CA125、HE4及LIMK2在不同級別漿液性卵巢癌血清和組織中的表達及臨床意義

楊雨晴，石小青，時春麗

湖南省婦幼保健院婦產科1、病理科2，湖南 長沙 410000

卵巢癌是女性生殖系統三大惡性腫瘤之一。卵巢癌患者70%以上為上皮性卵巢癌[1]。上皮性卵巢癌主要組織類型分為高級別漿液性卵巢癌、低級別漿液性卵巢癌、子宮內膜樣癌、透明細胞癌和黏液性癌等[2]。其中，高級別漿液性卵巢癌占2/3以上[3]。卵巢癌初期臨床癥狀不明顯，容易發生腹腔轉移,確診時多已經發展為晚期。采取有效治療手段的早期卵巢癌患者5年生存率可高達85%，而進展到晚期的僅為20%[4]。因此，早發現早治療對卵巢癌患者改善預后、延長生存時間極為重要。糖類抗原125(CA125)是目前比較常用的診斷卵巢癌血清學腫瘤標志物，也可作為上皮性卵巢癌復發的敏感指標[5]。人附睪蛋白4(HE4)是近幾年來出現的一種新的腫瘤標志物，在惡性腫瘤中尤其是卵巢癌、子宮內膜癌等中可高度表達。LIM激酶2(LIMK2)是一種存在于真核生物中的蛋白激酶，在腫瘤組織及細胞中可高表達[6]。本研究主要檢測CA125、HE4、LIMK2在低、高級別漿液性卵巢癌血清和病理組織中的表達差異，并探討其臨床意義，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 采用回顧性方法，收集湖南省婦幼保健院2018年1月至2020年6月期間治療的103例漿液性卵巢癌患者。納入標準：(1)均進行病理活檢確診為漿液性卵巢癌；(2)入組前未進行放化療治療；(3)病歷資料完整；(4)排除重要臟器的病變及合并其他嚴重疾病者。本研究經醫院倫理委員會審批同意后開展，所有患者均簽署知情同意書。103例患者平均年齡(61.6±9.8)歲，其中低級別漿液性卵巢癌33例，高級別漿液性卵巢癌70例。

1.2 血清CA125、HE4檢測方法 所有入組患者空腹8 h以上于次日早晨8點左右抽取3 mL靜脈血，3 000 r/min離心10 min，然后分離血清，采用德國貝克曼DXI-800全自動化學發光分析儀及其配套試劑檢測血清CA125、HE4，參考范圍分別為0～35U/mL、0～150pmol/L。

1.3 病理組織HE4、LIMK2檢測方法 HE4組織化學染色采用北京中衫公司生產的DAB顯色試劑盒、鼠抗人HE4單克隆抗體免疫組化檢測試劑盒，出現棕黃色顆粒或團塊則表明HE4陽性。LIMK2采用福州邁新生物技術有限公司的DAB顯色試劑盒、兔抗人LIMK2單克隆抗體，出現棕黃色顆粒即判斷為陽性。

1.4 統計學方法 應用SPSS21.0軟件進行數據統計學分析。計量資料符合正態分布，以均數±標準差(±s)表示，組間比較采用t檢驗，計數資料比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同級別漿液性卵巢癌血清中CA125、HE4水平比較 高級別漿液性卵巢癌患者的血清CA125、HE4水平明顯高于低級別漿液性卵巢癌，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 不同級別漿液性卵巢癌血清中CA125、HE4水平比較(±s)

表1 不同級別漿液性卵巢癌血清中CA125、HE4水平比較(±s)

級別低級別漿液性卵巢癌高級別漿液性卵巢癌t值P值例數33 70 CA125(U/mL)488.34±100.11 663.27±112.09 4.531 0.001 HE4(pmol/L)302.15±60.32 431.77±69.57 4.621 0.001

2.2 不同級別漿液性卵巢癌病理組織中HE4、LIMK2蛋白表達水平比較 高級別漿液性卵巢癌患者HE4、LIMK2蛋白表達的陽性率明顯高于低級別漿液性卵巢癌患者，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表2。不同級別卵巢癌組織中HE4、LIMK2蛋白的表達見圖1和圖2。

圖1 不同級別漿液性卵巢癌組織中HE的表達(×400)

圖2 不同級別漿液性卵巢組織中LIMK2的表達(×400)

表2 不同級別漿液性卵巢癌組織中HE4蛋白、LIMK2蛋白表達水平比較[例(%)]

3 討論

卵巢通常處于女性盆腔的深部，位置比較隱蔽，體積比較小，導致卵巢癌發病初期癥狀不明顯，不容易與其他疾病區分開。漿液性卵巢癌是卵巢癌最常見的一種。70%的漿液性卵巢癌就診時已是晚期，多數已經在盆腔和腹腔內發生轉移[7]。按照“二元論”模型的說法，漿液性卵巢癌主要分為低級別漿液性卵巢癌和高級別漿液性卵巢癌，低級別漿液性卵巢癌由良性的漿液性腺瘤發展而來，由于癌細胞生長緩慢，發現多為早期，預后較好；而高級別漿液性卵巢癌多為原位癌，來源于輸卵管傘端，浸潤性強，進展較快，發現已多為晚期，出現盆腔和腹腔的轉移，預后不良[8]。

CA125來源于胚胎發育期體腔上皮細胞，在正常的卵巢組織中并不存在。CA125是比較傳統的卵巢癌的檢測方法，大部分上皮性卵巢癌患者CA125水平均升高，以漿液性癌最為顯著[9]。但它的靈敏性和特異性均不高，在很多良性腫瘤中也可高度表達，因此容易漏診誤診。HE4是近年來出現的一種新型腫瘤標志物，是一種分泌性糖蛋白，分子量約25 kD。最先發現于附睪遠端上皮，正常情況下在卵巢組織幾乎無表達，良性腫瘤中可呈現低表達，但在卵巢癌組織中存在高表達現象[10-11]。LIMK2是LIM激酶家族成員，是一種絲氨酸蘇氨酸激酶，在多種腫瘤中高度表達，可能參與例腫瘤的發生、發展、遷移、侵襲等過程[12]。既往研究發現其在結腸癌、前列腺癌、宮頸癌等中高度表達，但目前對LIMK2在漿液性卵巢癌方面的研究比較少。

本研究對漿液性卵巢癌病理組織進行了免疫組化的檢測方法，發現高級別漿液性卵巢癌組織中HE4、LIMK2的水平明顯高于低級別漿液性卵巢癌，這與赫慧等[13]的報道一致。LIMK2在高級別漿液性卵巢癌中具有較高的陽性檢出率，這在劉鑫慧等[14]的報道中也有體現。另外，血清腫瘤標志物中，用于漿液性卵巢癌的主要有CA125、HE4、CEA、D-二聚體等等，CA125、HE4在早期漿液性卵巢癌中具有很高的診斷價值[15]。103例漿液性卵巢癌患者中高級別漿液性卵巢癌血清CA125、HE4水平明顯高于低級別漿液性卵巢癌，而且病理組織中HE4、LIMK2蛋白在不同級別漿液性卵巢癌中的表達也有明顯差異。在本研究中高級別漿液性卵巢癌病理組織中LIMK2的陽性檢出率甚至可以達到100%。因此，CA125、HE4、LIMK2能更有效地區分漿液性卵巢癌的臨床分級，為臨床醫師的診斷和治療提供參考。

綜上所述，CA125、HE4及LIMK2在高級別漿液性卵巢癌血清和病理組織中的水平明顯高于低級別漿液性卵巢癌，可以為臨床診療工作提供鑒別依據。但本次研究樣本量較小，可能存在一定的偏頗，有待以后加大樣本量進一步研究驗證。