合肥地區(qū)兒童呼吸道感染病原體情況分析

王楊燕，馬筱玲

呼吸道感染是兒童常見的疾病，是5歲以下兒童死亡的第二大原因，尤其在秋冬季節(jié)高發(fā)。兒童呼吸道感染病情發(fā)展迅速且容易復(fù)發(fā)。呼吸道感染病原體的早期診斷有利于精確治療，避免過度使用抗菌藥物，同時(shí)可以早期隔離病人，減少病原體的傳播。為了解合肥地區(qū)兒童呼吸道感染病原體的分布特征及流行特點(diǎn)，本研究應(yīng)用多重PCR技術(shù)對(duì)257份兒童呼吸道標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018年9—12月安徽省立醫(yī)院兒內(nèi)科因呼吸道感染住院病人的咽拭子或者肺泡灌洗液標(biāo)本257例，男女比例為1.3∶1，按年齡分組：≤1歲組90例，＞1～2歲組88例，＞3～5歲組51例，＞6～15歲組28例。

1.2 儀器與試劑

全自動(dòng)核酸提取儀Smart LabAssist-16/Smart LabAssist-32（備案號(hào)：浙甬械備20150246號(hào)）及13種呼吸道病原體多重檢測(cè)試劑盒（PCR毛細(xì)電泳片段分析法）由浙江海爾施基因科技有限公司提供。采用ABI 3500Dx（美國(guó)ABI公司）測(cè)量毛細(xì)電泳熒光信號(hào)強(qiáng)度。

1.3 方法

病兒入院24 h內(nèi)采集咽拭子或肺泡灌洗液樣品（不少于500μL）進(jìn)行核酸自動(dòng)提取。提取的核酸首先進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增，采用ABI 3500Dx進(jìn)行毛細(xì)電泳儀熒光信號(hào)強(qiáng)度的測(cè)量，最后進(jìn)行毛細(xì)電泳分離每個(gè)樣品中的PCR產(chǎn)物。

檢測(cè)的病原體包括：呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、甲型流感病毒（FluA）、甲型流感病毒H1N1、甲型流感病毒H3N2、乙型流感病毒（FluB）、副流感病毒（HPIV）、衣原體（Ch）、鼻病毒（HRV）、博卡病毒（BOCA）、偏肺病毒（HMPV）、冠狀病毒（HcoV）和肺炎支原體（MP）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。組間對(duì)比采用Fisher確切概率法和

χ

檢驗(yàn)，以

P

＜0.05作為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 呼吸道病原體分布及陽(yáng)性率

257例標(biāo)本中，170例檢出病原體，陽(yáng)性檢出率達(dá)66.1%（170/257），87例標(biāo)本未檢出病原體。其中RSV陽(yáng)性率最高，為31.5%（81/257），其次為HRV 17.5%（45/257），ADV和MP檢出率均為7.8%（20/257），257份標(biāo)本中，23份標(biāo)本檢出兩種及兩種以上病原體（8.9%）。其中21份標(biāo)本檢出2種病原體，2份標(biāo)本檢出3種病原體，以呼吸道合胞病毒合并鼻病毒陽(yáng)性檢出率最高，為2.3%（6/257），見表1。

表1 呼吸道感染病原類型及陽(yáng)性率（n=257）

2.2 不同年齡組間病原體陽(yáng)性率比較

本研究比較了不同年齡組間病原體陽(yáng)性率，結(jié)果顯示陽(yáng)性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)比較不同年齡組間兩種及以上病原體陽(yáng)性率，結(jié)果表明多種病原體陽(yáng)性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。進(jìn)而比較各個(gè)病原體在不同年齡組間陽(yáng)性率，呼吸道合胞病毒及肺炎支原體不同年齡組間陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，呼吸道合胞病毒好發(fā)于3歲以下組兒童，肺炎支原體好發(fā)于＞6～15歲組兒童。而其他病原體在不同年齡組間陽(yáng)性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

表2 不同年齡組病兒呼吸道病原檢出情況/例（%）

2.3 不同性別間病原體陽(yáng)性率比較

257例呼吸道感染病人中男性病人病原體陽(yáng)性率為67.81%（99/146），女性病人病原體陽(yáng)性率為63.96（71/111），統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示病原體陽(yáng)性率在性別之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

χ

=0.416，

P

=0.519）。

3 討論

呼吸道病原感染是兒童和成人最常見的疾病，任何年齡、地域、性別、季節(jié)中均可發(fā)生，是中國(guó)及世界范圍的感染性疾病的發(fā)病和死亡的重要原因。呼吸道感染的病原體主要為病毒、細(xì)菌及非典型病原體，不同病原體治療方案明顯不同。快速、有效且能同時(shí)檢測(cè)多種呼吸道病原的檢測(cè)技術(shù)能為臨床醫(yī)生治療提供診療依據(jù)，實(shí)現(xiàn)早期準(zhǔn)確用藥，從而提高臨床治療效果，節(jié)約醫(yī)療成本。目前國(guó)內(nèi)病毒檢測(cè)常用的方法是免疫熒光法，可檢測(cè)流感病毒A、腺病毒、流感病毒B、呼吸道合胞病毒、副流感病毒1、2、3等7種病毒。近年來發(fā)展的多重PCR能一次性檢測(cè)多種病原體或同一病原體多種分型，有較強(qiáng)的高效性、靈敏度。

本研究納入兒科呼吸道感染病人257份樣本，利用多重PCR技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，總陽(yáng)性率為66.0%，這與以往研究報(bào)告一致。主要流行病原體依次是呼吸道合胞病毒（31.5%）、鼻病毒（17.5%）、肺炎支原體和腺病毒（7.8%）。乙型流感病毒、甲型流感病毒、副流感病毒、冠狀病毒、偏肺病毒、博卡病毒及衣原體檢出率較低。呼吸道病毒感染主要發(fā)生在5歲以下兒童組。值得注意的是，RSV是3歲以下人群感染最常見的病毒，其中＞1～3歲兒童中陽(yáng)性率最高（40.9%），與文獻(xiàn)報(bào)道一致，其患病率隨年齡的增長(zhǎng)而下降。?1歲組兒童RSV陽(yáng)性率低于＞1～3歲兒童組的原因可能是該年齡組兒童攜帶通過胎盤或初乳獲得的來自母體的抗體，對(duì)新生兒具有一定程度的天然免疫作用。肺炎支原體在不同年齡組的陽(yáng)性率依次為0.0%、3.4%、13.7%、35.7%，陽(yáng)性率隨年齡的增長(zhǎng)而上升，在＞6～15歲年齡組兒童中陽(yáng)性率最高（35.7%）。在上海某地區(qū)7～16歲兒童陽(yáng)性率最高為28.81%，可能與不同地區(qū)氣候環(huán)境差異有關(guān)。

分析多種病原體混合感染的情況，8.9%的樣本中檢測(cè)到多個(gè)病原體，與Kholy等報(bào)道的2種及以上病原體檢出率達(dá)25.6%相比，本研究中多病原體陽(yáng)性檢出率較低。分析原因可能與本次研究納入標(biāo)本數(shù)較少有關(guān)。本研究中鼻病毒合并呼吸道合胞病毒陽(yáng)性率最高，有報(bào)道指出，鼻病毒感染癥狀緩解后2～5周依然會(huì)排泌鼻病毒，Walter JM等人還發(fā)現(xiàn)鼻病毒是無癥狀攜帶者中最常檢出的病毒，因而檢出的鼻病毒不能區(qū)別是既往感染、無癥狀攜帶還是現(xiàn)癥感染，提示臨床醫(yī)生在治療時(shí)需結(jié)合病人臨床癥狀及體征。本研究發(fā)現(xiàn)不同性別間的病原體陽(yáng)性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

綜上所述，呼吸道合胞病毒、腺病毒、鼻病毒、肺炎支原體在合肥地區(qū)兒童呼吸道感染病原體中較為常見，其中呼吸道合胞病毒及肺炎支原體陽(yáng)性率與年齡相關(guān)。