高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)感染患者陰道菌群與子宮頸局部免疫功能改變的關(guān)系研究

邱雁 潘敏

【摘要】 目的：研究高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）持續(xù)感染患者陰道菌群與子宮頸局部免疫功能改變的關(guān)系。方法：選擇2020年1月-2021年1月來(lái)本院進(jìn)行HPV檢查的145例女性為研究對(duì)象，其中HR-HPV陽(yáng)性患者90例為研究組，55例HR-HPV陰性者為對(duì)照組。觀(guān)察研究組患者感染情況，以及陰道微生態(tài)失調(diào)、菌群陽(yáng)性率、T淋巴細(xì)胞亞群分布。結(jié)果：HPV感染的患者中以單一型感染為主，主要為HPV16（38.89%），復(fù)合型感染占比較少。研究組陰道微生態(tài)失調(diào)51.11%高于對(duì)照組的21.82%，乳酸桿菌異常、細(xì)菌性陰道炎、衣原體、滴蟲(chóng)、解脲脲原體陽(yáng)性率均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。研究組CD8+高于對(duì)照組，CD3+、CD4+均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：HR-HPV感染患者，更容易出現(xiàn)陰道微生態(tài)失調(diào)，陰道菌群會(huì)發(fā)生變化，子宮頸免疫功能也會(huì)下降。

【關(guān)鍵詞】 高危型 人乳頭瘤病毒 感染 陰道菌群 免疫功能

Relation Studies of Vaginal Microbiota and Cervical Local Immunity in Persistent High-risk Human Papillomavirus Infection Patients/QIU Yan， PAN Min. //Medical Innovation of China， 2021， 18（14）： -137

[Abstract] Objective： To study the relationship between the vaginal microflora and the changes of local cervical immune function in patients with persistent high-risk human papillomavirus （HR-HPV） infection. Method： A total of 145 women who came to our hospital for HPV examination from January 2020 to January 2021 were selected as the study subjects， among which 90 patients with HR-HPV positive were included in the study group and 55 patients with HR-HPV negative were included in the control group. Infection， vaginal microdysregulation， positive rate of bacteria and distribution of T lymphocyte subsets were observed in the study group. Result： The majority of HPV infected patients were single type infection， mainly HPV16 （38.89%）， complex type infection accounted for less. The positive rates of Lactobacillus abnormality， bacterial vaginitis， Chlamydia， Trichomonas and Ureaplasma ureticum in the study group were all higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. CD8+ in the study group was higher than that in the control group， while CD3+ and CD4+ were lower than those in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion： Patients with HR-HPV infection are more likely to have vaginal microdysbiosis， changes in the vaginal microflora， and decreased cervical immune function.

[Key words] High-risk Human papillomavirus Infection Vaginal microbiota Immunity

First-authors address： Maoming Peoples Hospital， Maoming 525000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.14.032

子宮頸癌已經(jīng)納入了全球最為常見(jiàn)的惡性腫瘤，臨床發(fā)病率較高，呈逐年上升趨勢(shì)[1]。由于女性陰道是由自身的免疫系統(tǒng)、菌群組成，在控制炎癥與抵擋病原菌中起到了關(guān)鍵作用[2]。國(guó)內(nèi)外研究證實(shí)，人乳頭瘤病毒（HPV）感染與子宮頸癌存在密切關(guān)系，也是發(fā)生的必要條件，在感染HPV后，超過(guò)8%的患者會(huì)發(fā)展為子宮頸癌及其相關(guān)病變[3]。目前主要以高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）感染為主，感染后患者會(huì)出現(xiàn)局部免疫功能障礙，陰道菌群失調(diào)的情況，誘發(fā)病變[4]。本文通過(guò)分析HR-HPV患者陰道菌群與局部免疫功能改變的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2020年1月-2021年1月來(lái)本院進(jìn)行HPV檢查的145例女性為研究對(duì)象。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①可以進(jìn)行TCT檢測(cè)、陰道鏡活檢、HPV-DNA檢測(cè);②有性生活、月經(jīng)規(guī)律。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在全身性感染疾病;②既往有子宮頸手術(shù)史。研究對(duì)象知情同意，該研究已經(jīng)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 （1）樣本采集：取膀胱截石位，常規(guī)消毒處理，使用窺陰器暴露陰道與子宮頸口，取棉拭子刮取陰道內(nèi)側(cè)分泌物，放在試管中，實(shí)施陰道微生態(tài)檢測(cè)。使用棉拭子在子宮頸口旋轉(zhuǎn)刮取3圈，并將其浸沒(méi)在保存液中，-80 ℃保存，用于HPV檢測(cè)。使用子宮頸采樣刷，在柱上皮-陰道后穹窿交界位置，刮取樣本，采樣刷浸沒(méi)在生理鹽水中，子宮頸T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)。（2）陰道微生態(tài)檢測(cè)：陰道微生態(tài)檢測(cè)使用酶化學(xué)反應(yīng)法，選擇陰道微生態(tài)檢測(cè)試劑盒（山東仕達(dá)思生物產(chǎn)業(yè)有限公司，貨號(hào)YDLV-6884），其中pH檢測(cè)藍(lán)色為陽(yáng)性，黃色為陰性。過(guò)氧化氫檢測(cè)不顯色為陽(yáng)性，顯色為陰性。白細(xì)胞酯酶顯色是陽(yáng)性，不顯色即為陰性，唾液酸苷酶顯色為陽(yáng)性，不顯色陰性。4項(xiàng)指標(biāo)中有1項(xiàng)陽(yáng)性，則為陰道微生態(tài)失調(diào)。并對(duì)陰道菌群分布調(diào)查[5]。（3）HR-HPV檢測(cè)：采用熒光探針雜交捕獲技術(shù)檢測(cè)，使用DNA檢測(cè)試劑盒對(duì)基因型進(jìn)行檢測(cè)。基因型包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68。其中HR-HPV陽(yáng)性患者90例為研究組，55例HR-HPV陰性者為對(duì)照組。（4）T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)：生理鹽水經(jīng)5 000 r/min離心20 min去除上清液，離心半徑13 cm，使用500 μL磷酸鹽緩沖液，將細(xì)胞沉淀重懸，吹散后使用流式細(xì)胞分析儀檢測(cè)白細(xì)胞分化抗原（CD3+、CD4+、CD8+）[6]。

1.3 觀(guān)察指標(biāo) 記錄研究組主要感染分布情況，以及陰道微生態(tài)失調(diào)、菌群陽(yáng)性率、T淋巴細(xì)胞亞群分布情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 18.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 研究組年齡29～65歲，平均（43.65±4.11）歲;產(chǎn)次0～2次，平均（1.05±0.21）次。對(duì)照組年齡29～66歲，平均（43.21±4.44）歲;產(chǎn)次0～2次，平均（1.01±0.23）次。兩組一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 HR-HPV陽(yáng)性患者HPV感染類(lèi)型主要分布情況 HPV感染的患者中以單一型感染為主，主要為HPV16（38.89%）、HPV18（27.78%）、HPV33（16.67%），復(fù)合型感染占比較少，見(jiàn)表1。

2.3 兩組陰道微生態(tài)失調(diào)情況比較 研究組陰道微生態(tài)失調(diào)46例（51.11%），多于對(duì)照組12例（21.82%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=18.515，P=0.000）。

2.4 兩組陰道菌群陽(yáng)性情況比較 研究組乳酸桿菌異常、細(xì)菌性陰道炎、衣原體、滴蟲(chóng)、解脲脲原體陽(yáng)性率均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

2.5 兩組T淋巴細(xì)胞亞群分布情況比較 研究組CD8+高于對(duì)照組，CD3+、CD4+均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表3。

3 討論

子宮頸癌是婦女常見(jiàn)惡性腫瘤，隨著臨床對(duì)子宮頸癌技術(shù)的提升，早期診斷率有效提高[7]。HPV已經(jīng)成為臨床公認(rèn)的危險(xiǎn)因素，HR-HPV感染會(huì)造成陰道微生態(tài)紊亂，與生殖系統(tǒng)病變存在一定關(guān)系[8]。由于HPV增殖是復(fù)雜的病毒復(fù)制周期，不同HPV病毒復(fù)制能力存在差異，HR-HPV具有較強(qiáng)的復(fù)制能力，一旦持續(xù)感染會(huì)引起上皮細(xì)胞向上皮細(xì)胞內(nèi)瘤變轉(zhuǎn)化，部分患者發(fā)展為子宮頸癌[9-10]。

通過(guò)對(duì)本文HPV感染患者進(jìn)行分析，結(jié)果顯示：90例HPV感染患者中以單一型感染為主，主要為HPV16（38.89%）、HPV18（27.78%）、HPV33（16.67%），復(fù)合型感染占比較少。可能是由于HPV感染可活化陰道局部細(xì)胞中絲氨酸/蘇氨酸激酶，一定程度上活化患者免疫功能，對(duì)后續(xù)出現(xiàn)的其他病毒感染造成排斥作用，使得HPV感染主要為單一感染[11-13]。加之不同病毒在機(jī)體中復(fù)制能力存在差異，復(fù)制能力較強(qiáng)的HPV16、HPV18占據(jù)了一定優(yōu)勢(shì)，使得患者HPV類(lèi)型不變。本文結(jié)果中研究組陰道菌群陽(yáng)性率均高于對(duì)照組，主要HPV感染后，可促進(jìn)患者陰道微生物的繁殖，同時(shí)出現(xiàn)HR-HPV感染加劇了這一情況，使得患者陰道微生態(tài)失調(diào)[14-16]。在陰道pH值出現(xiàn)變化后，免疫功能下降會(huì)有利于微生物繁殖，原有的陰道菌群出現(xiàn)變化后，外界的病原微生物繁殖也會(huì)增加，促進(jìn)了患者生殖炎癥的發(fā)生[17-18]，因此結(jié)果中研究組陰道微生態(tài)失調(diào)51.11%高于對(duì)照組21.82%（P<0.05）。本研究結(jié)果顯示，研究組CD8+高于對(duì)照組，CD3+、CD4+均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），可能是由于病毒的E5蛋白會(huì)抑制免疫細(xì)胞中AKT信號(hào)通路活化，降低患者免疫功能[19]。且HR-HPV能夠抑制干擾素信號(hào)通路的活化，控制了淋巴細(xì)胞與免疫細(xì)胞，減少患者T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量。林麗等[20]學(xué)者指出，HR-HPV病毒持續(xù)感染患者陰道菌群發(fā)生改變，導(dǎo)致子宮頸微環(huán)境穩(wěn)態(tài)被打破，子宮頸局部免疫防御能力降低，這與本文結(jié)果一致。

綜上所述，HR-HPV持續(xù)感染會(huì)直接影響患者陰道菌群，并導(dǎo)致子宮頸局部免疫功能下降，因此需要及時(shí)檢測(cè)陰道菌群，防治HPV感染，降低子宮頸癌發(fā)生。

參考文獻(xiàn)

[1]羅桂芳，朱金鵬，張鵬，等.椿乳凝膠調(diào)節(jié)宮頸病變細(xì)胞內(nèi)人乳頭瘤病毒表達(dá)與陰道菌群失調(diào)的機(jī)制研究[J].中南藥學(xué)，2020，18（2）：222-227.

[2]王靜，馮同富，杜欣，等.重組人干擾素α2b陰道泡騰膠囊聯(lián)合匹多莫德治療宮頸人乳頭瘤病毒感染的臨床效果[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2019，16（29）：92-95.

[3] Mills A M，Dirks D C，Poulter M D，et al.HR-HPV E6/E7 mRNA In Situ Hybridization： Validation Against PCR， DNA In Situ Hybridization， and p16 Immunohistochemistry in 102 Samples of Cervical， Vulvar， Anal， and Head and Neck Neoplasia[J].American Journal of Surgical Pathology，2017，41（5）：607-615.

[4]黃敏敏，印志法，秦新蕾.高危型人乳頭瘤病毒感染與陰道微生態(tài)及宮頸局部細(xì)胞免疫的關(guān)系[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2020，17（30）：118-121，125.

[5]謝建萍，楊志紅，伊芳，等.宮頸高危型人乳頭瘤病毒感染與陰道菌群及宮頸局部免疫功能的關(guān)系[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2017，27（10）：2336-2339.

[6]張楠，李海燕，李玲.尖銳濕疣感染患者不同病程CD8+、CD4+T淋巴細(xì)胞與人乳頭狀瘤病毒感染的相關(guān)因素分析[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2017，16（9）：924-926.

[7]胡興艷.自擬消疣解毒湯聯(lián)合干擾素α-2b凝膠治療宮頸高危型HPV感染效果及對(duì)陰道菌群、T淋巴細(xì)胞和炎癥因子水平的影響[J].四川中醫(yī)，2018，36（6）：151-154.

[8]馮春華，陳文虎.重組人干擾素α-2b聯(lián)合保婦康栓治療宮頸炎合并HPV的臨床療效及對(duì)免疫功能的影響[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2018，12（11）：144-146.

[9]馮小麗，劉繼紅，李聰.重組人干擾素α-2b與保婦康栓陰道放置對(duì)宮頸高危HPV感染患者的療效及免疫功能的影響[J].河北醫(yī)藥，2018，40（7）：1083-1085.

[10]胡雅玉，胡恩平，任小麗，等.尖銳濕疣感染患者不同病程T淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá)與人乳頭狀瘤病毒感染的相關(guān)性研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2016，26（10）：2227-2228，2241.

[11]胡則林，王曉鳴.抗炎化濕方結(jié)合重組人干擾素α-2b治療人乳頭瘤病毒感染合并難治性宮頸炎的療效及對(duì)炎癥細(xì)胞因子和免疫功能的影響[J].中國(guó)婦幼保健，2020，35（22）：4207-4210.

[12]趙秀梅，金玲，常春玲， 等.復(fù)方沙棘籽油栓聯(lián)合重組人干擾素α2b栓治療人乳頭瘤病毒感染合并慢性宮頸炎的效果及對(duì)患者免疫功能和炎性因子水平的影響[J].中國(guó)醫(yī)藥，2019，14（11）：1689-1693.

[13]李美霞，薛慧英，陳健萍，等.重組人干擾素α-2b聯(lián)合保婦康栓對(duì)人乳頭狀瘤病毒感染患者療效及免疫功能的影響[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2016，26（14）：3296-3298.

[14]黃慧，楊芳，程麗琴，等.重組人干擾素α-2b對(duì)宮頸高危人類(lèi)乳頭瘤病毒（HPV）感染患者HPV清除率及免疫功能的影響[J].吉林醫(yī)學(xué)，2018，39（11）：2137-2138.

[15]韓一栩，劉玉珠，陳琨.高危HPV感染老年患者的陰道菌群分布研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2018，28（5）：764-767.

[16]葉建東，王科學(xué)，毛莉莉.HR-HPV感染患者陰道菌群檢測(cè)及宮頸局部免疫狀況分析[J].中國(guó)婦幼保健，2020，35（24）：4726-4729.

[17]康儉，顧瑋玲.宮頸病變患者高危HPV感染及陰道菌群失調(diào)狀況分析[J].醫(yī)學(xué)綜述，2020，26（7）：1419-1422，1428.

[18]張送萍，尹凌凡，畢艷慧.宮頸高危型人乳頭瘤病毒感染與陰道菌群及血清氧化應(yīng)激水平關(guān)系探討[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志，2020，49（8）：975-978，1028.

[19]姜克萍，李宛玲，杜志順.HPV感染對(duì)患者陰道菌群及妊娠結(jié)局的影響[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志，2019，31（5）：592-594，609.

[20]林麗，李喜梅，毛郁蕾，等.高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)感染患者陰道菌群與宮頸局部免疫功能改變[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志，2019，31（5）：564-566.

（收稿日期：2021-03-15） （本文編輯：姬思雨）