Nupr1、HE4及AFP表達與卵巢癌病理參數、預后生存的關系

陳燕萍 陳婧 洪麗玲 陳慧

作者單位：中國人民解放軍聯勤保障部隊第九○九醫院婦產科，福建，漳州363000

卵巢癌是女性生殖系統常見的惡性腫瘤，近年來隨著研究的深入，卵巢惡性腫瘤的基礎研究和臨床診治方面均取得很大的進展，但其5年生存率仍未見明顯提高［1］。腫瘤的轉移和復發在卵巢癌發展中起著至關重要的作用。核蛋白1（nuclear protein 1，Nupr1）是一種高堿性、多功能的小分子蛋白質，參與促進細胞生長和再生的應激反應，多項研究均檢測出其在惡性腫瘤患者中存在高表達現象［2］。人附睪蛋白4（human epidiymis protein 4，HE4）和胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）作為常見的腫瘤相關標志物，在卵巢癌的診治和預后生存評估中的作用引發熱議［3］。本研究就Nupr1、HE4 及AFP 表達與卵巢癌病理參數、預后生存生存的關系進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2018年12月本院收治的90例卵巢癌和80 例卵巢良性病變患者，分別作為卵巢癌組和良性病變組。納入標準：①卵巢癌組滿足卵巢癌診療標準［4］；②良性病變組滿足卵巢良性病變診療標準［5］；③臨床及隨訪資料完整者。排除標準：①伴有嚴重的免疫系統疾患、血液循環系統障礙以及結締組織疾病者；②既往存在生殖系統手術史者；③入組前存在子宮放化療史者。兩組一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05），見表1。本研究經醫院倫理委員會批準，所有研究對象均知情同意。

表1 兩組一般資料比較（±s）Table 1 Comparison of general data between 2 groups（±s）

表1 兩組一般資料比較（±s）Table 1 Comparison of general data between 2 groups（±s）

組別卵巢癌組良性病變組t 值P 值n 90 80--平均年齡（歲）54.16±4.25 54.30±4.33 0.212 0.832體質指數（kg/㎡）22.10±2.54 22.16±2.55 0.153 0.878孕次（次）2.25±1.03 2.28±1.01 0.191 0.849產次（次）1.57±0.49 1.59±0.41 0.287 0.775

1.2 檢測方法

1.2.1 Nupr1 蛋白檢測

Nupr1 蛋白檢測試劑盒購自北京中杉生物技術公司，操作嚴格按照試劑盒說明書進行。Nupr1 蛋白在乳腺癌中顯示胞漿、胞核著棕黃色顆粒；采用Volm 雙評分法進行判定，在染色均勻的腫瘤區，選取5 個高倍鏡視野（×400）：按陽性細胞百分率（A 值）評分：1 分，2 分，3 分；按染色強度（B 值）評分：不著色為0 分，淺棕黃色為1 分，棕黃色為2 分，棕褐色為3分。綜合染色陽性細胞數與染色強度判斷結果：陰性（-）：0 分，弱陽性（+）：1～2 分，中度陽性（++）：3～4分，強陽性（+++）：5～6 分；兩種計分的乘積為每例的加權分數，加權分數為0為陰性，其余均為陽性［5］。

1.2.2 HE4 及AFP 檢測

采用電化學發光法檢測，儀器選擇Elec?sys2010 羅氏自動電化學發光分析儀，試劑盒購自上海羅氏診斷產品有限公司，嚴格按照說明書進行操作。血清HE4 陽性標準為>140 pmol/mL，AFP陽性標準為>55 U/L［6?7］。

1.3 隨訪方法

所有卵巢癌病例主要是住院或門診復查，小部分采用電話方式隨訪觀察。隨訪時間為2年，隨訪截止于死亡或到2020年12月31日。

1.4 統計學分析

采用SPSS 18.0 軟件進行統計分析，計量資料以（）表示，采用t檢驗；計數資料以n（%）表示，采用χ2檢驗，影響卵巢癌患者預后生存的相關因素采用非條件單因素和多因素Logistic 回歸模型分析，以P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組Nupr1、HE4 及AFP 表達比較

卵巢癌組Nupr1、HE4及AFP陽性表達率均高于良性病變組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

表2 2 組Nupr1、HE4 及AFP 表達比較［n（%）］Table 2 Comparison of expression of nupr1，HE4 and AFP in two groups［n（%）］

2.2 不同臨床病理特征患者Nupr1、HE4 及AFP表達情況

FIGO 分期：Ⅲ+Ⅳ期、分化程度：低分化者Nupr1、HE4 及AFP 陽性表達率均高于FIGO 分期：Ⅰ+Ⅱ期、分化程度：中高分化者，差異有統計學意義（P<0.05）。見表3。

表3 不同臨床病理特征患者Nupr1、HE4 及AFP 表達情況［n（%）］Table 3 expression of nupr1，HE4 and AFP in patients with different clinicopathological characteristics［n（%）］

2.3 96 例卵巢癌患者預后生存情況

截至隨訪2年結束，90 例卵巢癌患者死亡51例，存活39 例，存活率為43.33%。

2.4 影響卵巢癌患者預后生存單因素分析

經非條件單因素Logistic 回歸模型分析，生存組與死亡組年齡、病理類型、有無腹水者比較差異無統計學意義（P>0.05），兩組FIGO 分期、組織分化程度、淋巴轉移情況及Nupr1、HE4 和AFP 陽性表達比較差具有統計學意義（P<0.05）。見表4。

表4 影響卵巢癌患者預后生存單因素分析［n（%）］Table 4 single factor analysis on prognosis of patients with ovarian cancer［n（%）］

2.5 影響卵巢癌患者預后生存多因素分析

經非條件多因素Logistic 回歸模型分析，存在淋巴轉移、Nupr1、HE4 和AFP 陽性為影響卵巢患者預后的獨立危險因素（P<0.05）。見表5。

表5 影響卵巢癌患者預后生存多因素分析Table 5 multivariate analysis of prognostic factors in patients with ovarian cancer

3 討論

中國最新卵巢癌發病與死亡數據分析顯示，卵巢癌發病率約為6.47/10 萬，死亡率約為2.74/10萬［8］。本研究中90 例卵巢癌患者截止隨訪2年結束，生存率僅為43.33%，如何提高卵巢癌患者生存時間已成為臨床關注焦點。流行病學研究表明，婦科炎癥、多囊卵巢綜合征和子宮內膜異位癥是卵巢癌發生的危險因素［9］。

Nupr1 為一種廣泛分布于體內的應激誘導蛋白，具有轉錄活性，可通過參與不同的胞內信號途徑發揮不同的功能，并且已有大量研究證實其在多種腫瘤的發生、發展和轉移過程起重要作用［10］。不同類型的惡性腫瘤細胞，Nupr1 調控細胞增殖能力有所不同。Patricia 等［11］研究發現，Nupr1 可以在人類乳腺癌發展的早期發揮促進腫瘤生長的作用，且與乳腺癌轉移及預后生存不良相關，這提示Nupr1可能是促進腫瘤細胞向遠處轉移生長的關鍵蛋白。本研究結果提示Nupr1 在卵巢癌中具有促腫瘤作用，其可能是腫瘤治療的潛在靶點。

HE4 是B7 家族成員，是一種與附睪和生殖特異度相關的蛋白，也是近年發現的新型卵巢癌標志物［12］。一般情況下，血清HE4 在正常成人中的表達水平較低，惡性腫瘤由于基因轉錄調控發生異常，沉默基因異常活躍，導致早期沉默的HE4基因開始轉錄和翻譯，表現為其表達狀態的異常［13］。AFP 是胚胎時期由卵黃囊產生的一種特殊糖蛋白，是胎兒血清最常見的組成成分。當卵巢癌發生時，AFP基因被腫瘤細胞激活，血清內AFP 濃度升高，其體內水平含量的高低與腫瘤生物學特性、分化程度及病情的發展程度均具有一定的相關性。有關學者認為，AFP 可作為診斷卵巢癌主要的特異性生化指標。本研究結果Logistic 回歸模型分析提示Nupr1、HE4 和AFP 在卵巢癌中過表達可能參與癌細胞轉移和侵襲，促進卵巢癌進展。

綜上所述，Nupr1、HE4 及AFP 在卵巢癌患者中呈高表達狀態，三者異常表達與患者臨床病理特征及預后生存有密切關系，可作為預測患者預后生存的有效指標。