

近年來關于輪狀病毒腹瀉的研究發現，鋅元素缺乏與腹瀉病情加重密切相關[12]。鋅是人體必需的微量元素，參與多種代謝酶合成，并與酶活性直接相關[13]。鋅缺乏可直接影響多種免疫細胞的分化，造成免疫應答紊亂，進一步加重小腸黏膜上皮細胞結構和功能損傷[14]。有學者提出，在輪狀病毒性腹瀉的治療中應注重補充鋅元素[15]。葡萄糖酸鈣鋅是臨床上常用的鋅制劑，有研究證實其可縮短輪狀病毒性腹瀉病程，促進不適癥狀消失[16]。本研究中依據說明書和臨床用藥經驗，在常規治療的基礎上采用合適劑量的葡萄糖酸鈣鋅聯合布拉酵母菌治療，發現其總有效率高于常規治療組，退熱時間、止瀉時間、止吐時間、大便性狀正常時間、住院時間均短于常規治療組，以上結果與已有的臨床研究結論一致[17]。可能是由于葡萄糖酸鈣鋅中所含的鋅離子能促進腸黏膜細胞再生、修復，改善腸道對水、電解質的重吸收而緩解腹瀉癥狀。葡萄糖酸鈣鋅中所含的鈣離子還能補充腹瀉導致的鈣流失。

目前臨床常用的腸道益生菌包括細菌、真菌兩大類，其中真菌類微生態制劑并非胃腸道原籍菌，口服后不會被胃酸、膽酸、抗生素等破壞[18]。布拉酵母菌是一種真菌類微生態制劑，可激活網狀內皮系統、補體系統，促進免疫球蛋白分泌而抑制腸道致病微生物生存[19]。本研究中2組患兒治療后糞便標本中雙歧桿菌、乳酸桿菌含量均較治療前上升，腸桿菌含量較治療前下降，且聯合組糞便標本中腸道菌群含量改善程度均高于常規組。以上結果提示，葡萄糖酸鈣鋅口服液聯合布拉酵母菌散劑可更好地促進輪狀病毒感染患兒腸道菌群平衡重建，雙歧桿菌、乳酸桿菌含量升高后可迅速在腸黏膜表面形成保護性屏障，其腸道代謝產物具有抗菌活性，可抑制致病菌腸桿菌的繁殖。鋅作為多種酶的輔酶，可升高小腸上皮細胞刷狀緣的酶水平和活性，增加腸道抗感染能力，進一步促進腸道菌群平衡重建。

胃腸道不僅是消化器官，也是復雜的內分泌器官，通過釋放胃腸激素而調控胃腸功能。GAS是由小腸上部黏膜、胃竇合成的激素，過高的GAS可引起腸道過度運動而導致腹瀉[20]。MOT 可引起消化間期運動綜合波，增加腸黏膜水電解質分泌而引起腹瀉[21]。VIP 是一種胃腸神經肽，可增強腸道神經應激反應而引起腹瀉[22]。輪狀病毒感染后腸黏膜細胞被破壞，產生腸毒素，破壞腸功能，胃腸道激素分泌異常，引起腸蠕動功能異常、腸黏膜水電解質分泌紊亂而發生腹瀉。本研究中2組患兒治療后血清GAS、MOT、VIP水平均較治療前下降，且聯合組GAS、MOT、VIP水平下降幅度均高于常規組，以上結果提示，葡萄糖酸鈣鋅口服液聯合布拉酵母菌散劑可更好地改善輪狀病毒感染患兒胃腸激素水平。可能是由于鋅元素能促進腸道黏膜的修復、再生，促進腸道上皮修復，糾正了胃腸激素分泌紊亂狀態。本研究中2組患兒均未發生不良反應及變態反應，說明葡萄糖酸鈣鋅口服液聯合布拉酵母菌散劑治療輪狀病毒感染的安全性良好。

本研究結果證實了葡萄糖酸鈣鋅口服液聯合布拉酵母菌散劑在治療輪狀病毒感染中的優勢，但這兩種藥是何種在發揮作用以及發生了多少作用并不能確定，因此在后續治療中應進行細化分析，增加葡萄糖酸鈣鋅口服液組、布拉酵母菌散劑組以進一步探討葡萄糖酸鈣鋅口服液、布拉酵母菌散劑在治療輪狀病毒感染中的作用。

綜上所述，葡萄糖酸鈣鋅口服液聯合布拉酵母菌散劑可促進輪狀病毒感染患兒臨床癥狀的消失，改善胃腸激素水平，平衡腸道菌群，提高療效。