從光雷 肖蘊祺 張倩雲, 王志躍 張 珊 燕 磊 梁明振 施壽榮*
(1.中國農業科學院家禽研究所,揚州 225125;2.揚州大學動物科學與技術學院,揚州 225009;3.廣西大學動物科學技術學院,南寧 530004;4.山東新希望六和集團有限公司,青島 266061)
隨著畜牧業快速發展,長期低劑量預防用藥或過量使用、濫用抗生素等因素,造成畜禽體內藥物殘留和蓄積毒素、細菌產生耐藥性、動物免疫力下降等問題日益突出。因此,我國農業農村部于2019年7月發布第194號公告,自2020年7月1日起,飼料生產企業停止生產含有促生長類藥物飼料添加劑(中藥類除外)的商品飼料。開發天然、綠色、無毒副殘留的抗生素替代物已刻不容緩。
化香果(PlotytaryastrohilaceaSieb. et Zuce)又稱化香樹果,是胡桃科植物化香樹的果序。果序呈長橢圓狀,萼片宿存,褐色。化香樹在我國分布廣泛,在我國民間的應用廣且歷史悠久,多以葉、果序入藥[1]。化香果序中含有較豐富的植物單寧。化香果單寧屬于鞣花單寧,主要成分為英國櫟鞣花素、木麻黃亭,均由2個六羥基聯苯二酰基與葡萄糖形成的酯。鞣花單寧經過水解可以得到鞣花酸。化香果單寧具有特殊的生物學和藥理學活性,藥用價值較高[2]。已知國內外文獻對化香果序提取物及藥理學活性的研究,多集中在化香樹及其果序提取的化香果單寧對抑制細胞毒性和腸道內有害菌,抗氧化、預防癌癥和抗衰老作用,以及作為復方中藥治療急性慢性鼻炎和鼻竇炎的報道[3-4]。可見化香果單寧具有替代抗生素的潛力,但作為家禽飼料添加劑的研究尚未見報道。因此,本試驗旨在研究飼糧添加化香果單寧對肉雞生長性能、屠宰性能、器官指數、肉品質、抗氧化功能和腸道發育的影響,為化香果單寧在家禽生產中的應用提供科學依據。
試驗用愛拔益加(AA)肉雞購自江蘇京海禽業集團有限公司。化香果單寧(單寧含量≥65%,粉末狀,棕褐色)由中國林業科學研究院林產化學工業研究所植物單寧化學利用課題組提供。
選取1日齡雄性AA肉雞288羽,隨機分為4組,每組6個重復,每個重復12羽。對照組(PT0組)飼喂基礎飼糧,試驗組分別在基礎飼糧中添加100(PT100組)、500(PT500組)和1 000 mg/kg(PT1 000組)化香果單寧。試驗期42 d。
試驗在中國農業科學院家禽研究所儀征試驗基地開展,試驗雞采用網上平養模式,自由采食和飲水,試驗初始溫度34 ℃,隨后每周降低2~3 ℃,直至降至24 ℃。每天24 h光照。通風和免疫等其他管理措施按飼養管理手冊執行。基礎飼糧按照NRC(1994)肉雞營養需求配制并制粒,基礎飼糧組成及營養水平見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養水平(風干基礎)
1.4.1 生長性能
在1、21和42日齡分別稱重,記錄剩余料重。分別計算1~21日齡、22~42日齡和1~42日齡各組肉雞的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。
1.4.2 屠宰性能
42日齡時,每個重復隨機選取1羽,測定宰前重、屠體重、全凈膛重、胸肌重、腿重、翅膀重、爪重、腹脂重和腹部脂帶寬,并計算屠宰率、全凈膛率、胸肌率、腿比率、翅膀率、爪重率和腹脂率。計算公式如下:
屠宰率(%)=100×屠體重(g)/宰前體重(g);全凈膛率(%)=100×全凈膛重(g)/宰前體重(g);腿比率(%)=100×兩側腿重(g)/全凈膛重(g);翅膀率(%)=100×兩側翅膀重(g)/全凈膛重(g);胸大(小)肌率(%)=100×兩側胸大(小)肌重(g)/全凈膛重(g);爪重率(%)=100×[雙爪重(g)/(全凈膛重(g)+雙爪重(g)];腹脂率(%)=100×[腹脂重(g)/(全凈膛重(g)+腹脂重(g)]。
1.4.3 器官指數
21和42日齡時,每個重復隨機選取1羽進行屠宰,解剖取出心臟、胰腺、肝臟(無膽囊)、腺胃和肌胃(去除內容物及內金)稱重,按照公式計算器官指數:
器官指數(%)=100×器官鮮重(g)/宰前活重(g)。
1.4.4 肉品質
42日齡時,每個重復隨機選取1羽,將其屠宰解剖后,統一取左側整塊胸肌。根據《畜禽肉質的測定》(NY/T 1333—2007)測定肉雞胸肌系水力、pH24 h和肉色;按照《肉嫩度的測定剪切力測定法》(NY/T 1180—2006)測定肉雞胸肌剪切力。
1.4.5 肌肉抗氧化指標
測定21和42日齡肉雞胸肌中過氧化氫酶(CAT)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性及總抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量,所用試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。
1.4.6 腸道校正長度和指數
21和42日齡時,每個重復隨機選取1羽,屠宰后測量十二指腸和盲腸(兩側)的長度和重量(去除內容物),計算十二指腸和盲腸的校正長度以及十二指腸和盲腸指數。
腸道指數(%)=100×腸道重量(g)/宰前活重(kg);腸道校正長度(cm/kg)=腸道長度(cm)/宰前活重(kg)。
1.4.7 腸道黏膜形態結構
21和42日齡時,每個重復隨機選取1羽,屠宰后迅速剪取空腸和回腸中段各1 cm左右,放入10%甲醛溶液中固定,24 h后更換新的10%甲醛溶液。石蠟包埋,連續切片,片厚5 μm,進行規蘇木精-伊紅(HE)染色后運用萊卡(Leica)圖像處理系統,于顯微鏡(DM4000B,Leica Microsystems,德國)下觀測切片,測定絨毛高度(villus height)和隱窩深度(crypt depth),計算絨毛高度/隱窩深度(V/C)。
試驗數據采用SPSS 20.0軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA)和線性、二次分析,組間采用LSD法進行多重比較檢驗。結果用平均值和均值標準誤(SEM)表示,P<0.05表示顯著差異,0.05≤P<0.10表示有趨勢。
由表2可知,PT100組1~21日齡肉雞的ADFI顯著低于PT0組(P<0.05),且ADFI與化香果單寧添加量呈顯著二次相關(P<0.05)。與PT0組相比,PT100組22~42日齡肉雞的料重比有降低趨勢(P=0.068)。

表2 飼糧添加化香果單寧對肉雞生長性能的影響
由表3可知,飼糧添加化香果單寧對肉雞屠宰性能無顯著影響(P>0.05)。

表3 飼糧添加化香果單寧對肉雞屠宰性能的影響
由表4可知,PT1 000組42日齡肉雞肌胃指數顯著低于其他各組(P<0.05),且肌胃指數與化香果單寧添加量呈顯著二次相關(P<0.05)。

表4 飼糧添加化香果單寧對肉雞器官指數的影響
由表5可知,飼糧添加化香果單寧對肉雞肉品質無顯著影響(P>0.05)。

表5 飼糧添加化香果單寧對肉雞肉品質的影響
由表6可知,42日齡時,PT500和PT1 000組肉雞胸肌T-SOD活性顯著高于PT0組(P<0.05),且胸肌T-SOD活性與化香果單寧添加量呈顯著線性相關(P<0.05)。

表6 飼糧添加化香果單寧對肉雞胸肌抗氧化指標的影響
由表7可知,飼糧添加化香果單寧對肉雞腸道校正長度和指數無顯著影響(P>0.05)。

表7 飼糧添加化香果單寧對肉雞腸道校正長度和指數的影響
由表8可知,21日齡時,PT500組肉雞空腸絨毛高度顯著高于其他各組(P<0.05),且空腸絨毛高度與化香果單寧添加量呈顯著線性相關(P<0.05)。42日齡時,PT100、PT500和PT1 000組肉雞空腸絨毛高度顯著高于PT0組(P<0.05),且空腸絨毛高度與化香果單寧添加量呈顯著線性和二次相關(P<0.05)。

表8 飼糧添加化香果單寧對肉雞空腸黏膜形態結構的影響
由表9可知,42日齡時,PT0和PT100組肉雞回腸V/C顯著高于PT500組(P<0.05),且回腸V/C與化香果單寧添加量呈顯著線性相關(P<0.05)。

表9 飼糧添加化香果單寧對肉雞回腸黏膜形態結構的影響

屠宰性能可直觀地反映出動物體構成和可食部分的比例,是衡量動物生長性能的重要指標之一[11]。屠宰率和全凈膛率分別在80%和60%以上,則表示肉雞的產肉性能良好[12]。Jamroz等[13]研究表明,飼糧添加甜栗木單寧未對肉雞屠宰性能造成顯著影響。劉嬌等[14]研究發現,飼糧添加辣木提取物(富含黃酮類化合物)未對肉雞屠宰性能造成顯著影響。本試驗結果發現,飼糧添加化香果單寧對肉雞屠宰性能未造成顯著影響,各組的屠宰率和全凈膛率分別在92%和78%以上。與前人研究結果[13-14]一致,表明化香果單寧對肉雞屠宰性能無負面影響。
器官指數能夠在一定程度上反映肉雞發育狀況,對于理論研究和生產實踐有重要意義。劉嬌等[15]研究表明,飼糧添加辣木提取物(富含黃酮類化合物)對肉雞器官指數均未造成顯著影響。本試驗結果與之相似,飼糧添加化香果單寧對肉雞胰腺、肝臟和腺胃指數均無顯著影響。另外,飼糧添加適量化香果單寧能夠提高肌胃指數,表明化香果單寧對肉雞肌胃發育具有促進作用。
肌肉pH、肉色、系水力和嫩度等指標能夠更加直觀地綜合反映肉品質,也能夠決定消費者的消費取向。肌肉系水力是肌肉組織保持水分的能力,是評價家禽肉品質的重要指標之一[16]。本試驗結果表明,飼糧添加化香果單寧未對胸肌肉系水力造成顯著影響。Przywitowski等[17]研究發現,飼糧添加單寧對火雞胸肌系水力并無顯著影響,這與本試驗得到的結果一致。肉雞宰后肌肉的pH變化反映了肌肉內能量和物質的代謝變化過程,此過程肌肉pH會逐漸降低,較低的pH可以抑制破壞性微生物的大量繁殖,防止肉腐敗[18]。Jung等[19]研究發現,肉雞飼糧中添加沒食子酸和共軛亞油酸復合物對肌肉pH無顯著差異。Przywitowski等[17]研究發現,在火雞飼糧中添加蠶豆單寧對胸肌pH無顯著影響。本試驗中,飼糧添加化香果單寧未對肌肉pH24 h造成顯著影響,這與前人研究結果[18-20]一致。肉色和嫩度都是評價肉質的重要指標,本試驗結果表明,飼糧添加化香果單寧未對肉雞肉色和嫩度造成顯著影響。綜上所述,飼糧添加化香果單寧對肉雞肉品質相關指標均未造成顯著影響。
植物單寧具有抗氧化的生物學功能,其能夠有效清除體內氧自由基,提高抗氧化酶活性,降低體內氧化應激水平[7,15]。CAT和T-SOD均是機體中的抗氧化酶之一,能夠清除體內的氧自由基。T-AOC則是反映機體抗氧化系統的綜合指標。Chamorro等[21]研究表明,肉雞飼糧中添加10%葡萄渣(主要成分為植物單寧)能夠增強肉雞的抗氧化性能,延緩脂質氧化。Farahat等[22]也研究表明,在肉雞飼糧中添加植物單寧(單寧含量≥40%)能夠顯著提高肝臟谷胱甘肽含量,降低肌肉MDA含量。本試驗結果發現,飼糧添加化香果單寧能夠顯著提高42日齡肉雞的胸肌T-SOD活性,且化香果單寧與肉雞胸肌T-SOD活性呈劑量依賴關系。這與前人研究結果[21-22]一致,表明飼糧添加化香果單寧能夠提高肉雞的抗氧化功能。
腸道是肉雞消化吸收的主要器官。各腸段長度及重量反映了腸段的生長發育程度,而發育程度又能反映消化吸收的功能。本試驗以腸道校正長度和指數來評價腸道生長發育狀況。已有研究發現,飼糧添加適量的單寧能夠通過減輕氧化應激,促進腸道有益菌繁殖,抑制有害菌繁殖,從而保護和促進腸道發育[19,23]。本試驗結果發現,飼糧添加化香果單寧未對肉雞腸道校正長度和指數造成顯著影響,這與前人研究結果[19,23]并不一致。可能是添加的單寧提取來源和活性成分濃度不同導致的差異,具體機制有待進一步研究。
腸道絨毛高度、隱窩深度和V/C是衡量腸道消化吸收能力的重要指標之一。已有研究發現,肉雞飼糧中添加橡椀單寧能夠提高42日齡肉雞空腸和回腸絨毛高度[15]。Brus等[24]研究發現,飼糧添加低濃度的鞣花單寧能夠刺激腸道上皮細胞增殖,促進肉雞腸道發育。本試驗結果與之相似,飼糧添加適量化香果單寧能夠顯著提高21和42日齡肉雞空腸絨毛高度,并且空腸絨毛高度與單寧添加量呈顯著線性相關。另外,肉雞回腸V/C與化香果單寧添加量呈顯著線性相關。這與本試驗生長性能相對應,肉雞ADFI降低,AGD卻未降低,推測化香果單寧能夠提高肉雞小腸吸收營養物質的面積,從而減輕化香果單寧苦澀味帶來的負面影響。這可能是由于低劑量的化香果單寧能夠促進腸道上皮細胞增殖,保護細胞增殖過程DNA完整性,從而促進腸道健康發育,有益于生長性能。
飼糧添加化香果單寧能夠提高肉雞抗氧化功能、空腸絨毛高度和回腸V/C,降低1~21日齡肉雞ADFI,且具有降低22~42日齡肉雞料重比的趨勢。綜合各項指標,化香果單寧在肉雞飼糧中的推薦添加量為500 mg/kg。