飼糧膽汁酸水平對育成期貉生長性能、氮代謝及血清生化指標的影響

潘素敏 申樹瑞 張海華 劉 欣 孔令鈺 魏 雪

(河北科技師范學院動物科技學院，河北省特色動物種質資源挖掘與創新重點實驗室，秦皇島 066000)

乳化劑的使用可以使脂肪的利用得到提高，膽汁酸是一種新型的綠色乳化劑，對于脂類的吸收具有很好的促進作用。研究發現，飼糧中添加膽汁酸可以提高機體對脂類物質的乳化和吸收，膽汁酸還可消炎殺菌，保護肝臟和膽，減少其病變[1-2]。王進等[1]研究發現，在基礎飼糧中添加膽汁酸對生豬的生長性能有顯著提高作用，從而提高經濟收益。程偉偉等[2]研究在飼糧中添加500 g/t膽汁酸對肉雞的影響，發現飼養前期添加膽汁酸組肉雞的平均體重和平均體增重顯著提高，料重比下降。楊玉芝等[3]研究發現，對于生長前期的肉雞，在飼糧中添加適量膽汁酸可以使肉雞的平均日增重顯著提高。曾本和等[4]研究發現，高脂飼料中添加膽汁酸可以使齊口裂腹魚的肝胰臟脂肪代謝酶活性顯著提高，促進脂質代謝。貉是珍貴的毛皮動物，近年來，我國貉的養殖數量不斷上升，目前膽汁酸在其他動物上的研究較多，但在毛皮動物方面的研究未見報道。因此，本試驗以育成期貉作為研究對象，探究飼糧膽汁酸水平對于育成期貉的生長性能、營養物質表觀消化率、氮沉積和血清生化指標的影響，從而選擇出適宜的膽汁酸添加水平，為膽汁酸在貉養殖過程中的合理利用提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗設計

本試驗采用單因素隨機試驗設計，選取健康、體重相近的50日齡公貉64只，隨機分成4組，每組16個重復，每個重復1只貉。試驗地點為河北華夏新農科技股份公司昌黎莫各莊養殖場。4組分別飼喂在基礎飼糧中添加0(Ⅰ組)、100(Ⅱ組)、300(Ⅲ組)、500 mg/kg膽汁酸(Ⅳ組)的飼糧。預試期10 d，正試期90 d。

1.2 試驗飼糧

基礎飼糧參考NRC(1982)和相關文獻[5-6]及生產實踐經驗值進行配制，其組成及營養水平見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養水平(風干基礎)

1.3 飼養管理

在試驗開始前要對貉的食盆和籠舍進行徹底的清洗和消毒，采用單籠飼養，每日早、晚各飼喂1次(07:30與15:30)。自由飲水，每日記錄進食量，早上喂料后觀察貉的健康情況。

1.4 消化代謝試驗

于2019年7月26日至2019年7月28日進行消化代謝試驗，共計3 d，每組分別挑選8只體重相近、健康狀況良好的貉，使用全收糞法進行試驗。在每個收集桶內加入20 mL的10%的硫酸進行固氮，每天記錄貉的給食量和剩料量，計算采食量。3 d之后將全部的糞樣和尿樣分別收集。將收集的尿樣混勻并過濾，放置在-20 ℃保存備用，糞樣稱重后按鮮重的5%噴灑10%的硫酸，65 ℃烘干至恒重，粉碎過40目篩，制成風干樣本，保存待測。

1.5 血清制備

育成期試驗結束時，每組隨機選取8只健康貉，在空腹時后肢靜脈采血，血液收集用5 mL的促凝管，經4 000 r/min離心10 min，分離血清放置于-80 ℃保存，備用。

1.6 測定指標及方法

試驗開始時對貉稱重作為初始體重，在之后每隔20 d早上空腹對貉進行1次稱重，并記錄貉日采食量，計算平均日增重、平均日采食量及料重比。

依據國標對樣品進行分析測定，依據GB/T 6435—2014對干物質含量進行測定，依據GB/T 6438—2007對粗灰分含量進行測定，依據GB/T 6433—2006對粗脂肪含量進行測定，依據GB/T 6432—2018對粗蛋白質含量進行測定。相關指標的計算公式如下：

干物質采食量(g/d)=給料量×給料干物質含量-剩料量×剩料干物質含量；干物質排出量(g/d)=鮮糞重×糞干物質含量；干物質消化率(%)=[(干物質進食量-干物質排出量)/干物質進食量]×100；粗蛋白質消化率(%)=[(粗蛋白質進食量-糞中粗蛋白質排出量)/粗蛋白質進食量]×100；粗脂肪消化率(%)=[(粗脂肪進食量-糞中粗脂肪排出量)/粗脂肪進食量]×100；食入氮(g/d)=干物質采食量×飼糧粗蛋白質含量/6.25；糞氮(g/d)=糞干物質量×糞粗蛋白質含量/6.25；尿氮(g/d)=尿體積×尿粗蛋白質含量/6.25；氮沉積(g/d)=食入氮-糞氮-尿氮；凈蛋白質利用率(%)=(氮沉積/食入氮)×100；蛋白質生物學價值(%)=[氮沉積/(食入氮-糞氮)]×100。

血清生化指標包括谷草轉氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、谷丙轉氨酶(ALT)活性及葡萄糖(GLU)、總蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、白蛋白(ALB)、低密度脂蛋白(LDL)、膽固醇(CHOL)、尿素(UREA)、高密度脂蛋白(HDL)含量，采用中生北控試劑盒，參照說明書通過VITAL-E全自動生化分析儀測定[7]。

1.7 數據處理

試驗數據用Excel 2010進行計算處理，用軟件SPSS 22對數據進行單因素方差分析，使用LSD進行多重比較，試驗結果差異顯著用P<0.05來表示，差異極顯著用P<0.01來表示，試驗的結果以“平均值±標準差”的形式表示。

2 結 果

2.1 飼糧膽汁酸水平對育成期貉生長性能的影響

如表2所示，Ⅱ組末重顯著高于Ⅰ組(P<0.05);Ⅰ組平均日采食量顯著高于其他3組(P<0.05)；各組間平均日增重沒有顯著差異(P>0.05)；Ⅱ組料重比顯著低于Ⅰ組(P<0.05)。

表2 飼糧膽汁酸水平對育成期貉生長性能的影響

2.2 飼糧膽汁酸水平對育成期貉營養物質表觀消化率的影響

如表3所示，Ⅱ組干物質表觀消化率顯著高于Ⅳ組(P<0.05)，與Ⅰ組和Ⅲ組差異不顯著(P>0.05)；Ⅰ組粗蛋白質表觀消化率顯著高于Ⅳ組(P<0.05)，Ⅱ組粗蛋白質表觀消化率極顯著高于Ⅳ組(P<0.01)；Ⅰ組粗脂肪表觀消化率顯著低于Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組(P<0.05)，Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著(P>0.05)。

表3 飼糧膽汁酸水平對育成期貉營養物質表觀消化率的影響

2.3 飼糧膽汁酸水平對育成期貉氮代謝的影響

如表4所示，Ⅱ組和Ⅰ組的糞氮排出量顯著低于Ⅳ組(P<0.05)；Ⅱ組的氮沉積顯著高于Ⅳ組(P<0.05)。

表4 飼糧膽汁酸水平對育成期貉氮代謝的影響

2.4 飼糧膽汁酸水平對育成期貉血清生化指標的影響

如表5所示，Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組的血清TP含量極顯著高于Ⅰ組(P<0.01)，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組之間無顯著差異(P>0.05)；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的血清ALB含量極顯著高于Ⅰ組(P<0.01)，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組之間無顯著差異(P>0.05)。各組間的血清AST活性沒有顯著差異(P>0.05)；Ⅳ組的血清ALT活性極顯著高于Ⅰ組(P<0.01)，Ⅳ組顯著高于Ⅱ、Ⅲ組(P<0.05)；Ⅳ組的血清GLU含量與Ⅰ組存在極顯著差異(P<0.01)。Ⅲ、Ⅳ組的血清CHOL含量極顯著高于Ⅰ組(P<0.01)，Ⅱ組顯著高于Ⅰ組(P<0.05)，Ⅳ組顯著高于Ⅱ組(P<0.05)；Ⅳ組的血清TG含量極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P<0.01)。

表5 飼糧膽汁酸水平對育成期貉血清生化指標的影響

3 討 論

3.1 飼糧膽汁酸水平對育成期貉生長性能的影響

飼糧膽汁酸水平對育成期貉生長性能有影響，膽汁酸添加水平為100 mg/kg時，貉末重最大。楊家昶[8]在肉雞飼糧中添加400 g/t膽汁酸時，對21日齡前的肉仔雞體重有促進作用。這和程偉偉等[2]在肉雞飼糧中添加膽汁酸顯著提高了公雞和母雞飼養前期的平均體重和平均體增重的研究結果一致。試驗發現，飼糧中添加500 mg/kg的膽汁酸時日增重并不高，高水平的膽汁酸會產生負反饋抑制法尼醇X受體激活的膽汁酸合成途徑[9]。有研究發現，肝臟中的法尼醇X受體可以被膽汁酸激活來降低機體對GLU的進食量，主要的表現形式有2種，一種是促進肝糖原的合成，另一種是降低糖異生[9]。高水平的膽汁酸可能抑制貉的進食量，導致Ⅳ組平均日增重不高。左旭冬[10]研究發現，在飼糧中添加膽汁酸水平為500 mg/kg時，對于子代母雞的平均日增重有抑制作用，膽汁酸的添加水平較低時有促進作用。料重比是評價飼料報酬的一個重要指標，料重比對企業的成本控制和盈利能力有決定性影響[11]。添加膽汁酸使料重比降低，貉生長前期在飼糧中膽汁酸水平為100 mg/kg時經濟效益較好。趙盼月[12]研究發現，在歐洲鰻鱺飼料中添加膽汁酸可以促進其生長，降低飼料系數。孫建珍[13]研究發現，在大菱鲆幼魚中添加膽汁酸對飼料的利用情況有提高作用。通過貉體重指標可以得出，育成期貉飼糧中添加適宜水平的膽汁酸能夠提高其生長性能。

3.2 飼糧膽汁酸水平對育成期貉營養物質表觀消化率的影響

營養物質的消化率體現了動物對飼料的利用效率，營養物質的消化吸收是動物調節生理功能的基礎，提高營養物質消化率對提高動物的生產性能有重要的意義。本試驗中育成期貉飼糧中添加100 mg/kg膽汁酸時，干物質表觀消化率和粗蛋白質表觀消化率均最高，但與Ⅰ組無顯著差異。吳明海[14]飼喂奶牛基礎飼糧和在基礎飼糧中添加0.2%膽汁酸鹽預混料，發現2組之間干物質消化率和粗蛋白質消化率沒有顯著差異。本試驗結果與前人在其他動物上的研究結果一致。膽汁酸鹽具有乳化脂肪的作用，從而促進了機體對脂肪的合成代謝[15]。唐精等[16]研究發現，膽汁酸可以調控脂蛋白酯酶和胰脂肪酶的活性，從而促進脂肪消化吸收。本試驗研究得到了相同的結果，隨著飼糧膽汁酸水平的增加，粗脂肪表觀消化率有提高的趨勢，飼糧中添加膽汁酸能夠提高貉對飼料中脂肪利用率。

3.3 飼糧膽汁酸水平對育成期貉氮代謝的影響

氮代謝反映了貉對蛋白質的利用率情況，機體對蛋白質的吸收程度也影響著動物機體的健康狀況。食入氮的多少取決于動物的采食量。在腸肝循環中，膽汁酸與受體結合可調節膽汁酸代謝和糖脂代謝和一些能量代謝、炎癥過程等[17]，膽汁酸對于蛋白質的影響研究較少，本試驗中，膽汁酸添加水平為100 mg/kg的組氮沉積顯著高于膽汁酸添加水平為500 mg/kg的組，可能是由于膽汁酸添加水平過高對動物機體產生了損失。膽汁酸添加水平為100 mg/kg的組蛋白質生物學效價和凈蛋白質利用率與其他組相比有增加的趨勢，但是差異沒有達到顯著的水平。

3.4 飼糧膽汁酸水平對育成期貉血清生化指標的影響

血液中的TP、ALB含量高存在多種可能，可能是由于飼糧本身的蛋白質含量高或者是動物機體對蛋白質的利用率提高，也有可能是動物機體健康狀態不佳。綜合本試驗結果分析，在低水平膽汁酸時蛋白質的利用率提高，高水平膽汁酸對動物機體造成損害，導致血清TP、ALB含量過高。Borg等[18]和Malmlof[19]研究發現，血清中較低的UREA含量表明氨基酸平衡良好，機體的蛋白質合成率較高。本試驗發現，在飼糧中添加100 mg/kg膽汁酸時，蛋白質合成較高。血漿酶活性可以反映肝臟的代謝狀況[20]，AST和ALT主要分布在肝細胞內其活性反映蛋白質的代謝和氨基酸的利用水平。如果肝細胞膜的通透性增加或者肝細胞壞死會導致AST和ALT活性升高[21]。本試驗中，膽汁酸添加水平為500 mg/kg時，血清AST和ALT活性均比較高，可能是高水平的膽汁酸對肝細胞造成損傷。張玲等[22]研究發現，膽汁酸的添加使鯽魚血清的ALT和AST活性降低，這與本試驗的結果存在差異，可能是由于本試驗中由于膽汁酸的長期飼喂使肝細胞受到了損傷，造成血清中ALT和AST的活性顯著升高。有研究發現，膽汁酸可通過調節抑制胰高血糖素的生成，進而降低GLU含量，但Zhang等[9]在研究中發現，使用GW4064長期處理小鼠會產生相反的效果，天然的膽汁酸對于GLU的長期調節效果更佳。Woollett等[23]研究發現，人在服用膽汁酸補充劑后可以顯著提高血清CHOL的吸收，與GLU代謝相似，膽汁酸的短期飼喂可以降低TG和CHOL含量，對維持正常的脂質代謝有積極作用，但是長期使用膽汁酸對于機體的脂代謝調節不利。周書耘等[24]研究中發現，飼喂軍曹魚膽汁酸會提高其血清中TG和CHOL含量，而張國安等[25]研究發現，在飼糧中添加300 mg/kg的膽汁酸可以降低大菱鲆幼魚血清中TG的含量，這與本試驗的結果存在差異。這可能是由于動物種類不同和生長階段的不同造成的差異。LDL與HDL是運載膽固醇的脂蛋白，動物機體不能長時間處于過高或過低的CHOL、TG含量，對于血脂代謝和轉運有非常不好的影響，嚴重時將會使動物患病。本試驗中高水平的膽汁酸添加對貉的影響不利，這與在小鼠[9]上的研究一致。

4 結 論

在本試驗條件下，綜合生長性能指標和粗脂肪表觀消化率得出，當育成期貉飼糧中添加100 mg/kg膽汁酸時，能夠提高育成期貉體重和脂肪消化率，生長性能較好。