拜城油雞生產(chǎn)性能及遺傳多樣性分析

楊速，操勇清，李海英，盧立志，李國勤，曾濤，陳黎，黃希東，沈軍達，陶爭榮，田勇*

(1.浙江省農(nóng)業(yè)科學院 畜牧獸醫(yī)研究所，浙江 杭州 310021；2.浙江師范大學 化學與生命科學學院，浙江 金華 321004；3.甘肅農(nóng)業(yè)大學 動物科學技術學院，甘肅 蘭州 730070；4.新疆農(nóng)業(yè)大學 動物科學學院，新疆 烏魯木齊 830052；5.拜城縣牧村拜城油雞原種保護場，新疆 拜城 842314)

我國地大物博，不同的自然環(huán)境、社會經(jīng)濟條件和地區(qū)文化馴化出各具特色的地方雞品種，2012年《中國畜禽遺傳資源志·家禽志》中收集了189個家禽品種，其中有116個雞品種，農(nóng)業(yè)部最新公布的國家保護名錄中包含28個雞品種[1]。眾多的雞品種滿足了人們多樣的生活需要，如雞肉、雞蛋的營養(yǎng)價值，特殊品種的藥用價值，雞毛制品的實用價值以及羽毛和斗雞的觀賞價值。但隨著人們對畜禽產(chǎn)品需求的增加，一味地提高生產(chǎn)效益，引入外來品種(如來航雞、星布羅肉雞等[2])與本地雞種雜交，導致遺傳資源的污染，甚至一些地方品種的滅絕[3]。禽類遺傳資源是不可再生的寶貴資源，是家禽業(yè)可持續(xù)發(fā)展的根基。國家和地方政府正在積極出臺禽類遺傳資源的保護政策，對我國地方雞品種種質特性和遺傳資源的評估和保護十分重要。

拜城油雞原產(chǎn)于新疆阿克蘇地區(qū)，是我國珍品油雞禽品種資源之一，為肉蛋兼用型。其具有肉味鮮美、骨細肉多、抗病力強等諸多優(yōu)點。因皮膚和肌肉間有一層很薄的脂肪且散發(fā)出特殊的香味而得名油雞[4]。此外，雞皮中還含有多種脂質成分，包括磷脂、鞘磷脂、酰脂等，能夠預防多種心腦血管疾病，促進新陳代謝[5-6]。本研究對300日齡拜城油雞體重、體尺和蛋品質進行測定，同時采用微衛(wèi)星標記進行遺傳學分析，擬從種質特性和遺傳多樣性角度對拜城油雞進行評估，為拜城油雞的保種育種提供參考資料和科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

拜城油雞及雞蛋由拜城縣牧村拜城油雞原種保護場提供。

1.2 體尺性狀測定

隨機選取300日齡拜城油雞公母各30只，測量指標包括體重、體斜長、龍骨長、胸寬、胸深、盆骨寬、脛長和脛圍8項體尺指標。以上所有指標均參照NY/T 823—2004《家禽生產(chǎn)性能名詞術語和度量統(tǒng)計方法》[7]進行。

1.3 蛋品質測定

取300日齡拜城油雞雞蛋45枚，測量其蛋重、蛋黃色澤、蛋殼強度、蛋形指數(shù)、哈氏單位和蛋殼厚度6項指標。測量儀器包括多功能蛋品質測定儀、蛋殼強度測定儀、蛋殼厚度測定儀和游標卡尺。

1.4 PCR程序與測序

1.4.1 血樣采集

隨機選取100只拜城油雞進行翅下靜脈采血，用含乙二胺四乙酸(EDTA)真空采血管進行封裝，置于-20 ℃保存，用于DNA提取。

1.4.2 DNA提取與檢測

使用杭州新景公司生物試劑開發(fā)有限公司的全血DNA小量提取試劑盒進行DNA提取，使用紫外分光光度計檢測DNA純度(D260/280)和濃度。

1.4.3 引物設計與PCR擴增

使用Premier 5.0進行用于基因多態(tài)性檢測的引物設計或對相關文獻中引物進行篩選，優(yōu)先選擇多態(tài)性高、核心序列重復次數(shù)多的位點，部分引物序列參考黃玲玲的研究[8]。最終使用28對引物進行擴增(表1)。引物交由上海捷瑞生物工程有限公司合成。

表1 28個微衛(wèi)星位點PCR擴增引物

PCR擴增程序參考操勇清等[9]的方法，PCR循環(huán)條件：預變性3 mim，95 ℃；變性20 s，94 ℃，退火20 s，58 ℃，延伸40 s，72 ℃，35個循環(huán)；修復延伸5 mim，72 ℃。采用ABI 3730XL DNA分析儀對含熒光標記的PCR產(chǎn)物進行毛細管電泳，參照劉雅麗等[10]的方法進行。PCR產(chǎn)物由上海杰瑞生物工程有限公司進行DNA直接測序。

1.5 統(tǒng)計與分析

采用Excel對拜城油雞體尺和蛋品質數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計整理，IBM SPSS 21獨立樣本T檢驗進行體尺差異比較，結果采用平均數(shù)±標準差表示。采用POPGENE 1.32對多態(tài)位點進行有效等位基因和雜合度計算，LittlePrograme 0.6計算多態(tài)信息含量。

2 結果與分析

2.1 體尺

拜城油雞公雞的體重、體斜長、龍骨長、胸寬、胸深、盆骨寬、脛長和脛圍8項指標均顯著高于母雞，公雞體重比母雞高24.35%，在體型上，公雞與母雞存在明顯差異(表2)。

表2 300日齡拜城油雞體尺測定

2.2 蛋品質

本研究測定了拜城油雞蛋重、蛋黃色澤、蛋殼強度、蛋形指數(shù)、哈氏單位和蛋殼厚度6項蛋品質指標(表3)。

表3 拜城油雞及其他雞蛋品質

2.3 遺傳參數(shù)分析

本試驗利用微衛(wèi)星標記位點對拜城油雞進行了多個遺傳多樣性參數(shù)統(tǒng)計，28微衛(wèi)星位點中，ADL136位點有效等位基因、雜合度和多態(tài)信息含量均最高，分別為8.12、0.83和0.81(表4)。除上述3個指標均為0的MCW294位點外，ADL201位點多態(tài)性最低，有效等位基因、雜合度和多態(tài)信息含量分別為0.96、0.06和0.05。28個微衛(wèi)星位點中，23個位點為高度多態(tài)位點(多態(tài)信息含量>0.5)，4個位點為中度多態(tài)位點(多態(tài)信息含量0.25～0.5)，1個位點未顯示出多態(tài)性，平均多態(tài)信息含量為0.57，整體表現(xiàn)為高度多態(tài)。

表4 拜城油雞各基因位點遺傳多態(tài)性

3 小結與結論

3.1 體重體尺

體重體尺是家禽育種過程中重要的參考指標，不僅可以衡量家禽的生長發(fā)育程度和群體的均勻度[14]，還直接或間接影響家禽的生產(chǎn)性能[15]。本試驗表明，拜城油雞的體重體尺存在性別差異，公雞體重體尺8項指標均顯著高于母雞。鄧雨英等[16]、李俊營等[17]分別對黃麻羽雪峰烏骨雞和黃山黑雞進行體重體尺測定，同樣表明公雞各項指標均高于母雞。說明公雞更具生長優(yōu)勢，在實際生產(chǎn)中應將公母區(qū)別飼喂，充分發(fā)揮公雞的生長潛能。拜城油雞的體重高于藏雞[18]、絲羽烏骨雞[19]、烏蒙鳳雞[20]，與宮廷黃雞[12]相當，但小于浦東雞[21]，同時體尺各項指標也有不同程度的差異，而不同品種間體型外貌差異的決定性因素是遺傳基礎。整體而言，拜城油雞屬于體型較大的雞品種。

3.2 蛋品質

禽類蛋品質是一個綜合指標，不僅影響?zhàn)B禽業(yè)的經(jīng)濟效益，也與禽類繁殖性能密切相關[22]。蛋品質主要包括蛋重、蛋黃色澤、蛋殼強度、蛋形指數(shù)、哈氏單位、蛋殼厚度等指標。蛋重是消費者在挑選雞蛋過程中最直觀的指標，有研究表明，蛋重對繁殖力和總孵化率有顯著影響[23]，且在一定范圍內，蛋重與孵化率呈正相關[24]。拜城油雞蛋重52.09 g，高于南丹瑤雞和廣西麻雞[25]，但低于宮廷黃雞和羅曼雞。楊寧[26]研究表明，蛋形指數(shù)最好為1.35，本研究顯示，拜城油雞的蛋形指數(shù)與該值接近。蛋殼強度與蛋殼厚度會影響蛋在運輸加工過程中的破損率，拜城油雞蛋殼強度和厚度大于白來航雞、宮廷黃雞和羅曼雞，可以保證在運輸加工過程中有較低的破損率。哈氏單位是衡量雞蛋新鮮程度的指標，哈氏單位越高表示蛋越新鮮。本研究中，拜城油雞哈氏單位為55.32，明顯低于白來航雞、宮廷黃雞和羅曼雞，這可能是檢測前存放時間過長的緣故。蛋黃顏色是影響消費者選擇偏好的性狀之一，顏色越深越受消費者青睞。研究表明，蛋黃顏色與母雞不同產(chǎn)蛋階段有關[27]。拜城油雞蛋黃顏色為9.28，蛋黃顏色較深，符合消費者消費偏好。

3.3 遺傳多樣性

群體的遺傳多樣性是指群體內所有個體的遺傳變異總和。一個群體的遺傳多樣性越豐富，表明該群體適應環(huán)境變化的能力越強，即進化的潛力越大[28]。有效等位基因是反映群體遺傳變異大小的指標，能較好地反映群體中起作用的基因數(shù)，其值越大則遺傳多樣性越高。雜合度即基因的多樣性，指某個位點雜合子所占的比例[29]。多態(tài)信息含量可直接反映位點的多態(tài)性，多態(tài)信息含量>0.5的位點為高度多態(tài)信息位點，0.25<多態(tài)信息含量<0.5的位點為中度多態(tài)信息位點，多態(tài)信息含量<0.25的位點為低度多態(tài)信息位點。莫國東等[30]對廣西三黃雞進行微衛(wèi)星標記分析，共檢測到144個等位基因，平均有效等位基因數(shù)為3.58，18個位點中15個為高度多態(tài)位點，3個為中度多態(tài)位點，平均多態(tài)信息為0.639 3。曲魯江等[31]利用微衛(wèi)星對我國78個雞品種進行遺傳多樣性分析，平均多態(tài)信息含量為0.573，其中雙蓮雞最高，為0.633，狼山雞最低，為0.456。吾買爾江·艾孜木等[32]對拜城油雞的遺傳多樣性進行分析，結果顯示多態(tài)信息含量為0.722，高于本研究結果，原因可能是選取的微衛(wèi)星位點不同或者試驗雞群存在差異，但均為高度多信息位點，表明拜城油雞具有豐富的遺傳多樣性。

拜城油雞為肉蛋兼用型，其肉味鮮美、骨細肉多。本試驗對拜城油雞體重體尺和蛋品質進行測定分析，同時采用微衛(wèi)星標記進行遺傳多樣性分析，為拜城油雞種質資源的開發(fā)利用和保護提供參考資料。