獲得性肺部感染老年患者肺泡灌洗液和血清中sTREM-1、HMGB1的表達及臨床意義*

王鳳玲， 李利娟， 唐燕玉， 冉學(xué)軍， 蔣蜀梅

(1.四川大學(xué)華西廣安醫(yī)院 感染科， 四川 廣安 638000； 2.四川大學(xué)華西廣安醫(yī)院 呼吸內(nèi)科， 四川 廣安 638000； 3.四川大學(xué)華西廣安醫(yī)院 骨科， 四川 廣安 638000)

肺部感染是老年患者急診和住院的主要原因[1]，主要為病原菌感染，但臨床對病原菌分離率較低[2]。臨床根據(jù)患病環(huán)境將肺部感染分為社區(qū)獲得性感染和醫(yī)院獲得性感染[3]，且對于需要氣管插管治療的重癥患者而言，醫(yī)院獲得性感染的肺部浸潤性陰影還可能來自于其他非感染因素，因此臨床采用病原學(xué)診斷的方式缺乏特異性，尋找相關(guān)生化標志物輔助診斷肺部感染類型變得尤為重要[4]。近年來，隨著纖維支氣管鏡技術(shù)的不斷發(fā)展，通過肺泡灌洗液獲得病原標本的方法較傳統(tǒng)血清學(xué)標本的敏感性更高[5]。可溶性髓樣細胞觸發(fā)受體-1(soluble triggering receptors expressed on myeloid cells-1,sTREM-1)和高遷移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein,HMGB1)均屬于免疫細胞的表達產(chǎn)物，可通過參與炎癥反應(yīng)而加重感染[6-7]，關(guān)于血清標本中sTREM-1、HMGB1與肺部感染發(fā)病的關(guān)系已有報道[8]，但對其在肺泡灌洗液中的水平及其與病情嚴重程度等的研究較少。因此，本研通過探討sTREM-1、HMGB1兩種標志物在獲得性肺部感染老年患者肺泡灌洗液及血清中的表達及臨床意義，為臨床治療提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2017年6月—2020年6月收治的103例獲得性肺部感染老年患者作為觀察組。納入標準：(1)符合《中國成人醫(yī)院獲得性肺炎與呼吸機相關(guān)性肺炎診斷和治療指南(2018年版)》[9]及《社區(qū)獲得性肺炎診斷和治療指南》[10]中有關(guān)醫(yī)院獲得性肺部感染及社區(qū)獲得性肺部感染的診斷標準者；(2)年齡60～95歲；(3)患者本人或家屬對本研究目的和意義知情并同意。排除標準：(1)治療前確診合并惡性腫瘤、肺栓塞、活動性肺結(jié)核者；(2)病原學(xué)檢查以非細菌感染為主及艾滋病感染者；(3)近期有服用激素、免疫抑制劑等藥物治療史者；(4)合并嚴重心律失常、心肌缺血等疾病者；(5)免疫功能低下、凝血功能異常者；(6)藥物中毒或酮癥酸中毒患者。選擇同期60例體檢無肺部感染的健康老年人作為對照組。

1.2 方法

1.2.1臨床資料收集 收集觀察組患者入院時、對照組體檢當日的病歷資料：包括姓名、性別、白細胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、降鈣素原(procalcitonin,PCT)、C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)、凝血酶原時間(prothrombin time,PT)、凝血酶時間(thrombin time,TT)、活化部分凝血活酶時間(activated partial thromboplastin time,APTT)、纖維蛋白原(fibrinogen,FIB)、白細胞計數(shù)(white blood cell count,WBC)、血小板(platelet,PLT)水平。

1.2.2肺泡灌洗液采集 采用纖維支氣管鏡行支氣管肺泡灌洗術(shù)或機械通氣的氣道管理，觀察組于入院第1天進行肺泡灌洗，對照組于體檢當日實施1次支氣管鏡及標本采集，注入無菌生理鹽水100 mL，負壓下回收右肺中葉或左肺舌葉的灌洗液裝至無菌硅膠塑料瓶中，過濾黏液后一部分用于細菌培養(yǎng)及藥敏試驗，另外一部分以1 800 r/min離心10 min后取上清于-80 ℃保存待測。

1.2.3血清標本采集 觀察組入院第1天，對照組于體檢當日采集空腹外周靜脈血5 mL，室溫放置10～20 min， 3 000 r/min離心20 min，收集上清， -20 ℃保存待用。

1.2.4sTREM-1和HMGB1水平檢測 取采集的肺泡灌洗液及血清樣本，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定sTREM-1、HMGB1水平，試劑購自上海將來實業(yè)股份有限公司及上海瑞番生物科技有限公司。

1.2.5分組 記錄觀察組患者入院當天的臨床肺部感染評分(clinical pulmonary infection score,CPIS)，該評分包括體溫、WBC計數(shù)、分泌物、氣體交換指數(shù)及X線胸片浸潤影5個維度，每個維度以0～2分為計分標準，總分0～10分，評分<6分納入輕癥組，評分≥6分納入重癥組；比較2組患者肺泡灌洗液及血清sTREM-1、HMGB1水平，采用Spearman相關(guān)分析觀察組患者肺泡灌洗液及血清sTREM-1、HMGB1水平與肺部感染嚴重程度的關(guān)系。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 一般資料

2組受試者年齡、性別、TT比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，觀察組患者IL-10、PCT、CRP、PT、APTT、FIB、WBC計數(shù)及PLT水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組被檢者基線資料比較

2.2 肺泡灌洗液和血清中sTREM-1、HMGB1水平

結(jié)果顯示，觀察組患者肺泡灌洗液及血清中sTREM-1、HMGB1水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)。見表2。

表2 2組每個維度肺泡灌洗液及血清中sTREM-1、HMGB1水平

2.3 sTREM-1和HMGB1水平對獲得性肺部感染的診斷效能

ROC曲線結(jié)果顯示，單獨檢測肺泡灌洗液及血清sTREM-1、HMGB1水平均可作為診斷獲得性肺部感染的效能指標(P<0.05)。見表3及圖1。

表3 肺泡灌洗液及血清sTREM-1、HMGB1水平對獲得性肺部感染的診斷效能

圖1 肺泡灌洗液及血清中sTREM-1、HMGB1水平對獲得性肺部感染的診斷的ROC曲線

2.4 輕癥組和重癥組獲得性肺部感染老年患者肺泡灌洗液和血清sTREM-1、HMGB1水平

以CPIS作為肺部感染嚴重程度評估標準，將觀察組患者分為輕癥組76例和重癥組27例，結(jié)果顯示，重癥組患者肺泡灌洗液及血清中sTREM-1、HMGB1水平明顯高于輕癥組患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表4。

表4 不同肺部感染嚴重程度亞組間sTREM-1、HMGB1水平比較

2.5 相關(guān)性分析

Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，獲得性肺部感染老年患者肺泡灌洗液及血清中sTREM-1、HMGB1水平與肺部感染嚴重程度均存在正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。見表5。

表5 肺泡灌洗液及血清中sTREM-1、HMGB1水平與肺部感染嚴重程度的相關(guān)性

3 討論

呼吸系統(tǒng)疾病是造成60歲以上老年人群死亡的主要病因[11]。獲得性肺部感染老年患者多合并其他慢性疾病，導(dǎo)致病情危重且進展迅速，但臨床表現(xiàn)卻不典型，較易錯過最佳治療時間[12]。我國針對獲得性肺部感染缺乏早期高準確度、高敏感度的病原學(xué)診斷方法，使得經(jīng)驗性治療較多，影響患者病情[13]。因此，尋找生物學(xué)指標評估老年獲得性肺部感染的發(fā)病及病情嚴重程度具有重要意義。

既往針對獲得性肺部感染血清學(xué)指標診斷的研究較多。本研究考慮患者多行纖維支氣管鏡或機械通氣治療，對氣管肺泡進行灌洗的同時可采集黏膜表面的滲液，做免疫學(xué)及微生物學(xué)檢查，而檢測肺泡灌洗液中的指標水平對患者病情的評估價值因操作繁瑣等問題尚缺乏報道。肺泡灌洗液中指標檢查較傳統(tǒng)痰液受外界因素影響較小，其結(jié)果準確性更高，對疾病的治療及診斷具有指導(dǎo)意義[14]。本研究結(jié)果顯示，獲得性肺部感染老年患者肺泡灌洗液及血清sTREM-1、HMGB1水平明顯高于對照組，且ROC曲線顯示檢測其水平可作為診斷獲得性肺部感染的效能指標。分析原因可能為肺部感染患者機體遭受外界病原菌侵襲后，強烈的氧化應(yīng)激反應(yīng)可導(dǎo)致炎癥因子大量釋放，而sTREM-1作為促炎因子的一種，在此情況下由中性粒細胞及巨噬細胞等分泌，加重炎癥反應(yīng)。再者，HMGB1同樣是晚期炎癥介質(zhì)的一種，在肺部感染后起到促炎效果，加重組織損傷。

病原菌入侵機體后可誘發(fā)炎癥反應(yīng)的產(chǎn)生，也可通過血液循環(huán)進入機體循環(huán)，造成肺組織損傷，因此，檢測血清及肺泡灌洗液中的炎癥因子指標對肺部感染病情的評估均具有一定意義。本研究結(jié)果顯示，獲得性肺部感染老年患者隨著病情的加重，其肺泡灌洗液及血清中sTREM-1、HMGB1水平明顯升高，且相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，其水平變化與肺部感染嚴重程度均存在正相關(guān)性關(guān)系。曾云等[15]發(fā)現(xiàn)，血清sTREM-1、HMGB1水平與老年肺炎患者病情嚴重程度具有正相關(guān)性，且還可作為預(yù)測高危患者死亡風(fēng)險的效能指標，與本研究結(jié)論相似。究其根本，sTREM-1是髓系細胞觸發(fā)受體-1的分泌亞型，肺部感染后大量釋放，并參與炎性反應(yīng)的級聯(lián)放大及膿毒癥的發(fā)生。該指標廣泛表達于皮膚、肺組織等中，重癥患者細菌及真菌引起的感染性炎癥反應(yīng)較輕癥患者更強，局部激活明顯，在中性粒細胞、單核細胞等表達并釋放在肺泡液及血液中，從而加重局部炎癥反應(yīng)，加重病情，形成惡性循環(huán)。HMGB1作為炎癥介質(zhì)的一種，具有高遷移能力，在機體遭受病原菌感染后，肺組織淋巴細胞被激活，上皮細胞及巨噬細胞等分泌HMGB1，并通過血液擴散，參與局部及全身性炎癥反應(yīng)的病理過程。另外，引起肺部感染患者體內(nèi)炎癥反應(yīng)的因素較多，可能與急性創(chuàng)傷、感染、梗死等有關(guān)，均可在一定程度上引起指標變化[16]。因此，臨床早期評估應(yīng)綜合多種方法途徑，達到全面評估，從而為其制定個體化的治療方案，從根本上促進預(yù)后。本研究不足之處在于，因樣本量、地區(qū)、觀察時間等限制等，尚不知對結(jié)果是否存在影響，有待后期進一步研究。

綜上所述，獲得性肺部感染老年患者肺泡灌洗液及血清中sTREM-1、HMGB1水平明顯升高，且水平變化與肺部感染嚴重程度存在正相關(guān)性關(guān)系。提示sTREM-1、HMGB1可能參與獲得性肺部感染發(fā)病及進展，檢測其肺泡灌洗液及血清水平可作為臨床早期診斷的重要指標。