火焰原子吸收光譜法測定食品中鋅的方法驗證

劉曉娟 馬瑞雪 張繁繁 王巧娟

摘 ? 要：在使用標準方法進行檢測之前，實驗室需證實能夠正確運用標準方法以驗證其技術能力是否達到了標準的規(guī)定要求[1-2]。本試驗參照《食品安全國家標準 食品中鋅的測定》（GB 5009.14-2017）第一法：火焰原子吸收光譜法測定特殊醫(yī)學用途食品中的鋅含量，并對該方法的準確度、精密度、檢出限、定量限等參數(shù)進行了實驗分析評估[3]。

關鍵詞：鋅 ?方法驗證 ?檢出限 ?定量限 ?火焰原子吸收光譜法

經(jīng)研究證明，鋅是微生物、植物和動物所必需的微量元素之一，且其存在于人體所有組織、器官、體液及分泌物中。鋅在人體內(nèi)主要以酶的成分組成存在，有近百種酶的活性依賴于鋅的催化作用。盡管缺乏鋅元素會引起人體生長發(fā)育緩慢、皮膚傷口愈合不良、胃腸道疾病、免疫功能減退等癥狀，但也不能過量攝入鋅元素——會對身體產(chǎn)生不同程度的傷害。鋅中毒會引起腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐等不良反應[4]，由于鋅的正常和過量的范圍較寬，正常情況下不易發(fā)生鋅中毒，但并不意味著不會發(fā)生。本研究參照國家標椎《食品安全國家標準 食品中鋅的測定》（GB 5009.14-2017）第一法：火焰原子吸收光譜法對特殊醫(yī)學用途食品中鋅含量的測定進行分析方法驗證，證實該方法在實驗室現(xiàn)有的儀器設備、人員、環(huán)境等條件下能夠獲得滿意的結(jié)果。

1 材料與方法

1.1試劑

硝酸，優(yōu)級純。

1.2 儀器與設備

火焰原子吸收分光光度計（TAS-990），北京普析通用儀器有限公司;鋅空心陰極燈、馬弗爐（SX3-5-12），北京科偉永興儀器有限公司;電熱板（DB-4），國華電器有限公司;電子天平（SQP），賽多利斯科學儀器（北京）有限公司。

1.3 火焰原子吸收分光光度計試驗條件

波長：213.9nm;狹縫：0.4nm;燈電流：3.0mA;燃燒頭高度：6mm;乙炔流量：1.2L/min;空氣壓力：0.23Mp。

1.4 試驗方法

1.4.1 標準溶液配制

鋅標準溶液：1000μg/mL，來源于國家有色金屬及電子材料分析測試中心。

鋅標準中間液：10μg/mL：準確吸取鋅標準溶液（1000μg/mL）1.0mL，用5%硝酸溶液定容到100mL容量瓶中，混勻。

標準系列工作液：分別準確吸取鋅標準中間液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL置于100mL容量瓶中，并用5%硝酸溶液定容至刻度，混勻后獲得的溶液濃度依次為：0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mL。

1.4.2 樣品處理方法

樣品預處理參照《食品安全國家標準 食品中鋅的測定》（GB 5009.14-2017）第一法：火焰原子吸收光譜法中的干法灰化處理。稱取樣品（精確至0.1mg）置于50mL坩堝中，在電熱板上微火炭化至不再冒煙，冷卻后移入550℃馬弗爐中灰化5小時成白色灰燼。冷卻至室溫后取出，加入5.0mL（50%）硝酸溶液，在電熱板上加熱使灰燼充分溶解，冷卻至室溫后取下。同時，處理空白試樣。

1.4.3 分析結(jié)果計算

式中：X為樣品中鋅的含量，mg/100g;V為樣品消化液的定容體積，mL;f為樣品消化液的稀釋倍數(shù);C為硝酸銀標準滴定液的濃度，μg/mL;m為樣品的稱樣質(zhì)量，g。

2 準確度、檢出限、定量限、精密度分析

2.1 準確度

2.1.1 樣品處理

稱取嬰幼兒配方乳粉（703IP08011）樣品按樣品處理方法進行處理后移入小燒杯中，并用去二級水沖洗2～3次，一同轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中用二級水定容。從該試液中準確吸取1.0mL置于10mL容量瓶中，用5%硝酸溶液定容——樣品定容體積為50mL，稀釋倍數(shù)為10。

2.1.2 準確度計算結(jié)果

準確度標準曲線：將上述鋅標準系列工作液按質(zhì)量濃度由低到高依次上機測試，以質(zhì)量濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標建立標準曲線。標品濃度依次為：0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mL;對應的吸光度值分別為0.000、0.020、0.041、0.065、0.086、0.106;標準曲線為y=0.2149x-0.0007，r=0.99967。

將經(jīng)過上述處理的嬰幼兒配方乳粉（703IP08011）樣品按測定步驟依次上機測試，實驗結(jié)果見表1。經(jīng)驗證，該方法的測量值在質(zhì)控樣品的范圍內(nèi)。

2.2 檢出限、定量限、精密度

2.2.1 樣品處理

選擇不含鋅的樣品，分別稱取6份樣品置于50mL坩堝中，依次編號1?～6?。于1?～6?中分別加入0.5μg/mL的鋅標準液3.0mL，即每份樣品加入的鋅含量為1.5μg。再按照樣品處理方法進行處理后移入小燒杯中，并用去二級水沖洗2～3次，一同轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中用二級水定容，即樣品定容體積為25mL、稀釋倍數(shù)為1。

2.2.2 檢出限、定量限、精密度計算

標準曲線：將上述鋅標準系列工作液按質(zhì)量濃度由低到高依次上機測試，以質(zhì)量濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標建立標準曲線。標品濃度依次為：0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mL;對應的吸光度值分別為：0.000、0.032、0.074、0.109、0.138、0.172;標準曲線為y=0.3466x+0.0009，r=0.99877。

將上述加標樣品按測定步驟依次上機測試，鋅檢出限、定量限及CV值（CV值越高，樣品的離散程度越大，精密度越低），結(jié)果見表2。

該實驗中被測組分含量在1～10mg/kg之間，變異系數(shù)CV應滿足CV≤7.5[5]，符合要求。

3 結(jié)論

當樣品稱樣量為0.5g，定容體積為25mL時，方法檢出限為1mg/kg，定量限為3mg/kg，可見，試驗準確度、精密度滿足實驗要求。因此，該方法在該實驗室現(xiàn)有的儀器設備、人員、環(huán)境等條件下能夠獲得滿意的結(jié)果。

參考文獻：

[1] 《檢測和校準實驗室能力認可準則》（CNAS-CL01：2018）[S].

[2] 《檢測和校準實驗室能力的通用要》（GB/T 27025-2019）[S].

[3] 李梅，王晴，李樹貴，等.淺談實驗室檢測方法的驗證與確認[J].食品安全質(zhì)量檢測學報，2018，9（23）：6305-6308.

[4] 葛可佑.中國營養(yǎng)科學全書上冊[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2004.9.

[5] 《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》（GB 27404-2008）[S].