雞新城疫病毒、禽流感病毒（H9亞型）病毒、禽腺病毒三聯(lián)滅活疫苗抗體免疫持續(xù)期研究

李 倩，梁宛楠，陳丕坤

（哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司，哈爾濱150069）

雞新城疫是由新城疫病毒（NDV）感染所致的一種烈性病毒性傳染病，是全球范圍內(nèi)重要的傳染病之一，嚴(yán)重危害著我國(guó)的養(yǎng)禽業(yè)[1]。禽流感是由正黏病毒科流感屬A型流感病毒引起禽類的一種傳染病[2-3]，近幾年來(lái)在我國(guó)部分商品產(chǎn)蛋雞場(chǎng)及養(yǎng)雞專業(yè)村的禽流感病毒（AIV）調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，H9亞型陽(yáng)性雞群占總的AIV抗體陽(yáng)性雞群的93.67%，說(shuō)明H9亞型AIV廣泛存在[4-5]。雖然H9亞型屬于低致病性禽流感，其危害不如高致病性病性禽流感嚴(yán)重，但該亞型禽流感常常繼發(fā)感染新城疫、大腸桿菌病等而造成產(chǎn)蛋雞大批死亡和產(chǎn)蛋率下降，給我國(guó)畜牧業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。禽心包積水-包涵體肝炎綜合征是主要由禽腺病毒4型引起的一種高度傳染性和高死亡率的新型家禽疾病。該病的發(fā)病特征為3~5周齡雞突然死亡，死亡率高達(dá)80%[6-7]。該病主要發(fā)生于3~5周齡的肉雞，肉雜雞（817）、麻雞、種雞和蛋雞亦可在相似的日齡段發(fā)病，是目前危害養(yǎng)禽業(yè)健康發(fā)展的最嚴(yán)重的傳染病之一，在我國(guó)每年都有不同程度的流行，嚴(yán)重危害集約化養(yǎng)禽業(yè)的持續(xù)、穩(wěn)定、健康發(fā)展，給養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

近幾年來(lái)以上三種病毒混合感染在我國(guó)家禽上不斷發(fā)生，使我國(guó)畜牧產(chǎn)業(yè)面臨極大的挑戰(zhàn)。本研究取雞新城疫、禽流感（H9亞型）、禽腺病毒三聯(lián)滅活疫苗免疫7日齡和21日齡SPF雞，于免后不同時(shí)間進(jìn)行血清抗體測(cè)定，來(lái)確定該產(chǎn)品的免疫持續(xù)期，以期指導(dǎo)雞病防疫。

1 材料

1.1 三聯(lián)系滅活疫苗

雞新城疫病毒、禽流感病毒（H9亞型）、禽腺病毒三聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+TJ株+HY株），共3個(gè)批次，由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司試制，批號(hào)分別為01、02、03。

1.2 抗原

雞新城疫病毒血凝抑制試驗(yàn)抗原、H9亞型禽流感病毒血凝抑制試驗(yàn)抗原、Ⅰ群4型禽腺病毒瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)抗原，由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司制備、鑒定、保管和供應(yīng)。

1.3 試驗(yàn)雞

SPF雞，由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司五常SPF雞場(chǎng)提供。

2 方法

每批滅活疫苗各經(jīng)頸部皮下接種7日和21日齡SPF雞30只，7日齡SPF雞每只0.2 mL，21日齡SPF雞每只0.5 mL。7日齡雞于免疫后7 d、11 d、14 d、21 d、28 d、1個(gè)月、2個(gè)月和3個(gè)月采血；21日齡雞于免疫后7 d、11 d、14 d、21 d、28 d、1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、4個(gè)月和5個(gè)月采血，分離血清，分別測(cè)定免疫雞血清中雞新城疫病毒、禽流感（H9亞型）病毒和禽腺病毒的抗體效價(jià)。同時(shí)設(shè)同批次同日SPF雞5只，注射相應(yīng)劑量的生理鹽水作為對(duì)照。各組分別隔離飼養(yǎng)。

3 結(jié)果與分析

3.1 7日齡SPF雞免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

7日齡雞分別于免疫后7 d、11 d、14 d、21 d、28 d、1個(gè)月、2個(gè)月和3個(gè)月采血，分離血清，測(cè)定抗體效價(jià)，結(jié)果見(jiàn)表1~3。

由表1可知，3批疫苗免疫7日齡SPF雞，免疫后14 d新城疫抗體效價(jià)達(dá)到1∶16，可產(chǎn)生有效保護(hù)；28 d達(dá)到高峰，并持續(xù)至免疫后1個(gè)月，免疫后3個(gè)月部分次批抗體效價(jià)低于4 lb。

表1 7日齡SPF雞新城疫免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

由表2可知，3批疫苗免疫7日齡SPF雞，免疫后21 d禽流感抗體效價(jià)達(dá)到高峰，可產(chǎn)生有效保護(hù)；并持續(xù)至免疫后1個(gè)月，免疫后2個(gè)月抗體開(kāi)始下降，免疫后3個(gè)月抗體效約為4 lb。

表2 7日齡SPF雞禽流感(H9亞型)免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

由表3可知，3批疫苗免疫7日齡SPF雞，免疫后14 d禽腺病毒抗體效價(jià)達(dá)到1∶1，可產(chǎn)生有效保護(hù)；免疫后21日達(dá)高峰并持續(xù)至免疫后2個(gè)月，免疫后3個(gè)月抗體開(kāi)始下降，且降至保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)以下。

表3 7日齡SPF雞禽腺病毒免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

3.2 21日齡SPF雞免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

21日齡雞于免后7 d、11 d、14 d、21 d、28 d、1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、4個(gè)月和5個(gè)月采血，分離血清，測(cè)定抗體效價(jià)，結(jié)果見(jiàn)表4~6。

由表4可知，3批疫苗免疫21日齡SPF雞，免疫后14 d新城疫抗體效價(jià)達(dá)到1∶16，可產(chǎn)生有效保護(hù)；28日達(dá)到高峰，并持續(xù)至免疫后2個(gè)月，免疫后3個(gè)月抗體下降，5個(gè)月部分批次抗體效價(jià)低于1∶16。

表4 21日齡SPF雞新城疫免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

由表5可知，3批疫苗免疫21日齡SPF雞后14 d禽流感抗體效價(jià)達(dá)1∶16，可產(chǎn)生有效保護(hù)；免疫后21天抗體效價(jià)達(dá)高峰，并持續(xù)至免疫后2個(gè)月，免疫后3個(gè)月抗體效價(jià)開(kāi)始下降，5個(gè)月時(shí)部分批次疫苗效價(jià)低于4 lb，降至保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)以下。

表5 21日齡SPF雞禽流感(H9亞型)免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

由表6數(shù)據(jù)可知，3批疫苗免疫21日齡SPF雞后14 d禽腺病毒抗體效價(jià)達(dá)到1∶1，可產(chǎn)生有效保護(hù)；免疫后21天達(dá)高峰并持續(xù)至免疫后4個(gè)月，免疫后5個(gè)月抗體效價(jià)開(kāi)始下降，且降至保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)以下。

表6 21日齡SPF雞禽腺病毒免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

4 結(jié) 論

研究結(jié)果表明：雞新城疫、禽流感（H9亞型）、禽腺病毒三聯(lián)滅活疫苗免疫2周齡以下的雞免疫持續(xù)期為2個(gè)月；免疫2周齡以上的雞免疫持續(xù)期為4個(gè)月。