廣州市2018年至2020年無償獻(xiàn)血者的HTLV感染及流行情況調(diào)查

陳翀，單振剛，游冉冉

（廣州血液中心，廣東 廣州 510000）

人類嗜細(xì)胞病毒（human T-lymphocyte virus，HTLV）屬于一種致瘤性RNA病毒，可分為4型，其中HTLV-Ⅰ抗體及HTLV-Ⅱ抗體主要用于獻(xiàn)血者篩查。感染HTLV-Ⅰ型病毒后可導(dǎo)致成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤等疾病，使機體外周血中異常T細(xì)胞比例升高，并伴多種器官系統(tǒng)的損害，治療效果及預(yù)后較差[1]。研究[2]發(fā)現(xiàn)，感染HTLV-Ⅰ型病毒易發(fā)生支氣管擴張，嚴(yán)重時可危及患者生命安全。感染HTLV-Ⅱ病毒后可導(dǎo)致T多毛細(xì)胞/巨粒細(xì)胞白血病，可損害中樞神經(jīng)系統(tǒng)，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。HTLV主要經(jīng)母嬰及血液傳播，其中血液傳播的常見途徑為輸血、器官移植等途徑。輸血是我國臨床上補充血容量的主要方式，提示輸血存在感染HTLV的風(fēng)險，因此，需嚴(yán)格管控血制品的安全性。目前，尚無治療感染HTLV病毒的疫苗或特效藥等，一旦感染，后果難以想象。為保障血液制品的安全性[3-4]，世界衛(wèi)生組織建議篩查獻(xiàn)血者HTLV感染及流行的情況，以便及時阻斷通過血液制品傳染疾病，同時可制定針對性的血液管理，加強血液管理的薄弱環(huán)節(jié)。本研究旨在探討2018年至2020年無償獻(xiàn)血者HTLV感染及流行情況調(diào)查，旨在為臨床提供參考依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取廣州市2018年1月至2020年9月無償獻(xiàn)血者699 081例作為研究對象，其中男461 799例，女237 282例；年齡18～60歲。共收集699 081例血樣標(biāo)本，其中初篩陽性248例，確診陽性8例。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)。

1.2 方法 所采血液標(biāo)本均經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附法測定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）初篩，若結(jié)果顯示ELISA反應(yīng)性的血樣標(biāo)本，均采用電化學(xué)發(fā)光法試劑盒檢測HTLV抗體，若結(jié)果陽性，再使用確診實驗蛋白印跡法（western blot，WB）和/或?qū)崟r熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（real time polymerase chain reaction，RT-PCR）檢測HTLV抗體。

1.3 檢測 收集所有無償獻(xiàn)血者的血樣標(biāo)本靜置于常溫空氣中30 min，置入4 000 r/min KUBOTA8420離心機（日本久保田）中高速離心10 min，置于-25℃冰箱中待測。采用ML-STAR全自動加樣儀（瑞士哈密頓公司）、FAME全自動酶標(biāo)分析系統(tǒng)（瑞士哈密頓公司）檢測血清HTLV，采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法，試劑盒由北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司提供。ELISA顯示反應(yīng)性的血樣標(biāo)本采用Roche Cobas 601全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（瑞士Roche），試劑盒由羅氏診斷產(chǎn)品（上海）有限公司提供。采用全自動混樣儀（HAMILTON Microlab STAR IVD，瑞士HAMILTON），核酸提取儀（cobasAmpliPrep）與分析儀（cobasTaqMan）檢測ELISA及電化學(xué)發(fā)光法均顯示反應(yīng)性的血樣標(biāo)本，試劑盒由北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司提供。采用MP Diagnostics HTLV BLOT 2.4 Western Blot Assay（美國MP）、MagNA Pure LC DNA Isolation Kit-Laege Volume（瑞士Roche）、ABI7500 fast熒光定量PCR儀（美國Applied Biosystems）及羅氏MagNAPure LC 2.0 DNA自動提取儀（瑞士Roche）檢測ELISA及電化學(xué)發(fā)光法均顯示反應(yīng)性的血樣標(biāo)本，所有指標(biāo)檢測均嚴(yán)格按照操作說明書進(jìn)行。判斷標(biāo)準(zhǔn)，①初篩陽性：ELISA顯示反應(yīng)性；②確診陽性：經(jīng)WB和RT-PCR顯示陽性。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較2018年至2020年無償獻(xiàn)血者HTLV的初篩陽性率及確診陽性率；②比較2018年至2020年無償獻(xiàn)血者HTLV初篩及確診情況；③比較2018年至2020年無償獻(xiàn)血者HTLV陽性感染者的情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2018年至2020年無償獻(xiàn)血者HTLV的初篩反應(yīng)性率及確診陽性率比較 2018年至2020年無償獻(xiàn)血者HTLV初篩反應(yīng)性率及陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

表1 2018年至2020年無償獻(xiàn)血者HTLV的感染情況比較

2.2 2018年至2020年無償獻(xiàn)血者HTLV初篩及確診情況比較 無償獻(xiàn)血者HTLV ELISA反應(yīng)性為248例，占比3.55/1萬，HTLV陽性為12例，占比0.17/1萬，見表2。

表2 2018年至2020年無償獻(xiàn)血者HTLV初篩及確診情況比較[n（1/萬）]

2.3 2018年至2020年無償獻(xiàn)血者HTLV陽性感染者的情況比較 HTLV陽性獻(xiàn)血者主要以男性（11例，91.67%）為主，HTLV陽性獻(xiàn)血者主要以36～45歲（5例，41.66%）年齡段為主，HTLV陽性獻(xiàn)血者主要以首次獻(xiàn)血人群（9例，75.00%）為主，HTLV陽性獻(xiàn)血者主要以廣東籍（7例，58.33%）為主，見表3。

表3 2018年至2020年無償獻(xiàn)血者HTLV陽性感染者的情況比較

3 討論

HTLV屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒，具備較高的遺傳穩(wěn)定性，與其復(fù)制方式密切相關(guān)。感染HTLV不通過病毒本身復(fù)制，而是由感染細(xì)胞的克隆增殖所致。多項研究[5-6]發(fā)現(xiàn)，HTLV的流行情況與地區(qū)密切相關(guān)，如日本2006年至2007年首次獻(xiàn)血者中HTLV-Ⅰ陽性率為31.7/1萬；伊朗在2009年至2013年HTLV陽性率為9.87/1萬，首次獻(xiàn)血者中HTLV陽性率為29/1萬，固定獻(xiàn)血者中HTLV陽性率為0.1/1萬；美國2000年至2009年獻(xiàn)血者中HTLV陽性率為1.97/1萬，2011年至2013年獻(xiàn)血者中HTLV陽性率為0.34/1萬。本市早于2019年為廣州市獻(xiàn)血者HTLV流行概況及基因分型展開報道[7]，證實本市屬于低流行地區(qū)，暫時發(fā)現(xiàn)HTLV-Ⅰ基因型的感染，并未發(fā)現(xiàn)HTLV-Ⅱ基因型的感染。目前，為保障血液制品的安全性，日本、中國香港及臺灣地區(qū)已將獻(xiàn)血群體檢測血清學(xué)抗-HTLV-Ⅰ、抗-HTLV-Ⅱ列為常規(guī)項目，避免經(jīng)血液傳播途徑感染HTLV。

目前，全球均未攻克HTLV預(yù)防性疫苗及特效藥的研制。從病毒本身感染的特點考慮，存在自機體感染至產(chǎn)生抗體需51 d的窗口期，從而限制常規(guī)篩查獻(xiàn)血群體的血清學(xué)抗-HTLV的準(zhǔn)確度。陳海洋[8]等報道顯示，HTLV病毒存在于淋巴細(xì)胞中，血清中很少存在HTLV，進(jìn)而對血液制品應(yīng)用白細(xì)胞過濾，濾白后血制品的病毒載量低于感染所需的病毒載量，且血液制品保存＞14 d，極大降低感染HTLV的風(fēng)險。為提高血液制品的安全性，可通過加強首次獻(xiàn)血者的檢測環(huán)節(jié)，及制定針對性群體招募策略，同時提倡臨床輸血時采用濾白血制品，一定程度上可降低感染HTLV的風(fēng)險性。本研究結(jié)果顯示，2018年至2020年無償獻(xiàn)血者HTLV初篩反應(yīng)性率及陽性率無明顯上升趨勢，HTLV感染呈低流行趨勢，本市流行情況與安慶[8]、東莞[9]、石家莊[10]等地區(qū)一致，表明采用血制品濾白等措施可降低HTLV感染的風(fēng)險；HTLV陽性獻(xiàn)血者主要以男性為主，以36～45歲年齡段為主，考慮與本市HTLV感染率低，獻(xiàn)血人數(shù)過多等特點有關(guān)；HTLV陽性者以首次獻(xiàn)血人群為主，表明嚴(yán)格管控首次獻(xiàn)血人群的篩查環(huán)節(jié)至關(guān)重要。

綜上所述，廣州市2018年至2020年無償獻(xiàn)血者HTLV感染率無明顯上升趨勢，呈低流行趨勢，嚴(yán)格篩查首次獻(xiàn)血者的HTLV抗體，有助于降低血液傳播途徑HTLV感染的風(fēng)險。