血液分析儀日常室內(nèi)質(zhì)量控制中新鮮血比對方案的建立

鄭翠玲，王 力，程 焱，崔 巍

（國家癌癥中心 國家腫瘤臨床醫(yī)學研究中心 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院腫瘤醫(yī)院檢驗科，北京 100021）

目前，臨床實驗室血常規(guī)檢測工作需要同時使用數(shù)臺血液分析儀才能夠完成，由于不同儀器檢測原理、內(nèi)部構(gòu)造及其他因素的影響，同一臨床標本在不同儀器上的檢測結(jié)果可能存在一定的差異。因此，保證不同儀器間檢測結(jié)果的準確性和一致性，不僅是檢驗工作的重點，也是國際標準化組織（the International Organization for Standardization，ISO）15189標準對檢驗結(jié)果可比性的要求[1]。為了有效保證檢驗結(jié)果的準確性、一致性和可比性，進行高效的室內(nèi)質(zhì)量控制（internal quality control，IQC）是必要措施，臨床實驗室一般使用儀器配套質(zhì)控品來進行IQC，但配套質(zhì)控品成本高、有效期短、多次重復(fù)混勻后會導(dǎo)致部分檢測數(shù)據(jù)出現(xiàn)漂移。為解決這一問題，本研究建立了一套利用新鮮全血標本進行日常IQC的方案，截至目前，運行良好。

1 材料和方法

1.1 標本來源

實驗室每天在完成IQC后，按照美國臨床實驗室標準化協(xié)會（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）EP9-A2[2]文件的要求，從測定當天的乙二胺四乙酸二鉀抗凝標本中選擇新鮮血比對標本，該標本各項指標均在參考區(qū)間內(nèi)，無異常警示，標本量約2 mL。新鮮血比對標本盡可能在6 h內(nèi)完成[3-4]比對。

1.2 儀器與試劑

日本Sysmex公司XN-9000血液分析儀（包含5個模塊）和XS-800i血液分析儀（2臺），共7臺儀器。以性能良好、規(guī)范化操作、定期參加我國國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗中心室間質(zhì)量評價，且結(jié)果為優(yōu)秀的血液分析儀作為靶機，以其他血液分析儀作為比對儀器。所有儀器均使用配套質(zhì)控品和試劑。

1.3 評價項目

評價項目包括白細胞（white blood cell，WBC）計數(shù)、紅細胞（red blood cell，RBC）計數(shù)、血紅蛋白（hemoglobin，Hb）、血細胞比容（hematocrit，HCT）、血小板（platelet，PLT）計數(shù)。

1.4 方法

1.4.1 新鮮血比對 根據(jù)北京協(xié)和醫(yī)學院腫瘤醫(yī)院血常規(guī)檢測標本量分布情況，實驗室每日完成IQC后，在盡可能短的時間內(nèi)挑選新鮮血標本，在靶機上進行檢測，將測定結(jié)果（5001）傳輸至實驗室信息系統(tǒng)（laboratory information system，LIS），作為后續(xù)比對的基準值；約9：00時將新鮮血標本在XN-9000血液分析儀的5個模塊上進行檢測，將第1次比對儀器測定結(jié)果（5011、5021、5031、5051）和靶機測定結(jié)果（5041）傳輸至LIS；約10：30將新鮮血標本在所有血液分析儀上進行檢測，將第2次比對儀器測定結(jié)果（5012、5022、5032、5052、5072、5082）和靶機測定結(jié)果（5042）傳輸至LIS；若標本量無法滿足后續(xù)檢測或檢測時間超過6 h，在第2次新鮮血比對后，重新挑選1份新鮮血標本，在靶機上進行測定，并將結(jié)果（5003）傳輸至LIS，作為關(guān)機前比對的基準值；約15：30時，將新鮮血標本在所有血液分析儀上進行關(guān)機前比對，將關(guān)機前比對結(jié)果（5013、5023、5033、5053、5073、5083）和靶機測定結(jié)果（5043）傳輸至LIS。在LIS中自動按照公式計算相對偏差，并判斷是否超出相對偏差標準，如果超出標準，用紅色（比對儀器測定結(jié)果高于基準值）或藍色（比對儀器測定結(jié)果低于基準值）顯示。儀器間相對偏差的計算公式為：相對比對偏差（%）=（第1次比對結(jié)果-5041）/5041×100%；靶機運行過程中相對偏差的計算公式為：相對比對偏差（%）=（5041-5001）/5001×100%；比對儀器運行過程中相對偏差的計算公式為：相對偏差（%）=（第2次比對結(jié)果-第1次比對結(jié)果）/ 第1次比對結(jié)果×100% 。

1.4.2 判斷標準 參照1988年美國臨床實驗室改進法案（the Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988，CLIA'88）允許誤差（WBC計數(shù)為±15%、RBC計數(shù)為±6.0%、Hb為±7.0%、HCT為±6.0%、PLT計數(shù)為±25.0%），以1/2 CLIA'88允許誤差的作為儀器間相對偏差標準，以1/3 CLIA'88允許誤差的作為同一儀器運行過程中的相對偏差標準。以相對偏差（%）≤相應(yīng)的比對標準為合格，否則為不合格。

2 結(jié)果

2.1 儀器間新鮮血標本比對結(jié)果

在確定儀器IQC在控后，選取1份新鮮全血標本，用所建立的方法比較比對儀器與靶機的測定結(jié)果，LIS自動采集、計算比對數(shù)據(jù)，并自動提示異常情況，針對不同原因引起的異常情況采取相應(yīng)措施，確保儀器運行正常，以便有效監(jiān)控儀器穩(wěn)定性。儀器間比對的原始數(shù)據(jù)見表1。

表1 儀器間新鮮血標本比對原始數(shù)據(jù)

2.2 儀器間新鮮血標本比對相對偏差

比較相對偏差與1/2 CLIA'88允許誤差（WBC計數(shù)為≤±7.50%、RBC計數(shù)為≤±3.00%，Hb為≤±3.50%、HCT為≤±3.00%、PLT計數(shù)為≤±12.50%），以超過80%的標本的相對偏差在1/2 CLIA'88允許誤差范圍內(nèi)為比對合格，儀器間檢測結(jié)果具有可比性，一致性良好。儀器間新鮮血標本比對數(shù)據(jù)相對偏差見表2。

表2 儀器間新鮮血標本比對相對偏差 %

續(xù)表2 %

2.3 儀器運行過程中新鮮血標本比對結(jié)果

在儀器日常運行過程中的不同時間點檢測所選取的比對標本，及時評估儀器運行過程中的性能。應(yīng)用所建立的方法對所有血液分析儀日常運行過程的比對結(jié)果進行評估，結(jié)果顯示，儀器運行穩(wěn)定時，新鮮血標本比對結(jié)果具有可比性。儀器運行過程中比對的原始數(shù)據(jù)見表3。

表3 儀器運行過程中新鮮血標本比對結(jié)果

2.4 儀器運行過程中新鮮血標本比對相對偏差

將比對數(shù)據(jù)的相對偏差與1/3 CLIA'88允許誤差（WBC計數(shù)為≤±5.00%、RBC計數(shù)為≤±2.00%、Hb為≤±2.30%、HCT為≤±2.00%、PLT計數(shù)為≤±8.30%）進行比較，有超過80%的比對數(shù)據(jù)的相對偏差滿足1/3 CLIA'88允許誤差的標準，儀器運行穩(wěn)定。儀器運行過程中新鮮血標本比對相對偏差見表4。

表4 儀器運行過程中新鮮血標本比對相對偏差 %

3 討論

隨著血常規(guī)項目檢測量的逐漸增大，很多醫(yī)院都擁有多臺血液分析儀，為了減少檢驗差異，提高檢測結(jié)果的一致性和準確性，IQC是保證血液分析質(zhì)量的必要措施，而使用儀器配套質(zhì)控品是IQC最重要的條件之一。然而配套質(zhì)控品成本高、有效期短，在一定程度上增加了血液分析儀IQC的難度，為確保不同血液分析儀血常規(guī)檢測結(jié)果的一致性，建立一個經(jīng)濟、便捷、有效的IQC方案非常必要。本研究建立的血液分析儀日常IQC中的新鮮血比對方案已經(jīng)應(yīng)用了26個月，通過不斷地對方案進行改進，現(xiàn)已趨于成熟。在方案運行過程中，我們發(fā)現(xiàn)應(yīng)重點關(guān)注以下幾點：（1）靶機的選擇，應(yīng)選擇性能良好、規(guī)范化操作、使用配套試劑的血液分析儀，其室間質(zhì)量評價、校準和IQC滿足要求，從而保證檢測結(jié)果的準確性和穩(wěn)定性；（2）新鮮血標本比對的選擇，應(yīng)選擇無PLT聚集、大PLT、有核RBC、RBC碎片、脂濁等異常提示，檢測結(jié)果處于正常參考區(qū)間的患者新鮮血常規(guī)標本，不建議選擇低值標本，因為低值標本測定結(jié)果可導(dǎo)致相對偏差偏大，從而影響對儀器比對結(jié)果的正確判斷（臨床可接受）；（3）比對頻次的確定，應(yīng)考慮科室標本量和新鮮血穩(wěn)定性這2個因素，標本量大的時段應(yīng)增加比對次數(shù)，因此，我們在標本量集中的上午安排了2次比對；此外，根據(jù)文獻報道[2-4]，在室溫（20 ℃～25 ℃）條件下6 h內(nèi)完成標本的檢測可以保證新鮮血標本的穩(wěn)定性，因此，我們最先建立了用關(guān)機前比對代替關(guān)機前質(zhì)控的方法，這不僅保證了全天檢測結(jié)果的準確性，而且節(jié)約了成本；（4）比對相對偏差標準的建立，建立實驗室自身的IQC新鮮血比對標準較直接采用某個標準更能反映實驗室儀器的質(zhì)量，我們在方案建立之初僅將1/2 CLIA'88允許誤差作為儀器間比對的相對偏差標準，但是ISO 15189評審專家建議增加儀器運行過程中的比對，于是我們首次建立了將儀器運行過程中比對用于日常IQC的方法，其相對偏差標準為1/3 CLIA'88允許誤差；（5）比對實驗標本量，應(yīng)盡量選擇血量足夠（約2 mL）的標本，如果比對的儀器數(shù)量多，可以選擇同血型檢測結(jié)果在參考區(qū)間內(nèi)的數(shù)個標本配置成新鮮血比對標本[5]；（6）比對結(jié)果觀察方式的選用，本研究在LIS中建立了每日新鮮血比對完成IQC的功能，自動完成比對數(shù)據(jù)采集、計算和超過相對偏差標準的提示，克服了人工記錄數(shù)據(jù)和計算的不便，可實時監(jiān)控新鮮血比對標本的檢測偏差，實時觀察、打印，從而便利地實施新鮮血比對的IQC。

本研究所建立的方案并不是一成不變的，它可以隨著實際條件的改變，不斷地進行完善，如當參加比對的血液分析儀多于10臺時，建議采用多臺儀器的平均值作為靶值，而不是選擇靶機檢測值作為靶值，這樣更能反映日常工作的真實水平，使儀器間相對偏差處于可接受范圍。

總之，新鮮血比對標本無基質(zhì)效應(yīng)，將其應(yīng)用于血液分析儀IQC，不僅降低了IQC的成本，更保證了實驗室內(nèi)不同儀器間檢測結(jié)果的一致性和可比性，還可有效監(jiān)測儀器運行過程中的穩(wěn)定性，為實驗室認證奠定了基礎(chǔ)，值得在臨床實驗室推廣應(yīng)用。