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我國鮭鱒魚類養殖常見流行疫病研究概況

2021-08-05 08:27:12李樂于曉清李翹楚于道德鄒琰葉海斌吳海一刁菁
生物技術進展 2021年4期

李樂, 于曉清, 李翹楚, 于道德, 鄒琰, 葉海斌, 吳海一, 刁菁

山東省海洋科學研究院,山東省海水養殖病害防治重點實驗室,山東青島266104

鮭鱒魚類是鮭魚和鱒魚的統稱,均隸屬于鮭科(Salmonidae),為世界三大主養品種之一,因生活環境清潔、肉質細嫩且富含二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)等不飽和脂肪酸等優點深受消費者喜愛,在我國有50 多年的養殖歷史。養殖品種包括大西洋鮭、虹鱒、金鱒、銀鮭、硬頭鱒、七彩鮭、山女鱒等10余種,養殖區域涵蓋了北京、青海、黑龍江、遼寧、吉林、甘肅、山東、新疆等地,隨著近年來對黃海冷水團資源的發掘,鮭鱒魚養殖也從陸地走向了海洋[1-5]。

我國鮭鱒魚人工養殖規模逐年擴大,養殖技術日趨成熟,但養殖品種種質退化、外源疾病輸入、養殖環境遭受破壞、防病意識缺乏以及其他人為原因導致近年來病害頻發,特別是傳染性造血器官壞死病、癤瘡病等暴發性疾病,給養殖業帶來了巨大危害[6-9]。因此,本文對我國養殖鮭鱒魚主要流行疫病種類、診斷技術以及免疫防控技術的研究現狀進行概述,旨在為鮭鱒魚養殖從業者對疫病的預防和診斷提供參考。

1 主要流行疫病

1.1 細菌性疾病

1.1.1 癤瘡病 癤瘡病(furunculosis)是鮭鱒養殖過程中常見細菌病之一,可分為急性型、亞急性型、慢性Ⅰ型及慢性Ⅱ型,虹鱒魚多表現為慢性型或亞急性型[10],通常表現為體色發黑、眼球突出、食欲不振、腹部腫脹、鰭基部充血、皮膚潰瘍等。癤瘡病的病原為殺鮭氣單胞菌(Aeromonas salmonicida),屬氣單胞菌科(Aeromonadaceae)氣單胞菌屬(Aeromonas)[11],是一種不能運動、兼性厭氧的革蘭氏陰性菌。殺鮭氣單胞菌具有廣泛的地理分布,其宿主范圍廣泛,主要危害鮭鱒魚類、鯉魚、大菱鲆等,可感染各個生長發育階段的海淡水魚類[11-14]。目前已知的殺鮭氣單胞菌分為:殺鮭亞種、無色亞種、殺日本鮭亞種、溶果膠亞種和史氏亞種等,其中殺鮭亞種為典型株。近年來,有學者根據其特異性毒力基因vapA序列的差異分為14個類型,呈現出一定程度的地緣特性[15-17]。

目前,我國對殺鮭氣單胞菌的分離鑒定、致病性、生長模型、藥敏特性等方面開展了相關研究。刁菁等[18]自虹鱒病魚中分離到一株致病菌,通過生理生化分析及分子生物學手段鑒定為A. salmonicida,并通過回染實驗和毒力因子(如氣溶素、溶血素、封閉帶毒素等)檢測,確定此菌株具有較強的致病力。田會芹等[19]則對從大西洋鮭患病個體分離的A. salmonicida開展了環境因子(溫度、pH)對其生長的影響研究,確定了其各單因子的適宜范圍,并以溫度為主要影響因子建立了生長模型。此外,有團隊研究了A.salmonicida感染對大西洋鮭游泳和變色型的影響及其生理機制,對受感染后體內免疫系統以及與能量代謝相關的因子進行了量化分析,揭示了病變后的生理變化[20]。上述研究通過探明A. salmonicida致病機理、分析其生長特性、研究魚類感染后的行為變化和生理機制,來為疫苗研制、病害預警系統研發提供理論數據,有助于減少養殖鮭鱒魚類感染A.salmonicida的可能性,降低癤瘡病的發病率。

1.1.2 細菌性敗血癥 細菌性敗血癥也稱細菌性出血病、細菌性腹水病等,是一種水產養殖過程中常見的病癥之一,病魚外部癥狀表現為體色發黑、腹部腫脹、尾部和鰭條出現壞死和糜爛,肛門和大部分皮膚出血且會惡化為水腫型潰爛,并伴有內臟器官出血。嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)為該病主要病原,隸屬于氣單胞菌科氣單胞菌屬,是淡水養殖動物與重要的病原菌之一,嚴重危害鮭鱒魚類、草魚、牙鲆、鯽魚、團頭魴等魚類的養殖業,可引起細菌性敗血癥、腸炎,是一種典型的條件性致病菌,當飼養周邊條件、水質指標發生劇烈變化時,常與其他病原菌混合感染使病情惡化[21-25]。研究表明,A. hydrophila致病性與自身兩大類致病因子密切相關:一類是本身具有致病作用,如溶血素、腸毒素等外毒素;另一類則與細菌的吸附、入侵機體有關,如菌毛、表面蛋白S 層等粘附因子[26-28]。

1.1.3 其他細菌性疾病 除癤瘡病、細菌性敗血癥兩類常見流行疫病外,還有爛鰓病、爛鰭病、紅嘴病、腸炎等細菌性疾病,相應的病原種類繁多,多為條件致病菌,包括鰻弧菌、嗜鰓黃桿菌、魯氏耶爾森菌、遲鈍愛德華氏菌、海分枝桿菌、柱狀黃桿菌等,大多存在著混合感染的情況,對鮭鱒魚養殖業造成一定程度的危害[2,9,27-30]。

1.2 病毒性疾病

世界動物衛生組織(Office International des épizooties,OIE)必須申報的魚類疫病中,以鮭鱒魚類作為宿主的有5種:傳染性鮭魚貧血癥、鮭魚甲病毒病、流行性造血器官壞死病、病毒性出血性敗血癥、傳染性造血器官壞死病,均為病毒性疾病,它們對全球鮭鱒魚類養殖業造成了巨大的經濟打擊。我國貫徹執行《中國人民共和國動物防疫法》,農業農村部明確規定了《一、二、三類動物疫病病種名錄》[31],其中流行性造血器官壞死病、傳染性造血器官壞死病、病毒性出血性敗血癥被歸為二類疫病,進行重點防疫。

水溫對上述病毒病的發病及死亡率影響較大,在水溫3~18 ℃均可造成魚類死亡,8~12 ℃為流行高峰。其中,傳染性造血器官壞死病在水溫10 ℃時,死亡率最高;水溫低于10 ℃時,潛伏期延長,病情呈慢性;水溫高于10 ℃時病情較急,顯示低死亡率;當水溫超過15 ℃后,一般不出現自然發病。

相較于歐洲、北美等地區,我國目前報道的病毒性疾病種類較少,主要為傳染性造血器官壞死病和傳染性胰腺壞死病2 種,目前國內尚未有鮭鱒魚類暴發其他疾病的報道,但仍有較大的傳入風險[32-34]。

1.2.1 傳染性造血器官壞死病 傳染性造血器官壞死病為農業部二類動物疫病,也是OIE 必須申報的疫病,常發生于虹鱒魚養殖場,急性暴發會導致極高死亡率。該病病原為傳染性造血器官壞死病毒(infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV),是一種單鏈RNA 病毒,彈狀病毒科,侵染的主要靶器官為腎造血組織[35-37]。IHNV 于20 世紀80年代傳入我國,農業農村部于2011年起對其實施專項監測,中國水產科學研究院黑龍江水產研究所盧彤巖團隊于2012—2017 年在遼寧、北京、山東、甘肅、新疆、河北、云南、青海等省份均分離到相應的病毒(圖1)[38]。

圖1 2012—2017年我國IHNV收集分布圖[38]Fig.1 Map of collection sites for IHNV in China from 2012 to 2017[38]

IHNV 的核酸序列約為11 000 bp,目前NCBI錄入的已有6 株完整的IHNV 毒株基因組被分離鑒定,其中 HLJ-09(JX64910)、BjLL(MF509592)及 CH20101008(KJ421216)均為國內分離鑒定[39-40]。IHNV 蛋白則由 P、G、M、N 和 L 5 種結構蛋白和1 種非結構蛋白組成,通過對G 基因進行系統發育分析,將IHNV 分為5 個主要的基因型,即 U、M、L、E 和 J 型[41-42],我國以 J 基因型為主,具有顯著的地域特性。IHNV 在稚魚和幼魚之間水平傳播是最主要的傳染方式,其主要通過接觸被病毒污染的水、食物、帶毒魚排泄的尿、糞便以及漁具等而感染[43]。

1.2.2 傳染性胰腺壞死病 傳染性胰腺壞死病主要危害20 周齡以內的鮭鱒幼魚,一般為急性流行,短時間致死率可達90%以上,分布范圍廣泛,涉及我國山西、甘肅、山東、遼寧、四川等省份,其中1989 年發生的傳染性胰腺壞死病暴發導致山東省的鮭鱒魚類養殖損失接近90%[44]。其病原為傳染性胰臟壞死病毒(infectious pancreatic necrosis virus,IPNV),隸屬于雙RNA 病毒科,可通過垂直傳播和水平傳播將病毒粒子釋放到環境中,染病后幸存魚將成為IPNV的終身攜帶者。

IPNV 基因組包含 A 和 B 2 個線性 RNA 分子,B 鏈編碼的 VP1 為 RNA 聚合酶,A 鏈編碼 VP2、VP3、VP4 和 VP5 4 種蛋白,其中,VP2 作為主要外衣殼蛋白,含有主要的抗原表位決定簇,其217~221 位氨基酸與病毒的毒力密切相關,現階段大部分IPNV 的檢測、分類、免疫研究均以VP2 為研究對象[45-47]。2013 年 Ji 等[48]在云南某養殖場虹鱒中分離出了IPNV 毒株——ChRtm213,并確定了其全基因組序列,這是我國IPNV分離株的第一個基因序列,根據A 鏈序列比對分析,其與日本株AM-98(AY283780.1)聚為一簇。同時,劉淼等[49]根據VP2序列進行基因型分型,采用臨位相鄰法構建了IPNV 的系統進化樹,聚類分析結果顯示,ChRtm213 與參考毒株加拿大Jasper(ATCC:VR-1325)聚為一簇,具有較近的親緣關系(圖2)。

圖2 以VP2基因序列構建的ChRtm213分離株進化樹[49]Fig.2 Phylogenetic tree of ChRtm213 isolate based on gene sequence of VP2[49]

1.2.3 病毒性出血性敗血癥 病毒性出血性敗血癥為農業農村部二類動物疫病,也是OIE 必須申報的疫病,主要流行于歐洲和北美,近年來擴散到日本和韓國,迄今為止我國未見報道[33]。該病病原為病毒性出血性敗血病毒(viral hemorrhagic septicemia virus,VHSV),屬于彈狀病毒科,為單鏈負義RNA 病毒,宿主極為廣泛,可感染鮭鱒魚、牙鲆、狗魚和大菱鲆等淡水、海水養殖品種,近年來野生魚類遭受感染而死亡的情況亦有報道[50-55]。

1.3 其他生物疾病

1.3.1 魚虱病 挪威作為大西洋鮭的主產國,目前已形成成熟的防疫體系,但魚虱病引起的損失仍困擾著其鮭魚養殖業。魚虱病的病原為魚虱,屬于節肢動物門、甲殼綱、橈足亞綱、魚虱目、魚虱科、魚虱屬,以寄主的粘液、表皮組織和血液為食,寄生在鮭魚身上影響肉質,嚴重時導致魚死亡,具有11 個不同形態的發育階段,流行季節為5—10月[56]。魚虱很容易產生廣泛的抗藥性,不易用藥物防治,魚虱雌蟲受精后會離開宿主,將卵袋產在附著物上,這時可能是其生命周期最薄弱的環節[5]。目前,除生態防治和免疫預防外,通過防蟲藥物如敵百蟲、除蟲菊酯等藥浴或飼料中預混殺蟲藥物,也是國外對其防控的主要手段。

1.3.2 水霉病 水霉病又叫白毛病、水綿病或膚霉病,一般是由水霉屬或綿霉屬等的真菌引起,大多生長在魚體的傷口處和魚卵上,呈白色棉絮狀。健康魚體具有較強的抗水霉病能力,水霉病多發生于養殖過程中分池、倒池、清污、運輸等環節后,因操作粗暴導致魚體體表組織破損、鱗片脫落等機械損傷后感染。隨著其特效藥——孔雀石綠于2002 年后全面禁用,水霉病也成為了限制虹鱒、七彩鮭、山女鱒等鮭鱒魚類養殖增產的重要因素[57-58]。

2 流行疫病診斷技術

盡管各類疾病均在國內流行多年,但尚無有效治療的措施。隨著病原體耐藥性的增強,高效檢出病原、切斷傳播途徑尤為重要。目前,針對水生動物疫病診斷,OIE 出版了《水生動物診斷手冊》,我國頒布了相關的檢測標準(表1),通過細菌培養鑒定、組織病理學、免疫學、分子生物學等手段綜合判斷,對流行疫病病原診斷起到了指導性作用。

表1 我國鮭鱒魚類部分疾病檢驗規程Table 1 The quarantine methods of partial disease of salmon and trout in China

2.1 組織病理學技術

組織病理學作為基礎診斷手段,在初診中具有不可替代的地位。從業人員觀察魚體體表,對內臟器官、組織進行染色切片,利用顯微鏡檢查,對機體進行解剖學特征分析,綜合正常組織與老化、損傷、感染、病變等過程的特征變化,對魚體疾病進行判斷。但需要豐富的一線經驗和技術手段,較難有科技產出,且需與其他手段配合。王琦等[59]對感染IHNV 的發病與未發病虹鱒的組織進行常規石蠟切片,HE 染色,并結合對不同規格和不同發病階段虹鱒的血液細胞學檢測。結果表明,發病虹鱒肝臟、腎臟、腸上皮、心肌等組織都發生了不同程度壞死;同時,發病魚的血液細胞學各項指標發生了明顯變化。這也說明,通過對虹鱒各組織的觀察以及血液的檢測,能較為便捷、直觀地反映其健康狀況。中國農業出版社出版的《鮭鱒疾病彩色圖譜(第2 版)》將鮭鱒魚類受到感染后的體表、鰓、肝、脾、腎等部位出現的病灶以圖譜的形式展現,涵蓋了八類疾病,為從業者初診提供了直觀的檢索參考[60]。

2.2 細菌培養鑒定技術

使用取樣針從病灶處取樣,選取適當的培養基劃線培養,選取菌斑進行分離鑒定。使用細菌生化實驗微量鑒定管、全自動生化分析儀等對細菌的形態學特征、培養特性及生化實驗結果綜合分析,可以在一定程度上將細菌進行鑒定,但仍需通過分子生物學方法對16S rDNA 基因片段進行比對來判斷[61]。郭中鋼等[21]挑取虹鱒的肝臟、腎臟等病變部位,通過重復劃線培養,獲得一株嗜水氣單胞菌,命名為HSZS-01,為革蘭氏陰性菌,采用細菌微量生化鑒定管進行了生理生化分析,按照《常規細菌系統鑒定手冊》鑒定到種,并使用藥敏紙片進行了藥敏分析。該方法操作簡便、適用于初檢以及基層檢測。

2.3 細胞培養技術

作為病毒學研究最經典的方法,目前細胞培養技術仍為水生動物病毒診斷的“黃金標準”。將待測樣本的靶器官(如肝臟、腎臟、脾臟)進行破碎勻漿并稀釋,選用特定的敏感細胞進行分離培養后,通過顯微鏡觀察是否出現細胞病變(cytopathic effect,CPE)進行判斷[62]。該方法觀察方法簡單,能夠通過培養分離毒株、保存毒株,但操作要求高、診斷時間長且難以鑒定到種,需要與其他檢測技術配合使用,不適合大規模檢測。胡曉利等[46]將病料進行勻漿后,用含有雙抗的M199 細胞培養液1∶10稀釋后,4 ℃孵育過夜,稀釋接種于大鱗大麻哈魚胚胎細胞(Chinook salmonembryo cells,CHSE)進行傳代培養,分離得到了一株IPNV。趙景壯等[36]則利用鯉魚上皮瘤細胞(epithelioma papulosum cyprini,EPC)分 離 得 到 了 IHNV 毒 株Sn1203,同時結合分子生物學手段進行了全基因組序列分析,進一步明晰了該毒株的系統進化地位。

2.4 免疫學技術

根據抗原抗體特異性結合的原理,針對保守的抗原決定簇,借助于顯色手段或標記技術,達到診斷特定病原的目的。免疫學檢測技術包括中和試驗、免疫熒光、免疫印跡、酶聯免疫吸附、膠體金、原位雜交等。免疫學技術對抗體要求較高,高效價抗血清難以制備,容易出現交叉反應,影響鑒定的可靠性[63]。同細胞培養技術相比較,免疫學技術具有靈敏性和特異性高、假陽性率低、部分手段不依賴儀器設備、適用環境廣等優點,特異性診斷產品研發之后具有極高的推廣應用價值。陳桂花等[64]以 IPNV ChRtm213 分離株的 VP3 序列為模板進行了原核表達,以純化的VP3 蛋白為免疫原制備鼠抗血清,并將該血清應用到了中國不同地區的IPNV 分離株的免疫熒光檢測中,對基因1 型和5 型均有識別,且對IHNV 和VHSV 無交叉反應。

2.5 分子生物學技術

分子生物學診斷技術通過細菌培養或病毒分離,進行核酸提取,根據病原的保守片段(如致病菌的16S rDNA、真菌ITS、IHNV的G基因、IPNV的VP2等)設計特異性引物,進行對數擴增,能夠迅速準確地進行判斷。分子生物學診斷技術包括傳統的PCR、real-time PCR、LAMP 等手段,也有多重PCR、基因芯片、DNA 探針、重組酶聚合酶擴增等新型技術[65-68]。與其他診斷方法相比,分子生物學手段具有靈敏度高、特異性強、耗時短、可確認到種、手段豐富等優點,被廣泛應用,如普通PCR、恒溫擴增適用于高通量、基層診斷,而熒光定量PCR、DNA探針等技術適用于實驗室精細化操作。呂曉楠等[65]以IHNV G 基因為靶位點,建立了逆轉錄重組酶介導擴增(reverse transcription recombinase-aid amplification,RT-RAA)檢測技術,反應條件為恒溫37 ℃,擴增時間為20 min,與傳統RTPCR(約180 min)相比,更具有時效性和普遍適用性,同時在靈敏度、特異性以及準確率上與傳統的RT-PCR技術基本一致。

3 免疫防控技術

目前國內魚類疾病的控制,仍有不少從業者依賴于抗生素,但隨著抗生素的使用甚至濫用,魚類養殖面臨著耐藥性以及質量控制的問題,將來可能會面臨著“無藥可用”的狀態。在挪威,從起初的單價疫苗到現在的多聯疫苗,已逐漸形成一個成熟的免疫防控產業化體系,從1987 年的每噸大西洋鮭使用接近1 kg的抗生素到目前的幾乎不使用抗生素,死亡率控制到5%以下[69]。疫苗接種方式有口服、浸泡、注射等多種手段,迄今為止,已報道的疫苗主要有滅活疫苗、減毒活疫苗和重組疫苗等,多聯疫苗的研發亦備受主流研究機構的青睞。

3.1 滅活疫苗

滅活疫苗作為當前最為成熟的技術手段被廣泛應用,通過物理或化學方法將培養的病原進行消殺滅活而成,在保持抗原免疫原性的基礎上,破壞了病原體的致病性,因此安全性得到保障。由于制備方法簡便、研發周期短且成本低廉,長期以來都是各類疫苗研發的首選,國內水產疫苗如弧菌、氣單胞菌和草魚呼腸弧病毒等疫苗的免疫保護性非常明顯[70]。物理滅活方法(如高溫法)制備的疫苗免疫保護率相對較低,通常采用化學滅活劑進行滅活。

最傳統且最廣泛的化學滅活劑為甲醛,具有價格低廉、易獲取等優點,其對殺鮭氣單胞菌、嗜冷黃桿菌腎桿菌等細菌以及IHNV、IPNV 等病毒進行滅活后均有良好的效果。但甲醛存在著一定的刺激性和致癌風險,滅活時間長且不徹底,篩選更有效的滅活劑成為研究熱點[71]。β-丙內酯是甲醛的良好替代品,采用 2.7 mmol·L-1的 β-丙內酯滅活IHNV 24 h 后對虹鱒進行注射,相對保護率達90%以上,免疫時效可持續56 d[71]。刁菁等[72]則使用新型材料-納米鋅作為滅活劑,使用100 mg·L-1的納米鋅溶液制作的殺鮭氣單胞菌滅活疫苗效果優于甲醛處理組,免疫保護率達86%,同時對EPC 細胞的生長及代謝無顯著影響,是一種潛在的高效滅活劑。

3.2 重組疫苗

利用現代分子生物學及微生物學技術,將特定的抗原基因進行重組、表達,直接將核酸或表達的蛋白注入魚體內進行免疫,含重組亞單位疫苗、核酸疫苗、基因缺失或突變疫苗及活載體疫苗等[73]。與傳統的疫苗相比,具有成本低、無致病性、適用范圍廣、儲存方便等優點,顯示出廣闊的開發和應用前景。

重組亞單位疫苗是指將保守的抗原基因進行體外表達,并將病原蛋白分離純化制備而成。Diao等[74]將殺鮭氣單胞菌的外膜蛋白OmpC、溶血素等進行重組表達,免疫保護率達80%以上,特異性抗體水平在6 周內呈持續升高趨勢。但受限于大腸桿菌、酵母等表達系統的影響,通常情況下重組亞單位疫苗需添加佐劑以增強其免疫原性。

核酸疫苗一般指DNA 疫苗,指將表達主要抗原原性的基因鏈接到不同的載體上構建而成的重組質粒。目前國內多個研發團隊針對IHNV 的G基因、IPNV 的VP2等構建了適用于不同情況的DNA 疫苗,效果良好,其中,徐黎明等[75-77]構建的IHN DNA 疫苗(pIHNchG)在黑龍江省已完成中間試驗,提交了環境釋放申報材料。但由于進入體內的質粒不可控,它將持續在體內進行表達并釋放到環境中,缺乏與風險相關的基礎研究,出于安全性考慮,一些國家(如挪威)禁止使用DNA疫苗。

相較于核酸疫苗及亞單位疫苗,基因缺失或突變疫苗及活載體疫苗受限于研發成本及難度,相關研究較少,20世紀90年代由歐洲學者最先報道的基因突變疫苗及活載體疫苗均為殺鮭氣單胞菌疫苗。李守湖等[78]運用腺病毒作為載體,利用IHNV G蛋白完成了重組腺病毒的構建,制備而成的活載體疫苗,通過浸泡的方式進行免疫,免疫保護率達90%以上,免疫持續期達6個月。

3.3 多聯疫苗

多聯疫苗即經一次免疫可同時抵抗2 種或2種以上病原感染,避免重復接種造成的機械損傷,多聯疫苗的研發對鮭鱒魚養殖業的健康可持續發展極為重要。由于鮭鱒魚類養殖過程中經常發生諸如殺鮭氣單胞菌、IHNV 等不同病原引起的疾病交叉,挪威已經研發出針對弧菌病、癤瘡病和腸炎等多種病害的六聯、七聯疫苗[79]。國內的鮭鱒魚養殖業起步較晚,相關多聯疫苗的研發相對滯后,2017 年國內研發團隊構建了IHNV 和IPNV 的二價核酸疫苗,可以對IHNV 和IPNV 的交叉感染具有顯著作用,累積死亡率低于7%[80]。

3.4 佐劑

高度純化的疫苗成分通常缺乏病原相關分子模式,不能有效激活先天免疫應答而發生有效的免疫反應,從而造成免疫保護效果不佳,需要配合佐劑使用。理想的佐劑須具備良好的免疫活性、穩定且清晰的化學結構、能夠顯著提高疫苗的免疫保護率和持久性,同時兼顧價格和副作用。佐劑的分類方法眾說紛紜,在鮭鱒魚疫苗中如弗氏佐劑、Seppic 公司的 ISA763 和 IMS1312 等含油佐劑應用最廣,采用油包水的方式將疫苗包裹在內部用于注射,其他常用佐劑有鋁鹽佐劑、葡聚糖、脂多糖、皂苷、細胞因子、蜂膠等[81-84]。劉帥[83]使用蜂膠和弗氏完全2 種佐劑混合殺鮭氣單胞菌疫苗對虹鱒進行接種,攻毒14 d 后免疫保護率分別為90%和85%,均高于純疫苗接種組,說明佐劑的使用能有效提高疫苗的保護作用,而副作用方面的研究結果表明蜂膠佐劑不會對魚體造成損害,更適于生產應用。

4 展望

目前,我國鮭鱒魚的養殖規模仍小于挪威、智利等主產國,但隨著國民生活水平的不斷提高,人民對優質蛋白質的需求不斷加大,國內科技力量對于鮭鱒魚類養殖不斷投入,有效地促進了產業的發展。伴隨著我國東北、西南、西北、華北以及黃海冷水團等地鮭鱒魚產業的迅猛發展,國內科技力量的聯合攻關,我國水生動物疫病及免疫學研究近年來獲得了長足的進步。與此同時,國內對于鮭鱒魚類疫病的研究和防控體系建設方面仍落后于挪威等國。流行疫病基礎理論研究仍有欠缺,部分疫病的致病機理、傳播途徑以及機體響應機制尚不明確,我國仍存在著病原變異、外源疫病輸入等風險,而流行病學調查的重要性則容易被忽略,導致研究水平滯后于疫病暴發情況。

伴隨著免疫學和分子生物學的發展,如膠體金技術、恒溫擴增技術等廣泛開發和推廣應用,將突破實驗條件限制,能夠迅速、準確進行現場判斷,結合更加科學的實驗室檢驗,能夠讓診斷技術更好的為產業服務。

國內鮭鱒魚適用的預防接種處于“九龍治水”階段,多為自家疫苗,商品化疫苗仍未實現零的突破,與國外的商品化多聯疫苗仍存在不小差距。同時接種手段、注射疫苗后的器官黏連、佐劑配伍以及小規格魚苗的預防接種方案等難題仍困擾著科研人員,科學預防體系任重道遠。因病原的耐藥性問題以及藥物限用,將來可能會面臨著發病后無藥可用的狀態,科學防控尤為重要,充分利用診斷技術將疫情控制,通過免疫接種預防將成為主流手段,具有無可比擬的優勢和發展前景。

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