電化學(xué)發(fā)光法和流式熒光發(fā)光法檢測SCCA 輔助診斷相關(guān)組織鱗癌的價值

許傳剛

鱗狀細(xì)胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCCA)最早于1977 年從子宮頸鱗狀上皮細(xì)胞癌組織中分離的亞片段,以SCCA1 和SCCA2 兩種亞型共同存在［1］。已發(fā)現(xiàn)SCCA1 和SCCA2 在宮頸癌中表達水平升高,且還發(fā)現(xiàn)在肺、頭頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌(squamous cell cancer,SCC)中表達于中度和分化良好的腫瘤［2］。為此,需選擇最佳臨床靈敏度、測定方法檢測SCCA1和SCCA2 表達水平以提高對鱗癌患者的診斷。電化學(xué)發(fā)光法和流式熒光發(fā)光法是目前臨床常規(guī)檢測SCCA的方法,由于檢測原理及針對抗原表位的不同,其檢測結(jié)果存在差異,故本研究將探討電化學(xué)發(fā)光法和流式熒光發(fā)光法檢測SCCA 輔助診斷相關(guān)組織鱗癌的價值,結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2019 年11 月～2020 年10 月收治的99 例確診鱗癌患者的血清標(biāo)本。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)臨床、影像學(xué)或病理證實為鱗癌［3］；②均為原發(fā)性腫瘤；③尚未接受相關(guān)(手術(shù)、放化療)治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并全身鱗狀上皮組織病變者；②合并高血壓、糖尿病等基礎(chǔ)疾病者；③已發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者。其中男40 例(40.40%),女59 例(59.60%)；年齡40～60 歲,平均年齡(53.54±9.25)歲。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn),患者及家屬簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 試劑和儀器 流式熒光發(fā)光法：SCCA 檢測試劑盒(上海透景)和多功能流式點陣儀Luminex 200TM(上海透景)。電化學(xué)發(fā)光法：SCCA 檢測試劑盒及配套校準(zhǔn)品和定標(biāo)液(德國羅氏),羅氏全自動電化學(xué)發(fā)光分析儀(型號：cobasE602)。均根據(jù)廠家原裝或附帶的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品進行校準(zhǔn)和質(zhì)量控制。

1.2.2 檢查方法 采集研究對象清晨空腹肘靜脈血2 ml 置于含分離膠和促凝劑的真空采血管中,靜置30 min 后,以3500 r/min,離心5 min,取血清,置于零下20℃環(huán)境中保存。操作過程中需全程佩戴手套和口罩,防止外源性污染。標(biāo)本測定和分析由兩名高年資主治檢驗醫(yī)師完成。

1.3 觀察指標(biāo) 根據(jù)金標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果,對比兩種方法在相關(guān)組織鱗癌(肺鱗癌、宮頸鱗癌、頭頸部鱗癌)中的診斷符合率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理結(jié)果 9 例鱗癌患者病理檢查結(jié)果顯示,肺鱗癌41 例(41.41%),宮頸鱗癌34 例(34.34%),頭頸部鱗癌24 例(24.25%)。

2.2 兩種檢查方式的鱗癌診斷符合率對比 電化學(xué)發(fā)光法對肺鱗癌、宮頸鱗癌、頭頸部鱗癌診斷符合率分別為63.41%、61.75、50.00%,均高于流式熒光發(fā)光法的41.46%、35.29%、20.83%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩種檢查方式的鱗癌診斷符合率對比(n,%)

3 討論

SCCA 是目前輔助診斷鱗癌特異性較好的腫瘤標(biāo)志物之一,在多種鱗狀上皮細(xì)胞來源的惡性腫瘤組織中呈高表達水平。SCCA 與宮頸癌分期、疾病復(fù)發(fā)、進展等密切相關(guān)［4］；在肺癌中,SCCA 作為非小細(xì)胞癌標(biāo)志物,連續(xù)監(jiān)測該水平有助于評估療效［5］；在頭頸部鱗癌中,SCCA 水平可評估淋巴結(jié)受累程度,且該水平為頭頸部鱗癌患者獨立預(yù)后因子［6］。基于SCCA 水平在鱗癌相關(guān)腫瘤標(biāo)志物中具有較高的特異度和靈敏度,故檢測SCCA 水平是輔助鱗癌的早期診斷及治療監(jiān)測的有效手段。流式熒光發(fā)光法可通過靈活組合同時對多種目的分子進行分析成為以往臨床較為常規(guī)采用的檢測手段,但既往研究表明,該檢測方式會因不同微球的光譜對產(chǎn)品性能造成影響,而導(dǎo)致對宮頸鱗癌、肺鱗癌診斷陽性符合率相對較低［7］。近年來,隨著檢驗技術(shù)的不斷發(fā)展,電化學(xué)發(fā)光法因儀器設(shè)備簡單、操作方便等逐漸受到重視。

電化學(xué)發(fā)光法包括化學(xué)發(fā)光和電發(fā)光兩個部分,是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。是將三聯(lián)吡啶釕和三丙胺作為電子供體,在電極表面發(fā)生進行電子轉(zhuǎn)移為原理。在電場中三聯(lián)吡啶釕可不斷向三丙胺提供電子,進而周而復(fù)始發(fā)光,以增強信號強度,更準(zhǔn)確判斷標(biāo)記物的理化特性,提高對鱗癌的診斷價值。

本研究中,99 例鱗癌患者病理檢查結(jié)果顯示,肺鱗癌41 例(41.41%),宮頸鱗癌34 例(34.34%),頭頸部鱗癌24 例(24.25%),說明在SCCA 在肺、宮頸及頭頸部廣泛表達。因SCCA 屬于抑制型絲氨酸蛋白酶抑制劑,其編碼基因位于染色體18q21.3 上,分別與SCCA1和SCCA2 基因相連,SCCA1 可增強腫瘤細(xì)胞抗程序性死亡能力,而SCCA2 則主要對糜蛋白酶樣蛋白激酶介導(dǎo)的炎性反應(yīng)進行抵抗［8,9］,肺、宮頸、頭頸部組織中含有大量鱗狀上皮細(xì)胞,故其發(fā)生鱗癌幾率相對較高。

流式熒光發(fā)光法和電化學(xué)發(fā)光法均可對外周SCCA 總水平進行檢測,本研究將兩種檢測方式對鱗癌診斷符合率對比發(fā)現(xiàn),電化學(xué)發(fā)光法對肺鱗癌、宮頸鱗癌、頭頸部鱗癌診斷符合率分別為63.41%、61.75、50.00%,均高于流式熒光發(fā)光法的41.46%、35.29%、20.83%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。提示電化學(xué)發(fā)光法可提高對肺鱗癌、宮頸鱗癌、頭頸部鱗癌診斷符合率。因流式熒光發(fā)光法是基于編碼微球和流式技術(shù)的高通量發(fā)光檢測技術(shù),但因不同微球的光譜會產(chǎn)生相互干擾和拖帶,對產(chǎn)品性能造成不同程度的影響,其次熒光微球初始信號是依靠免疫復(fù)合物交聯(lián)的藻紅蛋白產(chǎn)生,將其交聯(lián)形成免疫復(fù)合物后會降低儀器對微球的檢出效率,進而影響診斷價值。而電化學(xué)發(fā)光法將化學(xué)發(fā)光法和電化學(xué)方法的優(yōu)點相結(jié)合,一方面可通過光學(xué)和電化學(xué)對標(biāo)記物進行更全面研究,另一方面其靈敏度僅取決于電極白面附近分析物的濃度,極大方便分離與富集。且該反應(yīng)中N-強基琥珀酰胺和三丙胺可同時失去電子而發(fā)生氧化反應(yīng),能在電極表面循環(huán)反應(yīng)中產(chǎn)生多個光子,以增強光信號,更準(zhǔn)確判斷標(biāo)記物的理化特性,提高腺癌診斷價值。劉彥明等［10］的研究中對236 例確診為鱗癌患者分別采用電化學(xué)發(fā)光法和流式熒光發(fā)光法檢測顯示,電化學(xué)發(fā)光法對肺鱗癌、宮頸鱗癌診斷符合率明顯高于流式熒光發(fā)光法(52.04%VS 40.82%)、(57.14% VS 36.14%),與本研究結(jié)果相符。

綜上所述,相較于流式熒光發(fā)光法,電化學(xué)發(fā)光法檢測SCCA 可提高相關(guān)組織鱗癌的診斷符合率。