PPARγ2基因 Prol2Ala多態性與阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征關系的相關性研究

杜堅宗,欽光躍,趙 恬,顧 亮,吳金彥,陸曉玲,吳 健

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征 (obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome,OSAHS)是一種多基因的慢性睡眠呼吸疾病,與代謝綜合征關系密切[1]。過氧化物酶體增殖物激活型受體 γ2(peroxisome proliferator-activated receptorgamma-γ2,PPARγ2)是一種配體激活型核轉錄因子,在調控脂肪細胞分化、調節機體糖脂代謝的平衡、增強胰島素敏感性、抗動脈粥樣硬化、抑制炎癥反應等方面均發揮重要作用。有研究表明 PPARγ2基因多態性與代謝綜合征有一定的關系。故推測PPARγ2基因 Prol2Ala多態性與OSAHS有關。本研究擬探討PPARγ2基因 Prol2Ala多態性與 OSAHS的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇 2007年 6月—2009年 12月來我院經臨床和整夜多導睡眠圖 (PSG)監測并按 OSAHS診療指南[2]確診的男性 OSAHS患者 100例。對照組為年齡、身高、體質量與 OSAHS組匹配的經 PSG確診的單純打鼾 (simple snoring)男性患者 100例。兩組均排除急性感染、慢性呼吸系統疾病、心血管疾病及糖尿病。本研究通過本院倫理委員會批準,所有患者在參加前均簽署知情同意書。

1.2 方法 晨起空腹抽提靜脈血 2m l,EDTA抗凝。按照微量全血提取法抽提基因組 DNA。以 50～200μg DNA為模板進行聚合酶鏈反應 (PCR)擴增,引物序列為:上游引物 5′-GCCAATTCAAGCCCAGTC-3′, 下游引物 5′-GATATGTTTGCAGACAGTGTATCAGTGAAGGAATCGCTTTCCG-3′。 PCR反應體系為 20μl,包括 1μl基因組 DNA模板,200μmmolPL dNTP,上下游引物 0125μmmolPL,1UTaqDNA聚合酶,018 mmolPLMgCl2。PCR循環參數為:94℃預變性 5 min,變性 94℃45 s,退火 56℃45 s,延伸 72℃30 s,30個循環;最后 72℃延伸 7 Min。取5μlPCR擴增產物經瓊脂糖凝膠電泳監測,紫外燈下觀測基因型。

1.3 統計學方法 采用 SPSS 13.0統計軟件完成。運用基因計數法計算各組基因頻率及等位基因頻率,χ2檢驗比較兩組間頻率的差異。

2 結果

OSAHS組和對照組 PPARγ2基因 Prol2Ala基因型與等位基因分布 基因型等位基因頻率的分布符合 Hardy-Weinberg平衡,提示所選擇的樣本具有群體代表性。兩組間各基因型分布及等位基因頻率差異均無統計學意義 (P＞0.05),在兩組間基因型以純合子 PP基因型多見 (見表 1)。

表 1 OSAHS組和對照組 PPARγ2基因 Prol2Ala基因型與等位基因分布[n(%)]Tab le 1 The Distributed of PPARγ2Prol2Ala genotype and allele in OSAHS group and the control group

3 討論

PPAR是一種配體激活型核轉錄因子,在調控脂肪細胞分化、調節機體糖脂代謝的平衡、增強胰島素敏感性、抗動脈粥樣硬化、抑制炎癥反應等方面均發揮重要作用。PPARγ2主要存在于脂肪細胞,參與脂肪細胞的分化[3]。PPARγ2已被發現參與近百個基因的轉錄調節,Prol2Ala非常接近所表達氨基酸末端,可改變活性結構域的結構,從而有可能降低重要的蛋白質高級結構,因此 Prol2Ala的變異可降低體內 PPARγ2對靶基因的轉錄活性,影響代謝的效應,特別是對脂肪細胞的代謝調節的改變,由此而產生了許多生物學效應。有研究報道Prol2Ala的變異可能與胰島素抵抗、血脂代謝、肥胖、糖尿病、高血壓有關[4-6]。由于 OSAHS患者臨床表型與 2型糖尿病、胰島素抵抗、血脂紊亂及中心性肥胖等代謝性疾病密切相關,那么 PPARγ多態性是否參與 OSAHS發病,導致 OSAHS的易感性增加,是非常值得探討的問題。因此本研究對浙江地區 OSAHS人群進行了研究,研究結果表明 PPARγ2基因Prol2Ala多態性性以 PP基因型為主,該變異與 OSAHS無明顯關聯,但也不排除樣本量小或研究人群遺傳背景不同及抽樣誤差等原因造成偏差。

綜上所述,浙江地區 OSAHS與 PPARγ2基因 Prol2Ala多態性性無關,但由于選取的研究對象種族差異、研究方法、樣本含量等不同有可能造成研究結果的不一致性,故有待于積累資料擴大樣本進一步深入研究。

1 劉卿雪.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征臨床診治進展 [J].河北醫藥,2008,30(6):846.

2 中華醫學會呼吸病學分會睡眠呼吸疾病學組.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南 (草案)[J].中華結核和呼吸雜志,2002,25(4):195-198.

3 Cheng S,Afif H,Martel-Pelletier J,et al.Association of polymorphisms in the peroxisome proliferator-activated receptor gamma gene and osteoarthritis of the knee[J].Ann Rheum Dis,2006,65(10):1394-1397.

4 Jaziri R,Lobbens S,Aubert R,et al.The PPARG Prol2Ala polymorphism is associated with a decreased risk of developing hyperglycemia over 6 years and combines with the effect of the APM 1G-11391A single nucleotide polymorphism:the data from an epidem iological study on the insulin resistance syndrome(DESIR)study[J].Diabetes,2006,55(4):1157-1162.

5 Tan GD,Neville MJ,Liverani E,et al.The in vivo effects of the Prol2A la PPARgamma2 polymorphism on adipose tissue NEFA metabolism:the first use of the Oxford Biobank[J].Diabetologia,2006,49(1):158-168.

6 Meirhaeghe A,CottelD,Amouyel P,etal.Association between peroxisome proliferator-activated receptor gamma haplotypesand themetabolic syndrome in French men and women[J].Diabetes,2005,54(10):3043-3048.