七種殺菌劑對(duì)荊州市小麥赤霉病的室內(nèi)毒力及田間防效

常 悅，朱 祥，孟振國(guó)，董 倩，王錦鵬，李俊凱，b

（長(zhǎng)江大學(xué)，a.農(nóng)學(xué)院；b.農(nóng)藥研究所，湖北 荊州 434025）

小麥赤霉病是由禾谷鐮刀菌（Fusarium gra?minearum）等多種鐮刀菌引起的氣候型病害，主要分布在氣候潮濕的多雨地區(qū)，是小麥上的主要病害之一［1，2］。該病害一旦發(fā)生不僅會(huì)造成小麥產(chǎn)量受損，而且其感病子粒中赤霉菌菌株所產(chǎn)生的真菌毒素如脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）和雪腐鐮刀菌烯醇（NIV），會(huì)抑制種子發(fā)芽，有助于病害大流行，影響小麥?zhǔn)称芳庸ず螽a(chǎn)品的品質(zhì)和口感，更重要的是人畜食用后會(huì)產(chǎn)生腹瀉、嘔吐和腸胃病等中毒癥狀，危害人畜健康［3-5］。

小麥?zhǔn)乔G州市主要糧食作物之一，常年種植冬小麥的面積大、產(chǎn)量較高。荊州市地處長(zhǎng)江中下游冬小麥區(qū)，氣溫較高、雨季時(shí)間長(zhǎng)、雨量大、陰濕寡照，是赤霉病流行、重發(fā)區(qū)域［6，7］。近年來(lái)，由于當(dāng)?shù)胤N植戶對(duì)該病認(rèn)識(shí)不足，使用藥量不合理，防治藥劑單一，導(dǎo)致小麥赤霉病菌抗藥性不斷上升，防效下降趨勢(shì)明顯。為了解和研究不同藥劑和劑型對(duì)荊州市冬小麥赤霉病的防治效果，本研究選擇了7種殺菌劑，測(cè)定其室內(nèi)毒力，并開(kāi)展田間施藥試驗(yàn)，比較各處理藥劑間的防效，以期篩選出適用于荊州市的抗性低和應(yīng)用效果較好的藥劑。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株 室內(nèi)毒力測(cè)定所需菌株為小麥赤霉病菌，在荊州市當(dāng)?shù)匦←湶≈晟喜杉⒎蛛x、純化獲得。

1.1.2 供試藥劑 430 g/L戊唑醇懸浮劑（拜耳作物科學(xué)中國(guó)有限公司）、25%咪鮮胺水乳劑（南京紅太陽(yáng)股份有限公司）、25%咪鮮胺乳油（江蘇輝豐生物農(nóng)業(yè)股份有限公司）、25%吡唑醚菌酯懸浮劑（河北興柏農(nóng)業(yè)科技有限公司）、25%氰烯菌酯懸浮劑（江蘇省農(nóng)藥研究所股份有限公司）、50%醚菌酯水分散粒劑（發(fā)事達(dá)南通化工有限公司）、250 g/L嘧菌酯懸浮劑（先正達(dá)南通作物保護(hù)有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 室內(nèi)毒力測(cè)定 采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定供試藥劑對(duì)小麥赤霉病菌的毒力，將各種供試藥劑用適量丙酮溶解，用加入1‰吐溫-80乳化劑的無(wú)菌水配成母液，按一定比例將其稀釋成6個(gè)濃度梯度的藥液。待滅菌鍋溫度降至恒溫60℃時(shí)，每個(gè)濃度梯度取5 mL藥液加入45 mL的PDA培養(yǎng)基中，充分搖勻后倒入3個(gè)直徑為75 mm的培養(yǎng)皿中，以加入等量梯度丙酮的PDA培養(yǎng)皿為對(duì)照組。待其冷卻后，用直徑為5 mm的打孔器在活化后的小麥赤霉病菌菌落邊緣取菌餅若干，迅速將菌餅以菌絲面向下接種到培養(yǎng)皿中央。封口并置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。先進(jìn)行初試，濃度為50 mg/L，后進(jìn)行有效抑制中濃度（EC50）測(cè)定，每濃度均重復(fù)3次。采用十字交叉法測(cè)量不同處理菌落生長(zhǎng)直徑，計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制率。通過(guò)抑制率幾率值和藥劑濃度對(duì)數(shù)值之間的線性回歸分析，得出藥劑毒力回歸方程及其對(duì)病原菌的有效抑制中濃度［8］。

菌絲生長(zhǎng)抑制率=［（對(duì)照組菌落直徑-5 mm）-（處理組菌落直徑-5 mm）］/（對(duì)照組菌落直徑-5mm）×100%

1.2.2 田間施藥試驗(yàn) 田間試驗(yàn)于2019年4—6月在湖北省荊州市荊州區(qū)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)區(qū)進(jìn)行，該地區(qū)歷年均發(fā)生較為嚴(yán)重的小麥赤霉病。小麥品種為荊州市常用品種鄭麥9023。試驗(yàn)區(qū)地勢(shì)平坦，土壤屬壤土，有機(jī)質(zhì)含量在1.3%左右，肥力較好，pH為7.2～7.8，栽培條件均勻一致。試驗(yàn)包括8個(gè)處理，每個(gè)處理4次重復(fù)，共計(jì)32個(gè)小區(qū)，采用隨機(jī)區(qū)組排列。試驗(yàn)地自北向南，長(zhǎng)60.0 m，每廂寬2.5 m，每個(gè)小區(qū)面積為30 m2，形狀為長(zhǎng)方形（6 m×5 m），處理間設(shè)置75 cm保護(hù)行。

本試驗(yàn)嚴(yán)格按照《農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則》（NY/T 1464.15—2007）執(zhí)行，連續(xù)施藥2次，第1次施藥在小麥揚(yáng)花初期（2019年4月15日），第2次施藥在初次施藥后第7天（2019年4月22日）。使用MATABISUPPER GREEN 16手動(dòng)背負(fù)式噴霧器，施藥當(dāng)天并未有降雨或者其他不良天氣。試驗(yàn)期間不施用其他殺菌劑、除草劑和殺蟲(chóng)劑，只進(jìn)行常規(guī)管理和基本的農(nóng)事操作。

1.2.3 調(diào)查方法 在第2次施藥后第10天調(diào)查各小區(qū)病級(jí)數(shù)，計(jì)算病穗率、病情指數(shù)和防治效果。利用DPS7.05軟件，采用鄧肯氏新復(fù)極差法，對(duì)區(qū)組間數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析。每小區(qū)對(duì)角線五點(diǎn)取樣，每點(diǎn)調(diào)查100穗，共500穗，以枯穗面積占全穗面積的百分比分級(jí)，記錄每小區(qū)500穗的發(fā)病級(jí)數(shù)及各級(jí)病穗數(shù)。病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：0級(jí)，全穗無(wú)病；1級(jí)，枯穗面積1/4以下；3級(jí)，枯穗面積1/4～1/2；5級(jí)，枯穗面積1/2～3/4；7級(jí)，枯穗面積3/4以上。

病穗率=（發(fā)病穗數(shù)/調(diào)查總穗數(shù)）×100%

病情指數(shù)=［∑（各級(jí)病穗數(shù)×相對(duì)級(jí)數(shù)值）×100］/（調(diào)查總穗數(shù)×7）

防治效果=［（對(duì)照區(qū)病情指數(shù)-處理處病情指數(shù)/對(duì)照區(qū)病情指數(shù)）］×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力

室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果（表1）表明，戊唑醇、咪鮮胺、吡唑醚菌酯、氰烯菌酯4種藥劑對(duì)小麥赤霉病菌菌絲生長(zhǎng)有較好的抑制效果，抑制中濃度EC50均在2.000 mg/L以下，其中，咪鮮胺的抑菌效果最好，EC50為0.028 mg/L，其次為戊唑醇、氰烯菌酯，EC50分別為0.144、0.427 mg/L，吡唑醚菌酯抑菌效果略低，EC50為1.554 mg/L。嘧菌酯、醚菌酯2種藥劑的毒力較弱，試驗(yàn)初試濃度為50.000 mg/L，其菌絲生長(zhǎng)抑制率均未達(dá)50%，故未測(cè)定其抑制中濃度。

表1 6種藥劑對(duì)小麥赤霉病病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

病原菌對(duì)藥劑敏感程度的高低與毒力回歸方程的斜率呈正比，即斜率越大其敏感性越高［9］，由此可判斷小麥赤霉病病菌對(duì)供試藥劑敏感性大小表現(xiàn)為氰烯菌酯＞戊唑醇＞咪鮮胺＞吡唑醚菌酯。

2.2 田間防效

在第2次施藥后第10天調(diào)查結(jié)果（表2）表明，供試7種藥劑對(duì)小麥赤霉病均表現(xiàn)出良好的防治效果，防效、病穗率分別為66.47%～88.60%、5.85%～20.55%，病情指數(shù)為1.62～4.77。與對(duì)照組數(shù)據(jù)相比較說(shuō)明病情發(fā)展受到明顯的控制，都可用于荊州市小麥赤霉病的防治。在7個(gè)處理之間，25%咪鮮胺水乳劑防效最高，達(dá)88.60%，顯著高于其他藥劑。其次是25%咪鮮胺乳油、25%吡唑醚菌酯懸浮劑、250 g/L嘧菌酯懸浮劑和430 g/L戊唑醇懸浮劑，防效分別為83.53%、82.13%、80.92%和77.71%，其中，250 g/L嘧菌酯懸浮劑與25%吡唑醚菌酯懸浮劑、25%咪鮮胺EC和430 g/L戊唑醇懸浮劑之間均無(wú)顯著差異。50%醚菌酯水分散粒劑和25%氰烯菌酯懸浮劑防效較差，分別為72.64%和66.47%，且均顯著低于其他5種藥劑。

表2 噴施不同藥劑對(duì)荊州市荊州區(qū)小麥赤霉病的田間防效

3 小結(jié)與討論

本試驗(yàn)測(cè)定了7種藥劑及其原藥對(duì)小麥赤霉病田間防效與室內(nèi)毒力，結(jié)果表明，7種藥劑對(duì)小麥赤霉病的防治均有較好的效果，其中，25%咪鮮胺水乳劑防效顯著高于其他處理，田間防效達(dá)88.60%，推薦田間使用。其次，25%咪鮮胺乳油、25%吡唑醚菌酯懸浮劑、250 g/L嘧菌酯懸浮劑的防效均在80%以上，建議輪換使用。嘧菌酯、醚菌酯和吡唑醚菌酯屬于甲氧基丙烯酸酯類(lèi)殺菌劑，對(duì)病原菌作用位點(diǎn)單一，容易產(chǎn)生抗藥性，建議與其他作用位點(diǎn)不同的殺菌劑輪換、復(fù)配使用，以免病原菌過(guò)快產(chǎn)生抗藥性［10］。室內(nèi)毒力測(cè)定發(fā)現(xiàn)，戊唑醇、咪鮮胺、吡唑醚菌酯、氰烯菌酯對(duì)菌絲生長(zhǎng)均表現(xiàn)出較高的抑制活性，而嘧菌酯與醚菌酯在室內(nèi)生測(cè)條件下對(duì)菌絲生長(zhǎng)抑制活性不高。已有研究表明植物病原菌可以誘導(dǎo)旁路氧化途徑來(lái)減小甲氧基丙烯酸酯類(lèi)殺菌劑的抑制作用。旁路氧化酶（AOX）在旁路氧化作用中起到關(guān)鍵作用，能使病原菌呼吸鏈繞過(guò)甲氧基丙烯酸酯類(lèi)殺菌劑的作用位點(diǎn)進(jìn)行電子傳遞［11，12］。在離體情況下，培養(yǎng)基平板上沒(méi)有抑制病原菌旁路氧化酶的物質(zhì)，甲氧基丙烯酸酯類(lèi)殺菌劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)抑制的活性有所降低，而植物體內(nèi)存在的（類(lèi)）黃酮類(lèi)物質(zhì)可以抑制旁路氧化酶（AOX）的活性［13］。同時(shí)嘧菌酯和醚菌酯具有保護(hù)、治療和鏟除作用，能提高植物的抗病性，延緩植株衰老，并且增加植物抗逆能力［14］。因此，嘧菌酯與醚菌酯在田間試驗(yàn)的效果要優(yōu)于室內(nèi)活性。

小麥赤霉病可防難治，應(yīng)以預(yù)防發(fā)病為主，時(shí)間宜在小麥抽穗揚(yáng)花期，一般在揚(yáng)花盛期第一次用藥，若當(dāng)年氣溫較高，則應(yīng)在齊穗期第一次用藥［15］。防治小麥赤霉病過(guò)程中長(zhǎng)期單一重復(fù)使用同一種藥劑容易使病原菌產(chǎn)生抗性［16］。在生產(chǎn)中建議根據(jù)咪鮮胺、吡唑醚菌酯、戊唑醇、嘧菌酯等藥劑的防治特點(diǎn)，輪換、復(fù)配使用，更加安全、有效地防治病害，延緩病原菌的抗藥性。