廣州從化地區1028株流感嗜血桿菌的耐藥分析

邱玖香，高明洋，尹小毛（通訊作者）

（1廣州醫科大學附屬市八醫院檢驗科 廣東 廣州 510060）

（2廣州南方學院 廣東 廣州 510970）

（3廣州醫科大學附屬順德醫院檢驗科 廣東 佛山 528315）

流感嗜血桿菌（H.iufluenzae,Hi）是一種無動力、無鞭毛、無芽孢、只侵犯人類的革蘭陰性桿菌，該種細菌是細菌性呼吸道感染的主要病因之一，在免疫力低下的人群中容易引起感染。也是社區獲得性感染的重要致病菌，可引起急性咽炎、喉炎、氣管炎、中耳炎、鼻竇炎、化膿性腦膜炎、菌血癥等[1]。其主要致病物質是菌毛、莢膜、內毒素。根據其莢膜多糖的成分可分為a、b、c、d、e和f六個血清型，其中以b型流感嗜血桿菌（Hib）的毒性最強。流感嗜血桿菌的抵抗力較弱，對熱、干燥及常用化學消毒劑敏感，加熱50～55℃ 30 min即被殺死。在流感嗜血桿菌引起的疾病中，腦膜炎占50%；因感染上流感嗜血桿菌而患腦膜炎的患者中，兒童占35%～50%[2]。隨著抗生素的廣泛使用和不合理使用，甚至濫用。流感嗜血桿菌對部分抗菌藥物的敏感性不斷下降，耐藥菌株逐漸增多。流感嗜血桿菌對氨芐西林的耐藥率也逐年上升，耐藥程度日益嚴重[3]。為指導臨床合理使用抗生素，本文分析南方醫科大學第五附屬醫院2018年1月—2019年4月分離出的流感嗜血桿菌菌株對抗生素的耐藥分布情況，現總結如下。

1.資料與方法

1.1 病例來源2018年1月—2019年4月于南方醫科大學第五附屬醫院門診或住院就診的患者。送檢細菌培養標本共培養出流感嗜血桿菌的菌株1 028株，遵循每位患者一株并且是第一株的原則。1.2 儀器和試劑

二氧化碳培養箱，VITEK 2 Compact全自動細菌鑒定儀，嗜血巧克力瓊脂培養基，復方新諾明、美洛培南、阿奇霉素、氨芐西林、芐西林/舒巴坦等抗菌藥物的藥敏紙片。

1.3 細菌培養、鑒定 送檢標本接種在嗜血巧克力瓊脂培養基上，放置二氧化碳培養箱35℃培養18～24 h后觀察，如無菌生長，將延長培養時間至48 h。所有菌株的鑒定均采用梅里埃VITEK2-Compactt全自動鑒定，用紙片擴散法（K-B法）對流感嗜血桿菌進行藥敏實驗。質控標準菌株采用大腸埃希菌ATCC 25922和金黃色葡萄球菌ATCC 25923。

1.4 統計學方法

應用Excel 2019及Word 2019軟件進行數據處理，計數資料用（n%）表示，并進行χ2檢驗。

2.結果

流感嗜血桿菌耐藥率：1 028株流感嗜血桿菌菌株對16種抗菌藥物的耐藥率情況，其中利福平、氯霉素、美洛培南、四環素、頭孢噻肟、頭孢曲松、亞胺培南、氧氟沙星、左旋氧氟沙星這些抗菌藥物的敏感率在90%以上，但是氨芐西林、復方新諾明、頭孢呋辛鈉、頭孢克洛的敏感率都低于50%；阿莫西林/克拉維酸、阿奇霉素、氨芐西林/舒巴坦的敏感率分別是72.2%、74.3%、88.7%，見表1。

表1 1 028株流感嗜血桿菌對16種抗生素的耐藥情況

3.討論

流感嗜血桿菌是社區獲得性感染的重要致病菌，屬孤菌科嗜血桿菌屬，是一種苛養菌，生長需要Х因子和Ⅴ因子，菌落生長緩慢，細小，無色透明，經驗不足者往往忽略其生長，容易漏檢，造成臨床分離率偏低。其傳播途徑主要是飛沫傳播，在我國兒童中以社區獲得性肺炎最常見。有多項調查[4-5]顯示流感嗜血桿菌感染以兒童為主，與兒童免疫系統未發育完全，體內特異性抗體水平低，容易在呼吸道內定植，同時該年齡段兒童活動范圍相對較小，容易通過空氣接觸在人-人之間傳播。流感嗜血桿菌感染以冬春季常見，以2～4歲低齡兒童發病為主，生物學分型上不同地區可能存在差異性。b型流感嗜血桿菌疫苗可有效預防大部分流感嗜血桿菌感染，但其尚未納入國家免疫規劃。

氨芐西林早在20世紀70年代就作為治療流感嗜血桿菌感染的經驗治療首選藥物，隨著其臨床廣泛使用，不規范使用甚至濫用所致耐藥菌株的出現，使氨芐西林耐藥性逐年升高。本文氨芐西林的耐藥率64.4%，這比2018年CHINET中國細菌耐藥性檢測[6]報道耐藥率57.2%以及趙蕾[7]、甄楊等[8]報道結果略高。同時明顯高于前些年報道[1]的廣州地區2000～2007年在12.61%～41.60%之間的耐藥率，并且呈現逐年遞增趨勢。耐藥率明顯高于歐美地區[9]和其他地區[10-12]的報道，這可能跟藥敏檢測方法、研究病例數量、地域以及臨床醫師的用藥習慣等因素引起耐藥率不同有關。流感嗜血桿菌對于氨芐西林的耐藥機制主要源于部分菌株β內酰胺酶的產生，β內酰胺酶可水解抗生素的β內酰胺環，導致抗生素失活。結合靶位青霉素結合蛋白（Penicillin Binding Proteins, PBPs）發生改變導致藥物親和力降低產生的耐藥性，菌株細胞膜通透性改變導致對藥物攝取量減少，以及外排泵機制等均會導致菌株對各種常用抗菌藥物產生耐藥性[13]。結合2014～2019年全國細菌耐藥監測網數據[14]發現，Hi對氨芐西林耐藥率呈現出逐年增加。臨床不宜再把氨芐西林作為Hi感染的經驗治療的首選抗生素。氨芐西林/舒巴坦的敏感率為88.7%，相比于氨芐西林明顯升高，但其臨床應用需慎重，需結合相關藥敏結果。

流感嗜血桿菌對利福平、氯霉素、碳青酶烯類、四環素、Ⅲ代頭孢菌素、氟喹諾酮類這幾類抗菌藥物的敏感率保持在90%以上，這跟2018年CHINET中國細菌耐藥性檢測[6]和2014～2019年全國細菌耐藥監測網數據[14]相符，這些抗生素可用于流感嗜血桿菌的經驗治療的首選藥物。Ⅱ代頭孢菌素的敏感率低于50%，頭孢克洛的敏感率低于頭孢呋辛鈉，與董方等[15]、黃鋼靈[16]、甄楊等[8]報道的結果相似，從而可知選用Ⅱ代頭孢菌素時需根據藥敏結果確定，不宜為首選藥物。復方新諾明敏感率低于50%，提示磺胺類藥物由于過度產生雙氫葉酸還原酶[17]，已不宜為Hi感染的經驗用藥。阿奇霉素是新一代大環內酯類抗生素，對各種陰性細菌、厭氧菌及其他病原體有很強的抗菌活性，尤其對流感嗜血桿菌有較強的抗菌活性[18]。而阿奇霉素的敏感率只有74.3%，與2018年CHINET中國細菌耐藥性檢測[6]和2014～2019年全國細菌耐藥監測網數據[14]基本相符，阿奇霉素耐藥率呈現出一定程度的上升，臨床對其使用應慎重。阿莫西林/克拉維酸的敏感率72.2%，跟阿奇霉素的敏感率不相上下，臨床選用時應結合藥敏結果，不宜經驗性治療首選。

綜上所述，流感嗜血桿菌對大部分藥物敏感性高，但氨芐西林、復方新諾明及Ⅱ頭孢菌素的敏感率低于50%，臨床應盡量避免經驗性使用，其選用需根據藥敏結果確定，不宜作為首選藥物，阿奇霉素的選用也應慎重。