環境新方法驗證實施方案

王醒(江蘇泰華檢測技術有限公司，江蘇 張家港 215634)

0 引言

目前，環境監測單位在現場技術審核時，方法驗證報告的問題主要是驗證前的準備工作不充分、實際樣品測試未做和方法驗證報告不符合標準要求。方法驗證報告的規范文件HJ 168—2020[1]適用于科研實驗室內的方法確認，對方法驗證工作只能做指導意見，為讓環境監測人員可以系統、準確、全面地完成方法驗證工作，確保方法驗證報告完整、準確，故編制此文。此文適用于環境監測領域的標準方法驗證，不適用于非標方法或方法偏離的確認。

1 方法驗證前準備

標準方法驗證前，監測人員要確認人員、設備、標準物質和試劑、場所環境條件等是否滿足方法或規范的要求，并向技術負責人提交項目實施方案，由技術負責人組織評審，評審合格后，監測人員按照HJ 168及對應的標準方法、相關規范開始方法驗證的具體實施工作。

2 實施驗證

2.1 采樣

采樣人員按照采樣規范采取有代表性的實際樣品，樣品應至少覆蓋適用范圍中的1～2種。

2.2 校準曲線

按照標準制備合適濃度的標準樣品，制作校準曲線，并判定其相關系數(R值)、截距和斜率符合要求。完成后進行下一步。

2.3 容量法

按照標準方法要求，配制和標定滴定溶液。

2.4 檢出限

一般按照HJ 168和GB/T 27415[2]確定方法檢出限。

2.4.1 空白中可以檢測出待測物質

按照測定步驟，重復測定實驗室空白7次，計算7次平行測定結果的標準偏差，按照下列公式(1)計算方法檢出限。

式中：MDL為方法檢出限；S為7次平行測定的標準偏差；t(7)取值3.143。

2.4.2 實驗室空白中未檢測出待測物質

配制濃度為預計測定方法檢出限3～5倍樣品進行7次平行測定。計算7次平行測定的標準偏差，按公式(1)計算方法檢出限。此時需要判定計算方法檢出限的合理性，判定原則按照HJ 168附錄A。

2.4.3 分光光度法

可以按照2.4.1和2.4.2中的方法計算方法檢出限。在沒有前處理(比如消除干擾、酸消解、索提等)的情況下，也可以以扣除空白值后的與0.01吸光度相對應的濃度值作為檢出限，按照公式(2)進行計算：

式中：b為回歸直線斜率。

2.4.4 滴定法

一般根據所用的滴定管產生的最小液滴的體積來計算，計算方法參照HJ 168—2020附錄A1.3實施。

2.4.5 離子選擇電極法

當校準曲線的直線部分外延的延長線與通過空白電位且平行于濃度軸的直線相交時，其交點所對應的濃度值即該離子選擇電極法的檢出限。

2.4.6 檢出限總結

(1)計算方法檢出限時，按照實際選擇合適的方法確定檢出限。一般采用2.4.1和2.4.2兩種方法計算檢出限。

(2)檢出限的計算按照GB/T 8170的要求進行數據修約，結果保留一位小數且只進不舍。

(3)計算出的方法檢出限小于標準方法給定的檢出限，方可判定計算檢出限符合要求。

2.5 測定下限

以4倍檢出限作為測定下限。

2.6 精密度

測定項目的精密度一般用實驗室內相對標準偏差表示。可按照GB/T 6379.2的相關內容指導精密度的測試。實驗室內相對標準偏差：一般測定低、中、高三個濃度的標準樣品分別進行6次以上的平行測定，計算相對標準偏差。當三個濃度的精密度都滿足要求時，方可判定精密度符合標準要求。精密度除非標準或規范上有所規定，一般要求≤10%。

2.7 正確度

方法驗證的正確度測試使用標準樣品或加標計算回收率的方法驗證。

2.7.1 使用有證標準樣品或質量監督員配制的標準樣品

平行測試標準樣品6次，計算每個測定值與真值的絕對誤差或相對誤差。氣體項目一般使用水質有證標準樣品或質量監督員配制的標準樣品測試。按照證書上的誤差要求判定，自制的標準樣品要求相對誤差控制在±10%以內。

2.7.2 加標回收

氣體樣品除非標準有規定，一般不做加標回收測試。水質和土壤固廢樣品根據待測樣品的含量加入0.5、1和2倍樣品濃度的標準溶液，平行測試6次，計算每個測試結果的加標回收率。按照標準或規范要求判定加標回收率是否合格，如果標準或規范沒有規定，則按以下規定執行，水樣常規項目加標回收率范圍90%～110%、有機加標回收率范圍70%～130%，土壤樣品常規項目加標回收率范圍80%～120%、有機加標回收率范圍60%～140%。注：加標回收測定應將標準物質加到實際樣品中，和待測樣品同時前處理后，再進行測試分析。

2.8 實際樣品測試

根據標準的適用范圍，采取至少覆蓋適用范圍中的1～2種有代表性的實際樣品進行測試；測試包括精密度和正確度檢測。質控的判定方式參照方法驗證中的規則。

3 方法驗證報告

方法驗證報告編制質量直接影響技術專家對方法驗證質量的評價。故方法驗證報告的編寫順序、內容等都至關重要。方法編制報告由項目負責人編寫。

3.1 報告封面

封面包括驗證報告編號、項目名稱(大類別和檢測因子)、依據(方法)、項目主編單位及部門、項目負責人和日期、復核人和日期、審批人和日期等內容。

3.2 基本情況

3.2.1 人員情況登記表

按照順序填寫技術負責人、質量負責人、采樣和分析人員的職務/職稱、專業和相關年限等內容。

3.2.2 儀器情況登記表

內容包括儀器設備的名稱、編號、型號規格、性能狀況等。先填寫采樣相關設備，然后是測試用主要儀器設備，最后填寫輔助設備。

3.2.3 標準物質、試劑和消耗品登記表

先填寫有證標準物質、有證標準樣品、試劑，再填寫所用濾膜、炭管等耗材。

3.3 具體步驟

3.3.1 實際樣品采樣

包括日期、人員、在何處(描述具體的點位)、工況情況、如何采取有代表性的樣品、如何現場測試監測項目、樣品交接情況。內容描述清楚且可追溯、可復現。

3.3.2 實驗室測試包括樣品前處理及樣品測試步驟

內容包括待測樣品轉移、前處理(適用時，應包括設備參數)、校準曲線和待測樣品所加試劑、計算公式等內容。注：此處重點突出實際樣品的處理過程。

3.4 方法檢出限、測定下限測試數據

內容包括校準曲線數據(適用時)、檢出限數據和測定下限數據。

3.5 方法精密度測試數據

內容包括高中低三個濃度的精密度測試數據的匯總。

3.6 方法正確度測試數據

內容包括有證標準樣品或自制標準樣品測試數據的一種、兩種或三種。

備注：步驟3.4、3.5、3.6測試數據為實驗室配制的待測樣品，不包括實際樣品。

3.7 實際樣品測試

內容包括了實際樣品測試的精密度測試、正確度測試(盲樣或加標計算回收率)等內容。

3.8 結論

結論的內容應包括對“人、機、料、法、環、測”六個因素的評價、測試方法的相關內容(檢出限、精密度和正確度)評價、實際樣品測試的相關內容評價。內容全面且有數據支撐、有判定內容。

3.9 附件

附件一般包括項目的申請書、實施方案和現場采樣、樣品交接、分析室測試等相關的原始記錄。

3.10 方法驗證報告經技術負責人簽字確認后完成。

4 結語

文章結合 HJ 168-2020、實際工作和歷來外部審核意見編寫，內容從人、機、料、法、環、測等方面進行了統一規定。將實際樣品測試作為報告一部分單獨編寫，重點突出了實際樣品測試。符合HJ 168對新標準方法驗證的要求，對第三方環境監測機構的方法驗證工作有很好的指導作用。