ICP-MS測定噴昔洛韋中5種雜質元素

周云婷，朱曉玲，王春琴，李俊行(.新昌縣食品藥品檢驗檢測中心，浙江 新昌 500；.浙江醫藥股份有限公司新昌制藥廠，浙江 新昌 500；.浙江省食品藥品檢驗研究院，浙江 杭州 005)

0 引言

噴昔洛韋(penciclovir，PCV)是一種全合成的第四代無環鳥苷類抗病毒藥物，為伐昔洛韋的活性代謝物，臨床多用于帶狀皰疹患者，對HSV-1、HSV-2、VzV和E-B病毒有抑制活性，而對CMV病毒的活性較弱。與阿昔洛韋相比，其抗病毒效果顯著，是一種抗病毒譜較廣的藥物[1-6]。通過合成工藝分析，本品潛在的元素雜質有鐵、鎳、銅、鋅、鉛，元素雜質具有一定的潛在毒性[7]，根據ICH Q3D元素雜質技術指導原則，需要對噴昔洛韋中5種元素雜質(鐵、鎳、銅、鋅、鉛)進行質量控制。電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)法具有同時測定多種元素的優勢，本文采用ICP-MS法建立噴昔洛韋中5種元素雜質(鐵、鎳、銅、鋅、鉛)同時測定的定量方法[8-10]。

1 儀器與試藥

Agilent7700X型電感耦合等離子體質譜儀，配置ASX-500型自動進樣器(安捷倫科技有限公司)；MARS6型微波消解儀(CEM公司)；mettler toledo XS205DU型電子分析天平(梅特勒托利多儀器有限公司)。

噴昔洛韋(浙江醫藥股份有限公司制備，批號為150901、150902、150903)；元素標準溶液、內標標準溶液(安捷倫科技有限公司)；硝酸(Merck公司)；水為超純水。

2 方法與結果

2.1 儀器參數

積分時間為0.1～0.3 sec per point；峰模式為Full Quant(3)；重復次數為3次；檢測模式為He mode；蠕動泵轉速為0.1 rps；內標元素為45Sc，72Ge，115In，175Lu，209Bi；定量元素為56Fe，60Ni，63Cu，66Zn，208Pb。

2.2 溶液配制

稀釋劑：移取30 mL HNO3，加水稀釋至1 000 mL，混勻；

內標溶液：移取100 mg/L的內標標準溶液25 μL，用稀釋劑稀釋至25 mL，混勻；

空白溶液：取500 μL內標溶液，用稀釋劑稀釋至50 mL，混勻；

標準曲線溶液：分別精確移取一定量元素標準溶液于10 mL量瓶中，加入100 μL內標溶液和適量稀釋劑稀釋至刻度，混勻(Fe、Ni、Cu、Zn、Pb元素的線性濃度分別為2、10、20、40、80、100 ng/mL)。

報告限度溶液：移取20 μL元素標準溶液于10 mL量瓶中，加入100 μL內標溶液和適量稀釋劑稀釋至刻度，混勻(Fe、Ni、Cu、Zn、Pb濃度均為2 ng/mL)。

供試品溶液：稱取供試品約250 mg于消解罐中，加8 mL硝酸，按消解程序(100 ℃維持30 min，經過30 min升溫至150 ℃，保持30 min；壓力為5.5 MPa；功率為1 000 W)進行操作后，轉移剩余溶液至25 mL容量瓶中，加250 μL內標溶液，并用稀釋劑稀釋定容，搖勻。

2.3 專屬性試驗

分別取空白溶液和報告限度溶液，依法進樣測定。空白溶液中各元素的計數值(CPS)不大于報告限度溶液中各元素計數值的15%可認為無干擾，結果(如表1所示)表明，空白溶液的本底對各元素的檢測無干擾。

表1 專屬性數據表

2.4 線性試驗

分別取各標準曲線溶液進樣測定，計算線性方程和相關系數，結果(如表2所示)表明，相關系數均大于0.99，每個元素雜質在2～100 ng/mL范圍內線性關系良好。

表2 線性數據表

2.5 檢測靈敏度試驗(檢測限、定量限和報告限)

取空白溶液，依法進樣測定，重復10次。每個元素濃度3倍標準偏差(3δ)所對應的濃度計算為檢測限；每個元素濃度10倍標準偏差(10δ)所對應的濃度計算為定量限。取報告限度溶液，依法進樣測定，重復6次，每個元素測試結果的相對標準偏差(RSD)應不大于20%。結果(如表3所示)表明，本方法具有較好的檢測靈敏度，鐵、鎳、銅、鋅、鉛的檢測限分別為0.142、0.009、0.025、0.024、0.004 ng/mL，鐵、鎳、銅、鋅、鉛的定量限分別為0.474、0.031、0.084、0.079、0.014 ng/mL，可以把2 ng/mL設定為各元素的報告限度。

表3 檢測靈敏度數據表

2.6 精密度試驗

分別在供試品中加入40 ng/mL的鐵和10 ng/mL的鎳、銅、鋅、鉛，平行操作6次，依法處理并測定，結果(如表4所示)表明，本方法平行操作6次的RSD在1%～2%之間，表明本方法具有較好的精密度。

表4 精密度數據表

2.7 加樣回收率試驗

分別在供試品中加入10 ng/mL、40 ng/mL和80 ng/mL的鐵和2 ng/mL、10 ng/mL和20 ng/mL的鎳、銅、鋅、鉛，按照供試品溶液的制備方法依法處理并進樣測定，計算各元素的加樣回收率，結果(如表5所示)表明，本方法各元素的加樣回收率在97%到106%之間，表明本方法具有較好的準確度。

表5 加樣回收率數據表

2.8 樣品測定

取噴昔洛韋樣品3批，依法處理并測定，結果(如表6所示)均未檢出。

表6 樣品測定數據表 單位：ng/mL

3 結語

元素雜質的檢測，也可采用原子分光光度法或者原子吸收法建立方法，但每次只能檢測一種元素雜質，工作效率較低。本實驗應用ICP-MS技術手段，通過較全面的方法學驗證，建立了同時測定噴昔洛韋中5種元素雜質的方法，驗證結果表明，每個元素雜質在2～100 ng/mL范圍內線性關系良好，三個濃度加樣回收率在97%到106%之間。鐵、鎳、銅、鋅、鉛的檢測限分別為0.142、0.009、0.025、0.024、0.004 ng/mL。該方法具有良好的專屬性、檢測靈敏度、精密度、線性和準確度，可用于噴昔洛韋中5種元素雜質(鐵、鎳、銅、鋅、鉛)的控制。