基于網絡藥理學探尋淫羊藿治療哮喘的關鍵靶標及作用機制

王瀚 馬紫童 唐秀鳳 高瑩瑩 楊麗平 劉仁慧

摘要 目的：基于網絡藥理學與分子對接方法，系統挖掘淫羊藿治療哮喘的關鍵靶標及作用機制。方法：利用多種數據庫尋找淫羊藿的活性成分與作用靶標，建立預測模型并利用分子對接技術對靶標進行篩選與驗證;查找疾病數據庫得到哮喘相關靶標;構建靶標互作網絡篩選關鍵靶標;利用數據庫進行GO功能富集分析與KEGG通路富集分析;構建生物網絡并進行拓撲分析。結果：通過篩選得到白細胞介素（Interleukin，IL）-6、腫瘤壞死因子（Tumor Necrosis Factor，TNF）、血管內皮生長因子A（Vascular Endothelial Growth Factor A，VEGFA）等10個關鍵靶標，富集的通路有IL-17信號通路、TNF信號通路、缺氧誘導因子（Hypoxia-inducible Factor，HIF）-1信號通路等66條，功能信息共得到446條，包括參與炎癥反應、調控細胞增殖與細胞凋亡等。結論：淫羊藿中的活性成分靶標及作用通路在對抗炎癥反應、逆轉氣道重塑方面均表現出顯著富集，與治療哮喘的作用機制相符合，在哮喘防治方面具有廣闊的發展前景。

關鍵詞 網絡藥理學;分子對接;淫羊藿;哮喘;關鍵靶標;信號通路;炎癥反應;氣道重塑

Study on the Key Targets and Mechanism of Epimedii Folium in the Treatment

of Asthma Based on the Network Pharmacology

WANG Han1，MA Zitong1，TANG Xiufeng1，GAO Yingying1，YANG Liping2，LIU Renhui1

（1 School of Traditional Chinese Medicine，Capital Medical University，Beijing 100069，China; 2 Wangjing Hospital，

China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100102，China）

Abstract Objective：To explore the key targets and the mechanism of Epimedii Folium for the treatment of asthma based on the method of the network pharmacology and molecular docking.Methods：A variety of database was used to find the active ingredients and the targets of Epimedii Folium; a prediction model was established and molecular docking technology was used to screen and verify the targets; disease database was searched to obtain asthma-related targets; a protein-protein interaction network was built to screen key targets; the database was used to conduct GO functions enrichment analysis and KEGG pathway enrichment analysis; the biological network for topology analysis was constructed.Results：Through screening，10 key targets，such as IL-6，TNF，and VEGFA，were obtained.A total of 66 pathways were enriched，including IL-17 signaling pathway，TNF signaling pathway，and HIF-1 signaling pathway and 446 functional information was obtained，including participating in inflammation response，regulating cell proliferation and apoptosis.Conclusion：The active component targets and action pathways in Epimedii Folium show significant enrichment in fighting inflammation and reversing airway remodeling，which are consistent with the mechanism of action for the treatment of asthma，and have broad development prospects in the prevention and treatment of asthma.

Keywords Network pharmacology; Molecular docking; Epimedii Folium; Asthma; Key targets; Signaling pathway; Inflammation; Airway remodeling

中圖分類號：R285;R242文獻標識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.05.012

哮喘（Asthma）是一種下呼吸道常見慢性病，病因包括呼吸道病毒感染、過敏原、非甾體抗炎藥的長期應用及環境變化等，臨床上患者常反復出現喘息、咳嗽、胸悶、呼吸短促等癥狀[1-2]。隨著當今城市空氣質量的下降、居民生活壓力增大及吸煙人群數目增多，哮喘的發病率正逐年增加，如何有效地預防與治療哮喘正受到越來越多專家學者的重視。皮質類固醇藥物因其強大的抗炎作用在臨床上被廣泛應用于對抗哮喘的炎癥反應，然而其并不能有效改善氣道細胞反復損傷、氣道細胞增殖引發的氣道重塑，在治療的同時還伴隨糖尿病、骨質疏松等并發癥[3]。近年來，中藥因其多成分、多靶向、作用溫和等特點在治療與輔助治療支氣管哮喘中體現出獨特優勢，其中淫羊藿（Epimedii Folium）為臨床常用的補腎中藥之一[4]。課題組前期研究發現，淫羊藿能夠通過影響哮喘大鼠JAKs/STATs通路等炎癥介質的表達、誘導肺組織細胞凋亡等方式參與慢性支氣管哮喘的治療，效果顯著[5-6]，但其中治療哮喘的有效成分、作用機制尚未全面研究。本研究以此出發，通過網絡藥理學的方法對淫羊藿治療哮喘的關鍵靶標進行篩選并挖掘出顯著富集的功能與通路，為其作用機制的進一步研究提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 數據庫及軟件 Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform（TCMSP，http：//tcmspw.com/tcmsp.php）;DrugBank（https：//www.drugbank.ca/）;SymMap（https：//www.symmap.org/）;Herbal Ingredients Targets Database（HIT，http：//lifecenter.sgst.cn/hit/）;Pharmmapper（http：//www.lilab-ecust.cn/pharmmapper/）;RCSB Protein Data Bank（http：//www.rcsb.org/）;Discovery Studio 4.5（http：//www.discoverystudio.net/）;AutoDock 4.2（http：//autodock.scripps.edu/）;UniProt（http：//www.uniprot.org/）;National Center for Biotechnology Information Gene Database（NCBI Gene Database）（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/）;STRING（http：//string-db.org/）;Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG，http：//www.genome.jp/kegg/）;DAVID 6.8（https：//david.ncifcrf.gov/）;Cytoscape 3.7.1（http：//www.cytoscape.org/）;R 3.6.1（https：//www.r-project.org）;Bioconductor（http：//www.bioconductor.org/）。

1.2 研究路線與方法 見圖1。

1.3 淫羊藿中活性化合物的篩選與ADME參數的確定 進入TCMSP數據庫，以“yinyanghuo”作為檢索對象搜索得到淫羊藿中全部成分及其ADME信息。本研究采用藥物口服生物利用度（Oral Bioavailability，OB）與類藥性（Drug Likeness，DL）兩大指標作為衡量化合物藥效的依據，參照TCMSP數據庫“parameter information”中的篩選建議，確定篩選的閾值條件為OB≥30%，DL≥0.18，篩選出的分子作為淫羊藿中的活性成分進行后續研究。

1.4 構建淫羊藿已知的活性成分-靶標數據庫 建立淫羊藿的“活性化合物-靶標數據庫”。在中藥系統藥理學數據庫與分析平臺（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform，TCMSP）中搜索得到1.3中淫羊藿活性成分的對應靶標，對其中經DrugBank平臺驗證的靶標信息進行保留。隨后利用SysDT模型對藥靶相關性進行評價[7]，通過支持向量機（Support Vector Machine，SVM）五倍交叉驗證與隨機森林算法（Random Forest Algorithm，RFA）分別進行得分，將SVM_Score>0.8、RF_Score>0.7作為期望值進行篩選。同時，利用SymMap平臺對淫羊藿相關靶標進行搜索，在結果中按照P<0.05的標準篩選并添加1.3中活性化合物的相關靶標。此外，《中華人民共和國藥典》2015版（一部）[8]規定淫羊藿苷（Icariin，ICA）為藥材質量評價的重要指標，故研究將對這一重要化合物的靶標信息加以補充，通過HIT數據庫對ICA的已知靶標進行檢索。最終，將以上篩選出的所有化合物-靶標信息去重整合到構建好的活性化合物-靶標數據庫。

1.5 淫羊藿苷潛在藥靶篩選與分子對接驗證 進入PharmMapper平臺構建ICA的藥效團模型并對其潛在靶標進行預測，將整合得分（Norm Fit Score）≥0.95的靶標作為候選進行分子對接。在RCSB數據庫下載候選靶標的PDB蛋白晶體模型文件，將文件導入Discovery Studio 4.5中，隨后分離蛋白與之對應的原配體結構，利用AutoDock 4.2軟件重新進行原位點對接，對接算法采用遺傳算法（Genetic Algorithm，GA），通過計算均方根差（Root Mean Square Displacement ，RMSD） 值以比較對接前后復合物的構象差異：若RMSD>2 ，證明原靶蛋白與配體的對接效果不好，應舍棄對應靶蛋白;若RMSD≤2 ，則證明對接方法可靠并保留相應靶蛋白以進行后續操作[9]。將保留下來并去除原配體結構的靶標重新導入AutoDock 4.2中，經過分子加氫、除水、計算點電荷、添加原子類型等操作后，采用上述對接方法與ICA配體進行對接。通過查閱相關文獻[10-11]，研究假定結果中若蛋白與配體間的最小結合能（Minimum Binding Energy，MBE）≤-5.0 kJ/mol，則說明淫羊藿苷能較好地與該蛋白進行自發結合，并將其視作淫羊藿苷的潛在有效靶標。

1.6 構建已知的哮喘疾病靶標數據庫 在NCBI Gene Database中選擇檢索項為“Gene”，輸入“Asthma”進行已知哮喘基因的獲取，該數據信息來源于PubMed中的文獻報道記錄。隨后篩選出物種為智人（Homo Sapiens）的靶標，并將其去重添加至“哮喘-靶標數據庫”。

1.7 靶標互作網絡與關鍵靶標的篩選 查詢Uniprot數據庫，將“活性化合物-靶標數據庫”與“哮喘-靶標數據庫”中的基因名稱轉換為Gene Symbol，將二者信息聯合進一步篩選出淫羊藿與哮喘疾病的共同靶標，在STRING數據庫中分析靶標互作信息。為得到置信度較高的互作關系，本研究采用“High Confidence（0.700）”的條件對節點數據進行過濾，將處理后的數據導入Cytoscape 3.7.1進行網絡可視化展示，對生成的網絡圖進行拓撲分析，按照節點度（與該節點相關聯的邊的條數）由高到低的順序選擇前10個基因作為網絡中的關鍵靶標。

1.8 基因本體論、信號通路富集分析與生物調控網絡的構建 采用DAVID數據庫進行淫羊藿-哮喘共同靶標基因本體論（Gene Ontology，GO）富集分析，其中在背景基因物種一欄選擇“Homo Sapiens”，輸出P<0.05的富集結果。此外，利用R 3.6.1中的“Cluster Profiler”插件（下載于Bioconductor平臺）關聯KEGG數據庫進行信號通路的富集，將富集結果按照FDR<0.05的標準進行過濾。根據以上活性

化合物及其靶標、通路的對應關系，使用Cytoscape 3.7.1構建活性化合物-靶標-通路-疾病生物層次網絡，對網絡中重要節點的生物效應進行分析。

2 結果

2.1 活性成分篩選結果 通過TCMSP數據庫共篩選出包括淫羊藿苷A（Yinyanghuo A）、淫羊藿苷E（Icariin E）、淫羊藿苷（Icariin）等在內的23種活性成分。結果顯示，淫羊藿中活性成分主要包括黃酮類、多糖類、木脂素、甾醇類等，篩選結果詳見表1。

2.2 淫羊藿苷（ICA）潛在藥靶與分子對接預測結果 PharmMapper平臺構建ICA的藥效團模型并對其潛在靶標進行分子對接。見表2。經預測得到Norm Fit Score≥0.95的ICA相關靶標26個，對接后RMSD≤2 的靶標21個，最終獲得ICA對接MBE值<-5.0 kJ/mol的潛在有效靶標8個，包括CA2、PNP、HSD17B11等。見圖2。

2.3 淫羊藿化合物靶標與疾病靶標篩選結果 此次研究共發現淫羊藿相關靶標238個，哮喘相關靶標919個，結果見表3。圖3表示化合物靶標與疾病靶標交集結果，得到BCL2、TNF、STAT1、IL4等88個活性成分-哮喘共同靶標。

2.4 淫羊藿靶標-蛋白質-蛋白質相互作用網絡?? 將88個活性成分-哮喘共同靶標導入STRING數據庫，得到構建好的靶標互作網絡。見圖4。圖中黃色節點代表節點度排名前10的關鍵靶標，粉紅色表示其他靶標。整個網絡中共存在1 298條邊，即存在609條靶標互作關系，其中邊的粗細反映置信度的高低。該網絡主要參數與關鍵靶標的節點度信息見表4。觀察表中數據可知此網絡中的最短路徑數目達100%，節點間平均距離為1.747，意味著

該網絡為典型的小世界網絡[12]，其中任意2個靶標只需要通過2.536個其他靶標就可發生作用，網絡下靶標之間的信息傳遞迅速且通暢。此外，平均相鄰節點數目為29.5，表示每個靶標平均與29.5個其他靶標相連，網絡的整體密度為0.339，則意味著某個靶蛋白與其他任一靶蛋白發生相互作用的平均概率為33.9%，說明各靶標之間的信息交流密切，一定程度上反映淫羊藿中活性分子能夠通過靶標之間穩定緊密的調控作用，改變哮喘疾病機體的狀態。

2.5 GO與KEGG通路富集分析結果 對88個靶標基因進行GO分析共識別得到446條結果，其中發現358條生物過程（Biological Process，BP）信息，包括正調控血管生成、細胞增殖的正調控、炎癥反應等功能;45條分子功能（Molecular Function，MF）信息，包括酶結合、細胞因子活性、生長因子活性等;43條細胞組分（Cellular Component，CC）信息，包括細胞外間隙、胞外區、胞膜窖等，按照P由小到大的順序，每個部分前20條富集結果見圖5。

KEGG通路富集分析共識別到83個基因，除去寬泛的通路及哮喘以外的疾病通路，共得到66條結果，包括IL-17信號通路、TNF信號通路、HIF-1信號通路等，按照FDR由小到大排序，前20條通路結果見圖6。

2.6 生物網絡構建結果 構建好的活性化合物-靶標-通路-哮喘的一級生物網絡見圖7。整個網絡中共有節點190個，節點的大小表示度的多少，中間的紅色菱形節點代表哮喘，23個粉紅色六角形節點代表活性化合物，88個綠色圓形節點代表靶標，66個藍色方形節點代表信號通路，網絡節點間共存在767條作用關系。

圖8表示在一級生物網絡的基礎上提取出的10個關鍵靶標及其關聯的活性化合物、信號通路所構建的二級網絡，其中10個核心靶標與17個活性化合物、63條信號通路關聯。網絡分析顯示，槲皮素（Quercetin）、山柰酚（Kaempferol）、木犀草素（Luteolin）與脫水淫羊藿素（Anhydroicaritin）等活性化合物能作用于網絡中的多個靶標，而MAPK3、MAPK1、PRKCA與PTGS2等靶標也能與多個成分、多條通路發生作用，證明淫羊藿能夠發揮多成分、多靶標、多通路的協同作用對哮喘進行全面系統的治療。

3 討論

支氣管哮喘屬于中醫學“哮證”范疇，其發病常以水濕內盛、臟氣虧虛等為內因，外以風邪侵入機體，導致氣道受阻、痰濕蘊肺、咳喘痰鳴[13]。中醫學認為補虛固本、理氣祛痰是治療哮喘的關鍵，《景岳全書》[14]中曾指出：“痰為水，腎主水，痰之本在腎”，腎陽乃體內陽氣之本源，陽氣充盈，則肺氣充實，呼吸調暢;陽氣不足，則肺氣瘀阻，氣喘乏力。淫羊藿作為重要的補腎陽藥，對于腎虛型支氣管哮喘具有十分顯著的療效。其有效成分包括淫羊藿苷類、淫羊藿黃酮以及淫羊藿多糖等，針對哮喘的治療能夠發揮減輕支氣管炎癥反應、抗氣道重塑、抗氧化應激、調節免疫應答與減輕糖皮質激素耐受性等藥理作用[15-17]。

氣道慢性炎癥反應是哮喘的一個重要特征，主要表現為外界過敏原誘導的T輔助細胞向Th2型細胞極化，促使中性粒細胞、嗜酸性粒細胞增殖并釋放等細胞因子，引發I型超敏反應。10個關鍵靶標中節點度排在第1、2位的IL-6與TNF均為哮喘病程中的強炎癥介質，研究發現IL-6可在多種炎性刺激和細胞因子的作用下參與JAK-STAT通路內的炎癥反應信號傳遞，導致Janus酪氨酸激酶家族的信號傳導因子（JAK1、JAK2等）及STAT1、STAT3等轉錄激活因子磷酸化，進一步加重氣道炎癥反應[18];TNF是引發哮喘炎癥反應的關鍵蛋白，在哮喘發病時可激活下游的核因子-κB等信號通路促使炎癥介質的釋放與募集、炎性小體的形成，誘發炎癥介質[19]。課題組前期研究證實中藥淫羊藿可下調JAKs/STATs蛋白磷酸化水平，減少IL-6等炎癥介質釋放，從而與地塞米松協同改善哮喘炎癥反應[5]。另有研究發現肺組織損傷的模型大鼠經淫羊藿苷干預后TNF-α表達量顯著減少，而觀察圖7生物網絡結果發現槲皮素、山柰酚等活性成分與IL-6、TNF直接相連，因此推測淫羊藿中存在多種成分能夠降低TNF-α水平、減少IL-6等相關炎癥介質的釋放以發揮哮喘抗炎作用[20]。

10個關鍵靶標除IL-6、TNF外，其余大部分均為哮喘的重要炎性介導因子與趨化因子，如CXCL8、IL1B、CCL2等，其中尤其值得關注的是PTGS2（環加氧酶-2），其節點度在10個關鍵靶標中排名第4，而結果顯示以PTGS2為靶標的成分涵蓋了23個全部活性成分中的17個，即淫羊藿中大多數成分均能作用于此靶標。比較于健康狀態，哮喘發生時氣道上皮和黏膜下層的PTGS2通過快速表達并釋放PGE（前列腺素E）等遞質引發炎癥反應加重[21]。據報道木犀草素、山柰酚可有效下調哮喘模型中的PTGS2表達量[22-23]，而上述2種天然化合物均為淫羊藿中的主要成分，同時存在于活性化合物-靶標調控網絡，以此說明PTGS2可能為淫羊藿對抗炎癥反應的一個重要因子。

氣道重塑是哮喘的另一個顯著特征，指的是哮喘發病時氣道內多種細胞結構和功能上的惡性變化，如氣道上皮細胞衰老與脫落、氣道平滑肌異常增殖與增厚等。本研究的GO與KEGG通路結果提示，核因子-κB信號通路、PI3K-Akt信號通路、p53信號通路、細胞凋亡與衰老等信號通路廣泛參與了氣道重塑的發展過程，包括調節氣道細胞的生長、增殖、分化、衰老、凋亡與自噬等生物進程。作為關鍵靶標的CASP3是細胞內源性凋亡信號的發起者之一，被激活后可介導下游凋亡與自噬反應的發生，同時還可與抑制因子XIAP（X-linked Inhibitors of Apoptosis Proteins）發生拮抗以共同維持凋亡活性穩態[24]，與此類似的還有Bcl-2/Bax凋亡平衡體系，Bcl-2可在核因子-κB等信號通路的誘導下，與凋亡的正調控因子Bax協同調控凋亡活性[25]。前期研究結果顯示，哮喘大鼠經淫羊藿干預后肺組織凋亡活性上調，使氣道重塑癥狀得到緩解[6]。此外，VEGFA（血管內皮生長因子-α）、EGFR（表皮生長因子受體）也是本研究結果的關鍵靶標，前者可促使血管生成與血管壁增厚，后者與多種氣道細胞的增殖和生長調控有關[26-27]。以上證明，淫羊藿通過作用于CASP3、VEGFA、EGFR等關鍵蛋白與多條相關通路，進而改變不同氣道細胞的不同生長狀態以改善氣道重塑。

此次淫羊藿中的關鍵靶標和通路結果顯示其在抗炎與抗氣道重塑兩方面的顯著活性，從宏觀的角度為進一步深入研究淫羊藿的藥效物質基礎和作用機制提供了參考依據，然而單純地基于網絡模型、藥靶對接與數據分析無法完全評價藥物在體內的具體代謝過程，故仍需借助進一步實驗加以證實。

參考文獻

[1]Hadjigol S，Netto KG，Maltby S，et al.Lipopolysaccharide induces steroid-resistant exacerbations in a mouse model of allergic airway disease collectively through IL-13 and pulmonary macrophage activation[J].Clinical & Experimental Allergy，2020，50（1）：82-94.

[2]Mims，James W.Asthma：definitions and pathophysiology[J].International Forum of Allergy & Rhinology，2015，5（S1）：S2-S6.

[3]Heffler E，Lorena NGM，Ferrando M，et al.Inhaled Corticosteroids Safety and Adverse Effects in Patients with Asthma[J].J Allergy Clin Immunol Pract，2018，6（3）：776-781.

[4]萬亞寧，李雙蕾，蔣云霞，等.淫羊藿及其復方制劑治療糖皮質激素性骨質疏松癥的研究進展[J].中國骨質疏松雜志，2019，25（5）：713-716.

[5]唐秀鳳，李曉曦，年宏蕾，等.淫羊藿女貞子影響激素干預哮喘大鼠與炎性因子相關的pJAKs/pSTATs的研究[J].環球中醫藥，2018，11（2）：172-177.

[6]馬紫童，唐秀鳳，高瑩瑩，等.淫羊藿女貞子配伍協同激素對哮喘大鼠肺組織細胞凋亡的影響[J].中國中醫急癥，2019，28（6）：941-944，957.

[7]Zhang W，Xue K，Gao Y，et al.Systems pharmacology dissection of action mechanisms of Dipsaci Radix for osteoporosis[J].Life Sci，2019，235：116820.

[8]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：中國醫藥科技出版社，2015：327-328.

[9]王強.基于網絡藥理及分子對接探討斷藤益母湯靶向MAP3K2治療類風濕關節炎的作用機制[D].廣州：廣州中醫藥大學，2019.

[10]劉錢，賀楨翔，楊慧，等.基于網絡藥理學和分子對接法探索肺毒清治療新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）的潛在活性成分[J].中草藥，2020，51（7）：1713-1722.

[11]袁文鋒，涂銘揚，陳超，等.基于分子對接及生物網絡功能模塊識別的復方丹參滴丸的網絡藥理學研究[J].中國藥學雜志，2017，52（9）：743-749.

[12]Zippo AG，Gelsomino G，Van Duin P，et al.Small-world networks in neuronal populations：a computational perspective[J].Neural Netw，2013，44：143-156.

[13]趙志翔，石克華，折哲，等.平喘湯聯合孟魯司特鈉治療支氣管哮喘慢性持續期療效觀察[J].河北中醫，2018，40（5）：737-740.

[14]李慧，周慶偉.溫補腎陽法在支氣管哮喘減撤糖皮質激素階段的應用[J].中醫研究，2019，32（8）：6-9.

[15]Hu L，Li L，Zhang H，et al.Inhibition of airway remodeling and inflammatory response by Icariin in asthma[J].BMC Complement Altern Med，2019，19（1）：316.

[16]Qin T，Ren Z，Yi L，et al.Immunological modulation effects of an acid Epimedium polysaccharide on immune response in chickens[J].Int Immunopharmacol，2019，70：56-66.

[17]Sun S，Liu L，Tian X，et al.Icariin Attenuates High Glucose-Induced Apoptosis，Oxidative Stress，and Inflammation in Human Umbilical Venous Endothelial Cells[J].Planta Med，2019，85（6）：473-482.

[18]Jevnikar Z，stling J，Ax E，et al.Epithelial IL-6 trans-signaling defines a new asthma phenotype with increased airway inflammation[J].J Allergy Clin Immunol，2019，143（2）：577-590.

[19]Shi F，Zhang Y，Qiu C，et al.Effects of inhaled corticosteroids on the expression of TNF family molecules in murine model of allergic asthma[J].Exp Lung Res，2017，43（8）：301-310.

[20]鞠靜，彭玲玲，潘宇政，等.淫羊藿苷及寶藿苷Ⅰ對氣管切開模型大鼠肺組織病理學及炎癥因子的影響[J].中國實驗動物學報，2019，27（3）：305-310.

[21]Yucesoy B，Kashon ML，Johnson VJ，et al.Genetic variants in TNFα，TGFB1，PTGS1 and PTGS2 genes are associated with diisocyanate-induced asthma[J].J Immunotoxicol，2016，13（1）：119-126.

[22]鄒華，王穎，秦曉宇，等.木犀草素通過抗氧化應激和抑制COX-2信號通路抑制哮喘幼鼠氣道炎癥[J].解剖科學進展，2019，25（6）：634-636.

[23]Kang DR，Belal SA，Choe HS，et al.Effect of Kaempferol on Cyclooxygenase 2（Cox2）and Cytosolic Phospholipase A2（cPLA2）Protein Expression in BALB/c Mice[J].Iranian journal of allergy，asthma，and immunology，2018，17（5）：428-435.

[24]Yosefzon Y，Soteriou D，Feldman A，et al.Caspase-3 Regulates YAP-Dependent Cell Proliferation and Organ Size[J].Mol Cell.2018，70（4）：573-587.

[25]Mineev VN，Nesterovich II，Trofimov VI，et al.Evaluating the activity of the apoptosis-regulating genes from Bcl-2，Bax expression，and caspase-3 activity in bronchial epithelial cells in patients with asthma[J].Arkh Patol，2011，73（1）：11-14.

[26]Shen X，Pasha MA，Hidde K，et al.Group 2 innate lymphoid cells promote airway hyperresponsiveness through production of VEGFA[J].J Allergy Clin Immunol，2018，141（5）：1929-1931.

[27]朱婷，王瑾，陳海華，等.支氣管哮喘患者血清中VEGF、EGF等相關生長因子表達及與臨床表型、肺功能以及病情程度相關性研究[J].標記免疫分析與臨床，2017，24（12）：1345-1350.

（2020-06-10收稿 責任編輯：芮莉莉）

基金項目：國家自然科學基金面上項目（81873115）;國家中醫藥管理局全國名老中醫藥專家傳承工作室建設項目（國中醫藥人教函〔2018〕134號）

作者簡介：王瀚（1997.07—），男，碩士研究生在讀，研究方向：中藥及復方的藥效及作用機制研究，E-mail：wh_1_1@163.com

通信作者：楊麗平（1971.11—），女，本科，副研究員，研究方向：中藥網絡藥理學研究，E-mail：yanglpwj@163.com

;劉仁慧（1974.07—），女，醫學博士，教授，研究方向：中藥配伍機制研究，E-mail：gzblrh45@ccmu.edu.cn