妊娠后期飼糧蛋白質(zhì)水平對(duì)母驢初乳與常乳中蛋白質(zhì)、脂肪和氨基酸含量的影響

梁曉帥 沈亞軍 齊敬宇 郝 穎 李胤豪 趙艷麗 郭曉宇 史彬林 閆素梅*

(1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古自治區(qū)高校動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，呼和浩特 010018；2.內(nèi)蒙古草原御驢科技牧業(yè)有限公司，和林格爾 011500)

隨著農(nóng)業(yè)機(jī)械化程度的提高，驢逐漸退出役用市場(chǎng)，養(yǎng)驢業(yè)開始向乳用、肉用方向轉(zhuǎn)變[1]。Ragona等[2]指出，驢乳具有乳清蛋白和溶菌酶含量高、酪蛋白含量低、脂肪含量低和多不飽和脂肪酸含量高等特點(diǎn)，與人乳最為接近，是一種稀有的乳品資源。因此，提高驢乳的質(zhì)量對(duì)增加養(yǎng)驢效益、促進(jìn)驢產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展具有重要的意義。許多研究表明妊娠后期的飼糧能量與蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)水平和泌乳階段是影響泌乳質(zhì)量的主要因素，但目前的研究主要集中在奶牛、母豬等動(dòng)物上，且研究結(jié)果也不盡一致。陳子寧等[3]指出，在奶牛圍產(chǎn)前期降低飼糧能量水平有助于提高分娩后奶牛的干物質(zhì)采食量、產(chǎn)奶量和血糖濃度，顯著降低產(chǎn)后體重?fù)p失。楊鹛等[4]在母豬上的研究發(fā)現(xiàn)，增加妊娠期飼糧的能量與蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)水平，可提高初乳中脂肪、蛋白質(zhì)含量，但常乳中脂肪、蛋白質(zhì)含量主要受母豬泌乳期間平均日采食量和體況的影響。然而，有研究指出，圍產(chǎn)前期飼糧蛋白質(zhì)水平對(duì)奶牛娩后60 d的產(chǎn)奶量及乳成分無(wú)顯著影響[5]；在伊犁馬妊娠后期，隨飼糧蛋白質(zhì)水平增加，初乳中脂肪、蛋白質(zhì)、總固形物含量和體細(xì)胞數(shù)無(wú)顯著變化[6]。泌乳階段直接影響乳成分，初乳是母畜產(chǎn)后7 d之內(nèi)分娩的乳汁，初乳成分與常乳存在很大差異。呂岳文等[7]發(fā)現(xiàn)，母驢分娩后6 h的初乳中蛋白質(zhì)含量高達(dá)5.07%，脂肪含量達(dá)3.85%，且二者含量在分娩72 h后均隨著泌乳時(shí)間的延長(zhǎng)呈降低趨勢(shì)。目前，關(guān)于泌乳階段與飼糧蛋白質(zhì)水平對(duì)驢泌乳性能影響的研究少有報(bào)道，尤其是產(chǎn)前飼糧蛋白質(zhì)水平對(duì)驢乳成分的影響尚未見報(bào)道。鑒于此，本試驗(yàn)在妊娠后期給母驢飼喂不同蛋白質(zhì)水平的飼糧，研究產(chǎn)前飼喂不同蛋白質(zhì)水平飼糧對(duì)初乳與常乳中脂肪、蛋白質(zhì)和氨基酸含量的影響，為妊娠母驢飼糧蛋白質(zhì)的適量供給和驢乳的優(yōu)化生產(chǎn)提供數(shù)據(jù)支撐及理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼糧

本試驗(yàn)在內(nèi)蒙古草原御驢科技牧業(yè)有限公司進(jìn)行。采用二因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，因素一為妊娠后期飼糧蛋白質(zhì)水平，選擇年齡[(7.15±1.69)歲]、體重[(270.11±63.24) kg]、胎次[(1.63±0.48)胎]及預(yù)產(chǎn)天數(shù)[(58.66±4.28) d]相近的德州三粉母驢24頭，隨機(jī)分為3組，每組8頭，每頭為1個(gè)重復(fù)，產(chǎn)前分別飼喂高(12.48%，HP組)、中(11.52%，MP組)和低(10.54%，LP組)3個(gè)蛋白質(zhì)水平的飼糧，產(chǎn)駒后14 d內(nèi)統(tǒng)一飼喂相同的泌乳飼糧，試驗(yàn)期共74 d；因素二為產(chǎn)后時(shí)間(PT)，各組母驢分別在產(chǎn)后2、6、12、24、48 h和3、5、7、14 d進(jìn)行乳樣的采集。試驗(yàn)期間每頭母驢單獨(dú)飼養(yǎng)，精料與苜蓿草每日07:00和14:00飼喂，谷草自由采食，自由飲水，各組的環(huán)境條件及飼養(yǎng)管理均保持一致。母驢妊娠后期飼糧與泌乳飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 母驢妊娠后期飼糧與泌乳飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.2 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定

按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)分別在母驢產(chǎn)駒后的不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)母驢人工擠奶采集乳樣，樣品分裝在一次性無(wú)菌離心管內(nèi)，-20 ℃保存。乳中干物質(zhì)、脂肪、蛋白質(zhì)含量參照張麗英[8]主編的《飼料分析與質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》測(cè)定。乳中氨基酸(AA)含量參照GB/T 5009.124—2003[8]，采用酸解法測(cè)定，測(cè)定儀器為L(zhǎng)-8900型氨基酸自動(dòng)分析儀，所測(cè)指標(biāo)包括17種單一氨基酸[賴氨酸(Lys)、苯丙氨酸(Phe)、蘇氨酸(Thr)、蛋氨酸(Met)、纈氨酸(Val)、異亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、組氨酸(His)、天冬氨酸(Asp)、絲氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、半胱氨酸(Cys)、酪氨酸(Tyr)、精氨酸(Arg)和脯氨酸(Pro)]的含量，并計(jì)算必需氨基酸(EAA)、非必需氨基酸(NEAA)、總氨基酸(TAA)、支鏈氨基酸(BCAA，包括Leu、Val和Ile)、游離氨基酸(FAA，包括Asp、Glu、Ala、Leu、Tyr、Phe和Lys)、限制性氨基酸(LAA，包括Met和Lys)、呈味氨基酸(DAA，包括Glu、Asp、Phe、Ala、Gly和Tyr)的含量及EAA/NEAA、EAA/TAA。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 9.0軟件進(jìn)行方差分析，并采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，對(duì)主效應(yīng)和互作效應(yīng)進(jìn)行檢驗(yàn)；統(tǒng)計(jì)結(jié)果P<0.05表示差異顯著，0.05≤P≤0.10表示差異趨于顯著，P>0.10表示差異不顯著。

2 結(jié) 果

2.1 驢乳中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)和脂肪含量

由表2可知，HP、MP組驢乳中干物質(zhì)含量顯著高于LP組(P<0.05)；HP組驢乳中蛋白質(zhì)含量最高，顯著高于MP和LP組(P<0.05)，但驢乳中脂肪含量正好相反。產(chǎn)后時(shí)間對(duì)驢乳中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)和脂肪含量有顯著影響(P<0.05)，三者均隨著產(chǎn)后時(shí)間的延長(zhǎng)而降低。其中，驢乳中干物質(zhì)與蛋白質(zhì)含量在產(chǎn)后2 h顯著高于產(chǎn)后6 h(P<0.05)，二者又顯著高于其他時(shí)間點(diǎn)(P<0.05)，在產(chǎn)后12 h降低的趨勢(shì)趨于平緩，以產(chǎn)后14 d最低；驢乳中脂肪含量在產(chǎn)后2、6和12 h顯著高于其他時(shí)間點(diǎn)(P<0.05)，尤以產(chǎn)后2 h最高，在產(chǎn)后24 h降低的趨勢(shì)趨于平緩，以產(chǎn)后14 d最低。妊娠后期飼糧蛋白質(zhì)水平和產(chǎn)后時(shí)間的交互作用對(duì)驢乳中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)和脂肪含量具有顯著的影響(P<0.05)，其中，干物質(zhì)、蛋白質(zhì)含量均以HP組的產(chǎn)后2 h最高，顯著高于其他組合(P<0.05)，3組干物質(zhì)、蛋白質(zhì)含量均在產(chǎn)后12 h開始快速下降，干物質(zhì)含量以LP組的產(chǎn)后14 d最低，蛋白質(zhì)含量以HP組的產(chǎn)后14 d最低；脂肪含量以MP組的產(chǎn)后2 h最高，3組均在產(chǎn)后24 h開始降低，且以LP組的產(chǎn)后14 d最低。

表2 妊娠后期飼糧蛋白質(zhì)水平對(duì)驢乳中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)和脂肪含量的影響(鮮重基礎(chǔ))

2.2 驢乳中氨基酸含量

由表3和表4可知，HP、MP組驢乳中Asp、Ala、Val、Ile、Leu、Tyr、His及Arg含量顯著高于LP組(P<0.05)；驢乳中Thr、Ser、Gly和Cys含量在HP組最高，顯著高于其他2組(P<0.05)，以LP組最低。HP、LP組驢乳中Glu含量顯著低于MP組(P<0.05)。產(chǎn)后時(shí)間對(duì)驢乳中各氨基酸含量均有顯著影響(P<0.05)，并均隨著產(chǎn)后時(shí)間的延長(zhǎng)而降低，且在產(chǎn)后2 h顯著高于其他時(shí)間點(diǎn)(P<0.05)，在產(chǎn)后24 h降低的趨勢(shì)趨于平緩，以產(chǎn)后14 d最低。妊娠后期飼糧蛋白質(zhì)水平和產(chǎn)后時(shí)間的交互作用對(duì)驢乳中各氨基酸含量均具有顯著的影響(P<0.05)，其中，各氨基酸含量在HP組的產(chǎn)后2 h顯著高于其他各組合(P<0.05)，HP、MP和LP組從產(chǎn)后24 h開始，多數(shù)氨基酸含量下降的趨勢(shì)趨于平緩，Asp、Glu、Lys、Arg、Met和Leu含量以LP組的產(chǎn)后14 d最低，Ser、Gly、Ile和His含量以MP組的產(chǎn)后14 d最低，Thr、Val和Pro含量以HP組的產(chǎn)后14 d最低。

表3 妊娠后期飼糧蛋白質(zhì)水平對(duì)驢乳中必需氨基酸含量的影響

表4 妊娠后期飼糧蛋白質(zhì)水平對(duì)驢乳中非必需氨基酸含量的影響

2.3 產(chǎn)后不同時(shí)間的驢乳氨基酸平衡性

由表5可知，HP、MP組驢乳中EAA、NEAA、BCAA、FAA、LAA和DAA含量顯著高于LP組(P<0.05)；HP組驢乳中TAA含量顯著高于LP組(P<0.05)；HP組驢乳中EAA/NEAA和EAA/TAA有高于MP組的趨勢(shì)(P=0.05)。除EAA/NEAA和EAA/TAA外，驢乳中其余各指標(biāo)與蛋白質(zhì)含量的變化規(guī)律相似，均隨著產(chǎn)后時(shí)間的延長(zhǎng)而降低，以產(chǎn)后2 h最高，從產(chǎn)后24 h開始降低的趨勢(shì)逐漸平緩，并以產(chǎn)后14 d達(dá)到最低；驢乳中EAA/NEAA和EAA/TAA在產(chǎn)后24 h達(dá)到最高，顯著高于產(chǎn)后2、6 h和14 d(P<0.05)。妊娠后期飼糧蛋白質(zhì)水平和產(chǎn)后時(shí)間的交互作用對(duì)驢乳中各氨基酸平衡性指標(biāo)具有顯著影響(P<0.05)，其中，EAA、NEAA、TAA、BCAA、FAA、LAA和DAA含量均以HP組的產(chǎn)后2 h最高，顯著高于其他組合(P<0.05)，除EAA/NEAA和EAA/TAA外，3組均在產(chǎn)后12 h開始下降，NEAA、TAA、BCAA、FAA、LAA和DAA含量均以LP組的產(chǎn)后14 d最低。

表5 妊娠后期飼糧蛋白質(zhì)水平對(duì)驢乳中氨基酸平衡性的影響

3 討 論

3.1 妊娠后期飼糧蛋白質(zhì)水平和產(chǎn)后時(shí)間對(duì)驢乳成分的影響

關(guān)于妊娠期飼糧蛋白質(zhì)水平影響乳成分的研究報(bào)道較少，尤其是關(guān)于驢領(lǐng)域的研究尚未見報(bào)道。本研究得出，適當(dāng)增加妊娠后期驢的飼糧蛋白質(zhì)水平，可以提高驢乳中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)與TAA的含量，但其影響主要體現(xiàn)在對(duì)初乳的影響方面，而且飼喂中等蛋白質(zhì)水平的飼糧就可以達(dá)到提高產(chǎn)后初乳中干物質(zhì)與蛋白質(zhì)含量的效果，飼糧蛋白質(zhì)水平以11.52%為宜。此外，產(chǎn)后時(shí)間也是影響乳成分的關(guān)鍵因素之一。多數(shù)資料認(rèn)為，產(chǎn)后7 d之內(nèi)的乳為初乳，之后為常乳。目前針對(duì)產(chǎn)后時(shí)間對(duì)驢乳成分影響的研究報(bào)道甚少。呂岳文等[7]研究指出，驢初乳中蛋白質(zhì)、灰分、脂肪含量均隨泌乳期延長(zhǎng)呈下降趨勢(shì)。牛霞等[9]研究報(bào)道，分娩后2 h的新疆褐牛乳中蛋白質(zhì)含量是常乳的3.93倍，免疫球蛋白G(IgG)含量是常乳的108.14倍。陸東林等[10]發(fā)現(xiàn)，分娩后2 h的牛初乳中蛋白質(zhì)、脂肪含量分別是常乳的5.03和1.95倍，且初乳中各種成分的含量隨泌乳時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸接近常乳。本研究結(jié)果顯示，驢分娩后7 d內(nèi)的初乳中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、脂肪和各氨基酸含量均顯著高于常乳，且以產(chǎn)后12 h之內(nèi)較高，尤以產(chǎn)后2 h最高，其干物質(zhì)、蛋白質(zhì)與脂肪含量分別是產(chǎn)后12 h的1.79、3.62和1.51倍，分別是產(chǎn)后14 d的1.95、5.30和4.67倍。有研究指出，母畜在分娩前后，機(jī)體的蛋白質(zhì)動(dòng)員和氮代謝水平與分娩后泌乳能力有密切的關(guān)系。Theil等[11]指出，母豬分娩后的幾小時(shí)內(nèi)乳腺在高速合成初乳，同時(shí)，母體蛋白質(zhì)也能同氨基酸和糖類一樣被乳腺利用。在母豬分娩前機(jī)體氮代謝越劇烈，動(dòng)員的蛋白質(zhì)越多，初乳中蛋白質(zhì)合成就越多[12]。伊犁馬妊娠后期攝入高能高蛋白質(zhì)水平飼糧后，產(chǎn)后的干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)表觀消化率有升高的趨勢(shì)[6]。此外，妊娠期的乳腺發(fā)育決定了泌乳期乳腺上皮細(xì)胞的數(shù)量和母體后續(xù)的泌乳能力。姜洋洋等[13]研究發(fā)現(xiàn)，在妊娠后期適當(dāng)提高飼糧蛋白質(zhì)水平可以使藏母羊的乳池、腺泡、基底膜、肌上皮以及線粒體等亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的發(fā)育更好，而乳腺腺泡、基底膜等又是乳蛋白合成的重要場(chǎng)所[14]；吳騁[15]研究指出，提高母豬妊娠后期的飼糧蛋白質(zhì)水平可促進(jìn)乳腺在妊娠期和泌乳期的發(fā)育，介導(dǎo)了泌乳期更高的乳蛋白率。因此，本研究得出的中、高蛋白質(zhì)水平飼糧組的母驢其初乳中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)與氨基酸含量增加，可能是由于產(chǎn)前飼糧蛋白質(zhì)水平的提高可促進(jìn)母驢的乳腺發(fā)育，增加產(chǎn)后母驢對(duì)干物質(zhì)和蛋白質(zhì)的消化率，進(jìn)而增加了血液中的游離氨基酸含量，為乳腺的蛋白質(zhì)合成提供了更多的前體物有關(guān)。目前相關(guān)的研究報(bào)道甚少，因此，有必要從乳腺的發(fā)育及產(chǎn)后營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝的角度深入研究其影響機(jī)制。然而，王賢東等[6]發(fā)現(xiàn)，在伊犁馬妊娠后期每天飼喂不同水平的蛋白質(zhì)，產(chǎn)后初乳(產(chǎn)后12 h內(nèi))的乳脂率、乳蛋白率和總固形物含量無(wú)顯著差異，與本試驗(yàn)結(jié)果不同，這可能與動(dòng)物的種類、飼糧蛋白質(zhì)水平等不同有關(guān)，目前的相關(guān)研究甚少，需要進(jìn)一步探討。

3.2 妊娠后期飼糧蛋白質(zhì)水平與產(chǎn)后時(shí)間對(duì)驢乳氨基酸平衡性的影響

乳中蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與其所含氨基酸的種類及其比例有關(guān)，驢乳含有成年人需要的Met、Phe、Thr、Try、Val、Leu、Ile及Lys等8種EAA。EAA/NEAA和EAA/TAA可反映驢乳的蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，其值越大，說(shuō)明驢乳的氨基酸平衡性越好；LAA是指乳中所含EAA的量與人體所需蛋白質(zhì)的EAA的量相比，比值偏低的氨基酸，由于這些氨基酸的不足，限制了人體對(duì)其他EAA和NEAA的利用；BCAA包括Ile、Leu和Val，在動(dòng)物體內(nèi)參與機(jī)體蛋白質(zhì)的合成，本身不作為生物活性物質(zhì)的前體參與機(jī)體代謝，但其中間代謝產(chǎn)物具有生糖、生酮功能，因此在氨基酸合成代謝中均有重要作用[16]；DAA的含量與比例決定了畜產(chǎn)品的風(fēng)味，主要包括Gly、Glu、Tyr、Ala、Asp等。本研究結(jié)果顯示，適當(dāng)增加飼糧蛋白質(zhì)水平可提高驢乳中EAA、NEAA、TAA、LAA、DAA和BCAA的含量及EAA/NEAA、EAA/TAA，提示驢乳蛋白質(zhì)的氨基酸平衡性得到改善，但其機(jī)制尚不清楚。張娜娜[17]在湖羊上的研究指出，妊娠期飼喂不同蛋白質(zhì)水平的飼糧，其初乳乳清蛋白質(zhì)的組成發(fā)生了顯著變化，這可能是本研究中母驢乳蛋白質(zhì)的氨基酸平衡性發(fā)生變化的原因之一，但目前相關(guān)研究尚未見報(bào)道，還需今后深入探討。

此外，與牛乳、羊乳和駱駝乳相比，驢乳的EAA/NEAA升高，但EAA/TAA相近(牛乳：0.407；羊乳：0.420；駱駝乳：0.414)[18]，說(shuō)明與其他乳畜比，驢乳是一種氨基酸豐富且平衡性好的乳產(chǎn)品。從產(chǎn)后時(shí)間的影響來(lái)看，產(chǎn)后2、6 h驢乳蛋白質(zhì)的氨基酸平衡性較其他時(shí)間差，這可能與產(chǎn)后2、6 h驢乳的蛋白質(zhì)中含有較多的免疫球蛋白有關(guān)。

4 結(jié) 論

適當(dāng)提高妊娠后期母驢飼糧蛋白質(zhì)水平可以提高驢初乳中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、EAA(除Met)和部分NEAA(Asp、Ala、Tyr、Arg、Ser、Pro及Gly)的含量以及EAA/NEAA與EAA/TAA；驢乳中干物質(zhì)、脂肪、蛋白質(zhì)及各氨基酸含量隨著產(chǎn)后時(shí)間的延長(zhǎng)而降低，以產(chǎn)后2 h最高，產(chǎn)后6～12 h迅速降低，從產(chǎn)后24 h開始降低趨于平緩，產(chǎn)后14 d最低。