殼寡糖對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能、肉品質(zhì)、抗氧化功能以及免疫功能的影響

蘇維發(fā) 周洪彬 蔣登湖 劉 鑫 汪以真 王新霞 路則慶*

(1.浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，生物飼料安全與污染防控國(guó)家工程試驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)部華東動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料重點(diǎn)試驗(yàn)室，浙江省飼料與動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)重點(diǎn)試驗(yàn)室，杭州 310058；2.大連成三畜牧業(yè)有限公司，大連 116000)

現(xiàn)代集約化養(yǎng)殖模式下，“飼料禁抗”與非洲豬瘟給生豬健康養(yǎng)殖帶來(lái)嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。具有抗菌抗炎、提高免疫力和增強(qiáng)抗氧化能力的綠色飼料添加劑的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用是提升豬只健康水平和改善肉品質(zhì)的重要手段，也是飼料營(yíng)養(yǎng)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。殼寡糖(chitosan oligosaccharide，COS)是甲殼素脫乙酰后的殼聚糖經(jīng)降解而得的2～10個(gè)氨基葡萄糖通過(guò)β-1，4-糖苷鍵連接而成的低聚糖。COS具有黏度低、水溶性好的優(yōu)點(diǎn)，能夠更好地被細(xì)胞吸收利用[1]，從而更好地發(fā)揮其抗炎、抗菌、抗氧化和免疫調(diào)節(jié)等生物學(xué)功能[2-4]，在提高動(dòng)物生產(chǎn)性能、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能以及調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道菌群平衡等方面發(fā)揮著重要作用[5]。

COS在動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)中的應(yīng)用多在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)和家禽業(yè)，對(duì)豬的研究則主要集中斷奶仔豬與母豬，COS對(duì)豬生長(zhǎng)育肥階段的影響則報(bào)道較少。而生長(zhǎng)育肥階段是商品豬養(yǎng)殖周期中持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng)的階段，也是直接影響肉品質(zhì)優(yōu)劣的關(guān)鍵時(shí)期。因此，本研究旨在探索COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能、肉品質(zhì)、抗氧化功能以及免疫功能的影響，在此基礎(chǔ)上探討添加COS能否降低生產(chǎn)成本，提高經(jīng)濟(jì)效益，為COS在生豬產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)COS以米糠粕為載體，添加COS混合物300 mg/kg，COS的有效含量為10%，由某生物科技有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物和試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取體重[(37.00±1.55) kg]相近“杜×長(zhǎng)×大”生長(zhǎng)豬225頭，隨機(jī)分成3組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25頭。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，COS組飼喂添加30 mg/kg COS的基礎(chǔ)飼糧，低能低蛋白質(zhì)+COS組飼喂添加30 mg/kg COS的低能低蛋白質(zhì)飼糧(粗蛋白質(zhì)含量降低1個(gè)百分點(diǎn)，消化能降低0.21 MJ/kg)。基礎(chǔ)飼糧參照NRC(2012)營(yíng)養(yǎng)需要配制，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。飼糧按試驗(yàn)期分3個(gè)階段：生長(zhǎng)期(30～65 kg)、育肥前期(66～90 kg)和育肥后期(91 kg至出欄)。試驗(yàn)前對(duì)豬舍進(jìn)行消毒，試驗(yàn)期間每天06:00、11:00和17:00飼喂3次，自由采食，自由飲水。試驗(yàn)期98 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定

試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)，以欄(重復(fù))為單位測(cè)定各組試驗(yàn)豬空腹體重，統(tǒng)計(jì)每個(gè)重復(fù)試驗(yàn)豬的總采食量，并計(jì)算平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.3.2 樣品采集與處理

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，禁食12 h后，每組選取6頭體重接近平均體重的試驗(yàn)豬頸靜脈采血后屠宰，血液樣品于促凝管中室溫放置30 min，離心(3 000 r/min，15 min)，分裝血清于1.5 mL離心管，儲(chǔ)存在-20 ℃，用于血清免疫和抗氧化指標(biāo)的檢測(cè)。取每頭豬的肝臟組織，采用磷酸鹽緩沖液(PBS)清洗，迅速切小塊并轉(zhuǎn)移至液氮中，存于-80 ℃，用于肝臟抗氧化相關(guān)基因表達(dá)的測(cè)定。試驗(yàn)豬屠宰后，分離并取出背最長(zhǎng)肌用于肉品質(zhì)的檢測(cè)。

1.3.3 肉品質(zhì)測(cè)定

肌肉pH24 h和滴水損失的測(cè)定參照《豬肌肉品質(zhì)測(cè)定技術(shù)規(guī)范》(NY/T 821—2004)進(jìn)行測(cè)定，肌肉肉色采用色差儀檢測(cè)背最長(zhǎng)肌亮度(L*)、紅度(a*)和黃度(b*)值，肌肉樣品的剪切力參照《肉嫩度的測(cè)定剪切力測(cè)定法》(NY/T 1180—2006)進(jìn)行測(cè)定，肌苷酸含量采用高效液相色譜儀分析測(cè)定。

肌肉樣品中水解氨基酸的測(cè)定方法：稱(chēng)取0.5 g樣品裝于安培瓶中，加入10 mL 6 mol/L的鹽酸溶液，封口。105 ℃恒溫烘箱，水解24 h。冷卻后轉(zhuǎn)移至蒸餾瓶中，用0.02 mol/L鹽酸溶液沖洗安培瓶中殘留的溶液2～3次，調(diào)節(jié)65 ℃水浴鍋至蒸發(fā)干。移取20 mL 0.02 mol/L鹽酸溶液至蒸餾瓶中，溶解后取2 mL溶液于25 mL容量瓶中，用上述鹽酸溶液定容。取合適量過(guò)濾后用L-8900型氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)定肌肉樣品中水解氨基酸的含量。

1.3.4 血清免疫指標(biāo)檢測(cè)

血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、補(bǔ)體3(C3)和補(bǔ)體4(C4)含量的測(cè)定嚴(yán)格按照深圳邁瑞提供的試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。IgA、IgG和IgM試劑盒檢測(cè)范圍分別為0.025～0.800 g/L、2～20 g/L和0.4～2.6 g/L，最低檢出限為0.01、0.5和0.05 g/L；C3和C4試劑盒檢測(cè)范圍分別為0.01～3.00 g/L和0.005～2.000 g/L，最低檢出限分別為0.005和0.002 g/L。

1.3.5 血清抗氧化指標(biāo)檢測(cè)

血清總抗氧化能力(T-AOC)的測(cè)定采用鐵離子還原法，血清丙二醛(MDA)含量的測(cè)定采用硫代巴比妥酸比色法。測(cè)定均采用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒，2種試劑盒檢測(cè)范圍分別為0.2～55.2 U/mL和1～113 nmol/mL，最低檢出限分別為0.2 U/mL和0.2 nmol/mL。

1.3.6 肝臟抗氧化相關(guān)基因表達(dá)測(cè)定

采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)肝臟抗氧化基因谷胱甘肽過(guò)氧化物酶1(GPx1)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶4(GPx4)、銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)和p53的mRNA相對(duì)表達(dá)量。肝臟組織中總RNA的提取和質(zhì)量檢測(cè)參照井洋洋等[6]的方法進(jìn)行。然后根據(jù)cDNA合成試劑盒[生工生物工程(上海)股份有限公司]合成cDNA，-20 ℃保存。利用Applied Biosystems 公司StepOne PlusTM儀器進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，引物序列見(jiàn)表2，由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)體系為10 μL：SYBR Premix Ex TaqTMⅡ(TaKaRa，日本) 5 μL，上游、下游引物各0.5 μL，cDNA 4 μL。PCR擴(kuò)增條件為：95 ℃，10 s；60 ℃，30 s，共40個(gè)循環(huán)。內(nèi)參基因?yàn)棣?肌動(dòng)蛋白(β-actin)，目的基因mRNA相對(duì)表達(dá)量的計(jì)算采用2-△△Ct法。

表2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物序列

1.3.7 十二指腸、空腸和回腸腸道黏膜形態(tài)分析

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，禁食12 h后，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇2頭試驗(yàn)豬屠宰，按組織學(xué)準(zhǔn)確區(qū)分各腸段，然后分別取試驗(yàn)豬的十二指腸近端、空腸中段和回腸遠(yuǎn)端各2 cm，在PBS中將腸斷的內(nèi)容物漂洗干凈后，用4%多聚甲醛固定液固定。之后進(jìn)行脫水、石蠟包埋、切片及蘇木精-伊紅(HE)染色。使用光學(xué)顯微鏡(Carl Zeiss，德國(guó))觀察HE染色后的腸道組織切片，然后用軟件Motic Images 2000進(jìn)行不同腸斷切片絨毛高度和隱窩深度的測(cè)量，并計(jì)算絨毛高度與隱窩深度的比值。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，P<0.05表示差異顯著，數(shù)據(jù)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，COS組生長(zhǎng)育肥豬平均日增重?zé)o顯著差異(P>0.05)，但料重比顯著降低了4.7%(P<0.05)；而低能低蛋白質(zhì)+COS組生長(zhǎng)育肥豬平均日增重和料重比均無(wú)顯著差異(P>0.05)。這表明，在適當(dāng)降低飼糧粗蛋白質(zhì)和消化能水平的情況下，飼糧添加30 mg/kg COS可在降低飼糧成本的前提下不影響生長(zhǎng)育肥豬的生長(zhǎng)性能。

表2 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬肉品質(zhì)的影響

由表3可知，各組生長(zhǎng)育肥豬屠宰后背最長(zhǎng)肌24 h的pH均在正常值5.6～6.0，且差異不顯著(P>0.05)。在肉色方面，與對(duì)照組相比，COS組生長(zhǎng)育肥豬背最長(zhǎng)肌L*值顯著降低(P<0.05)，背最長(zhǎng)肌a*值和b*值無(wú)顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比，COS組和低能低蛋白質(zhì)+COS組生長(zhǎng)育肥豬背最長(zhǎng)肌滴水損失和剪切力均無(wú)顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比，COS組與低能低蛋白質(zhì)+COS組生長(zhǎng)育肥豬背最長(zhǎng)肌肌苷酸含量顯著提高了24.4%和19.6%(P<0.05)。

表3 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬肉品質(zhì)的影響

對(duì)于水解氨基酸而言，由表4可知，與對(duì)照組相比，COS組生長(zhǎng)育肥豬背最長(zhǎng)肌谷氨酸、苯丙氨酸和丙氨酸含量顯著提高(P<0.05)，而低能低蛋白質(zhì)+COS組與對(duì)照組相比則無(wú)顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比，COS組和低能低蛋白質(zhì)+COS組生長(zhǎng)育肥豬背最長(zhǎng)肌異亮氨酸含量均顯著降低(P<0.05)。

表4 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬背最長(zhǎng)肌水解氨基酸組成的影響

2.3 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬抗氧化功能的影響

由圖1可知，與對(duì)照組相比，COS組生長(zhǎng)育肥豬血清T-AOC顯著提高(P<0.05)，而低能低蛋白質(zhì)+COS組則無(wú)顯著差異(P>0.05)。同樣，與對(duì)照組相比，COS組生長(zhǎng)育肥豬血清MDA含量顯著降低(P<0.05)，而低能低蛋白質(zhì)+COS組則無(wú)顯著差異(P>0.05)。

數(shù)據(jù)柱形標(biāo)注不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)。圖2同。

由圖2可知，與對(duì)照組相比，COS組生長(zhǎng)育肥豬肝臟GPx1 mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著提高(P<0.05)，COS組和低能低蛋白質(zhì)+COS組生長(zhǎng)育肥豬肝臟GPx4 mRNA相對(duì)表達(dá)量均顯著提高(P<0.05)。此外，COS組生長(zhǎng)育肥豬肝臟p53 mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，而COS組和低能低蛋白質(zhì)+COS組生長(zhǎng)育肥豬肝臟Cu/Zn-SODmRNA相對(duì)表達(dá)量與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

圖2 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬肝臟抗氧化相關(guān)基因表達(dá)的影響

2.4 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬免疫功能的影響

由表5可知，與對(duì)照組相比，COS組生長(zhǎng)育肥豬血清IgG和IgM含量顯著提高(P<0.05)，低能低蛋白質(zhì)+COS組生長(zhǎng)育肥豬血清IgM含量顯著提高(P<0.05)；其中，COS組血清IgG含量比對(duì)照組提高了15.0%(P<0.05)，血清IgM含量提高了6.0%(P<0.05)。此外，與對(duì)照組相比，COS組和低能低蛋白質(zhì)+COS組生長(zhǎng)育肥豬血清C4含量均顯著提高(P<0.05)，而COS組和低能低蛋白質(zhì)+COS組生長(zhǎng)育肥豬血清C3含量均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表5 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬免疫功能的影響

2.5 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬腸道黏膜形態(tài)的影響

由圖3和表6可知，COS組和低能低蛋白質(zhì)+COS組生長(zhǎng)育肥豬十二指腸、空腸和回腸絨毛高度和隱窩深度與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比，COS組生長(zhǎng)育肥豬十二指腸絨毛高度與隱窩深度的比值顯著提高(P<0.05)，而低能低蛋白質(zhì)+COS組十二指腸、空腸和回腸絨毛高度與隱窩深度的比值與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表6 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬腸道黏膜形態(tài)的影響

圖3 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬腸道黏膜形態(tài)的影響

3 討 論

3.1 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

目前，COS對(duì)豬生長(zhǎng)性能影響的研究多集中在仔豬上，在生長(zhǎng)育肥豬中的研究較少，而生長(zhǎng)育肥階段是商品豬養(yǎng)殖周期中持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng)、消耗飼糧最多的階段，因此，研究COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬飼料轉(zhuǎn)化率以及生長(zhǎng)性能的影響具有重要意義。Yang等[7]研究表明，飼糧添加0.04%和0.06%COS均可顯著提高斷奶仔豬的平均日增重；魏亞浩等[8]研究表明，仔豬飼糧添加COS復(fù)合物能夠提高仔豬平均日采食量和平均日增重；Liu等[9]也研究表明，飼糧添加100和200 mg/kg COS能夠顯著提高斷奶仔豬平均日采食量和平均日增重，降低料重比，同時(shí)能夠顯著提高斷奶仔豬對(duì)飼糧總能、干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)的消化率；Walsh等[10]在斷奶仔豬飼糧中添加不同分子量的COS，發(fā)現(xiàn)分子量在5～50 ku的COS能夠顯著提高斷奶仔豬平均日增重和降低料重比，同時(shí)能提高糞便中乳酸菌數(shù)量和降低大腸桿菌數(shù)量。以上研究均提示COS在改善仔豬生長(zhǎng)性能方面具有良好的效果。在生長(zhǎng)育肥豬上，楊偉麗等[11]研究表明，飼糧添加40 mg/kg低聚殼聚糖能夠顯著提高生長(zhǎng)育肥豬平均日采食量，可在一定程度上提高平均日增重和降低料重比。本研究結(jié)果表明，基礎(chǔ)飼糧中添加30 mg/kg COS能夠顯著降低生長(zhǎng)育肥豬料重比，提高飼料利用率；同時(shí)，在低能低蛋白質(zhì)飼糧中添加30 mg/kg COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬的平均日增重和料重比均無(wú)顯著影響，這表明在降低飼料生產(chǎn)成本的前提下，添加COS具有良好的經(jīng)濟(jì)效益。COS對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能的改善作用可能與其對(duì)腸道功能的改善有關(guān)。研究表明，COS能夠增強(qiáng)腸道消化吸收功能、改善腸道微生物環(huán)境和改善腸道形態(tài)，以此達(dá)到提高飼料利用率的效果[12]。

3.2 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬肉品質(zhì)的影響

近年來(lái)豬肉品質(zhì)越來(lái)越受到消費(fèi)者關(guān)注，肉品質(zhì)主要由肌肉的理化特性所決定，其化學(xué)組成與肌肉的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值密切相關(guān)，而物理指標(biāo)如系水力、嫩度和肉色等則直接影響著消費(fèi)者對(duì)肌肉的感官感受。肌苷酸是肌肉在熟化過(guò)程中產(chǎn)鮮味的重要物質(zhì)，也是肌肉中提供鮮味最重要的物質(zhì)之一。Koohmaraie等[13]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加COS可提高肉仔雞肌肉中肌苷酸的含量，進(jìn)而提高肌肉風(fēng)味。本試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)，生長(zhǎng)育肥豬飼糧添加30 mg/kg COS可顯著提高背最長(zhǎng)肌中肌苷酸的含量。對(duì)于氨基酸而言，常將天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸這6種具有鮮味的氨基酸稱(chēng)為鮮味氨基酸。呂成才等[14]報(bào)道了在黃河鯉魚(yú)飼糧中添加不同水平COS改變了肌肉氨基酸的組成；董琦等[15]報(bào)道了在刺參餌料中添加0.5% COS能夠改變刺參體壁氨基酸組成。本試驗(yàn)結(jié)果表明，基礎(chǔ)飼糧添加COS能夠提高生長(zhǎng)育肥豬背最長(zhǎng)肌中谷氨酸、苯丙氨酸和丙氨酸這3種鮮味氨基酸的含量。Yin等[16]研究表明，在生長(zhǎng)豬飼糧中添加0.01%COS能夠促進(jìn)氨基酸進(jìn)入門(mén)靜脈，提高生長(zhǎng)豬機(jī)體蛋白質(zhì)合成，其潛在的機(jī)制可能與COS調(diào)控后腸菌群參與氨基酸的代謝有關(guān)。相關(guān)報(bào)道也提出低聚木糖可能通過(guò)調(diào)控后腸菌群的氨基酸和蛋白質(zhì)代謝，進(jìn)而影響生長(zhǎng)育肥豬肌肉氨基酸的組成[17-18]。此外，李陽(yáng)[19]研究表明，飼糧添加120 mg/kg COS顯著提高肉雞肌肉a*值。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加COS顯著降低生長(zhǎng)育肥豬背最長(zhǎng)肌L*值，改善肉色。脂質(zhì)氧化是影響肉品質(zhì)的重要因素，并影響諸如味道、香氣、顏色、質(zhì)地和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值等屬性[20]，COS抗氧化作用可能是其改善肉質(zhì)的重要的原因之一。目前關(guān)于COS對(duì)肉品質(zhì)改善的作用機(jī)理尚不明確，有待進(jìn)一步研究。

3.3 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬抗氧化功能的影響

在生長(zhǎng)育肥豬養(yǎng)殖過(guò)程中，許多因素會(huì)導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生大量自由基，當(dāng)機(jī)體處在正常的代謝狀態(tài)時(shí)，機(jī)體會(huì)處在不斷產(chǎn)生自由基與清除自由基的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)。而在養(yǎng)殖過(guò)程中此動(dòng)態(tài)平衡被破壞時(shí)，如飼料污染、高溫、高代謝負(fù)擔(dān)以及長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)輸?shù)染鶗?huì)造成機(jī)體產(chǎn)生過(guò)多的自由基，而過(guò)多的自由基會(huì)與組織、血液或細(xì)胞等相結(jié)合，造成氧化損傷，影響動(dòng)物機(jī)體的免疫功能[21-22]。COS抗氧化性的研究表明，COS清除自由基的能力會(huì)隨著COS水平的提高而增強(qiáng)，其作用機(jī)制可能是COS分子中的銨根離子所提供的單電子是清除自由基的根源。申杰等[23]在對(duì)COS保護(hù)小鼠肝臟的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，COS可降低小鼠血清MDA含量，并可顯著抑制由高血脂導(dǎo)致的脂質(zhì)過(guò)氧化物大量堆積而對(duì)肝臟的氧化損傷。陳偉軍等[24]報(bào)道了飼糧中添加COS能夠提高凡納濱對(duì)蝦血清T-AOC和超氧化物歧化酶(SOD)活性，降低肌肉組織中的MDA含量。Xie等[25]研究表明，妊娠母豬飼糧中添加COS可顯著提高血漿SOD活性，血漿MDA含量呈下降趨勢(shì)，胎盤(pán)組織中抗氧化基因，如Cu/Zn-SOD和過(guò)氧化氫酶(CAT)的mRNA表達(dá)量提高，提示妊娠后期母豬飼糧中添加COS可增強(qiáng)母豬的抗氧化功能。在斷奶仔豬上，劉媛媛等[26]研究表明，飼糧添加COS能夠顯著提高斷奶仔豬血清SOD、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性和T-AOC，改善機(jī)體的抗氧化功能。本試驗(yàn)結(jié)果表明，基礎(chǔ)飼糧添加COS可顯著提高生長(zhǎng)育肥豬血清T-AOC，并顯著降低血清MDA含量；在肝臟抗氧化指標(biāo)方面，本試驗(yàn)結(jié)果也表明，COS組生長(zhǎng)育肥豬肝臟抗氧化基因GPx1、GPx4和p53的mRNA相對(duì)表達(dá)量均顯著提高。這些結(jié)果提示COS能夠提高生長(zhǎng)育肥豬機(jī)體抗氧化功能，從而緩解生長(zhǎng)育肥豬在養(yǎng)殖過(guò)程中氧化應(yīng)激對(duì)機(jī)體造成的損傷。

3.4 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬免疫功能的影響

血清中免疫球蛋白和補(bǔ)體的含量可反映機(jī)體免疫能力的強(qiáng)弱。免疫球蛋白是體液免疫應(yīng)答中的重要免疫成分，在抗原刺激的情況下可轉(zhuǎn)為抗體，發(fā)揮抗菌、抗病毒的功能[27]。機(jī)體補(bǔ)體系統(tǒng)是免疫系統(tǒng)中重要的部分，C3是激活補(bǔ)體途徑中重要的中心環(huán)節(jié)，C4是激活補(bǔ)體途徑中的重要組成成分，可協(xié)同抗體發(fā)揮對(duì)病原微生物的清除作用。COS能夠作用于機(jī)體免疫器官和免疫細(xì)胞，并影響相關(guān)免疫細(xì)胞因子的表達(dá)和分泌從而調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫。劉瑩瑩等[28]研究表明，母豬飼糧中添加低聚殼聚糖能夠提高母豬初乳中IgG、IgA和IgM含量，同時(shí)提高仔豬血清IgG和IgA含量。Ho等[29]也報(bào)道了在母豬妊娠后期補(bǔ)充COS會(huì)顯著提高母豬和仔豬血清IgM、分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量及母豬糞便中sIgA含量。陳虹等[30]在鵪鶉飼糧中添加COS可以顯著提高鵪鶉血清C3含量。孫夢(mèng)潔[31]研究發(fā)現(xiàn)，在俄羅斯鱘基礎(chǔ)飼糧中添加COS也能夠顯著提高血清C3含量。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加30 mg/kg COS也可顯著提高生長(zhǎng)育肥豬血清中IgG和IgM的含量，同時(shí)也顯著提高血清C4含量；此外，在低能低蛋白質(zhì)飼糧中添加30 mg/kg COS也可顯著提高血清IgM和C4含量，這提示飼糧中添加COS具有提高生長(zhǎng)育肥豬血清免疫功能的作用。

3.5 COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬腸道黏膜形態(tài)的影響

腸道是機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行消化吸收的重要場(chǎng)所，腸絨毛是小腸的重要組成，不僅對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收起到至關(guān)重要的作用，而且絨毛規(guī)律的擺動(dòng)也可阻止有害微生物的定植[32]。絨毛高度增長(zhǎng)可導(dǎo)致小腸與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積增加，從而增加小腸對(duì)營(yíng)養(yǎng)的吸收能力，因此小腸絨毛高度與機(jī)體的生長(zhǎng)性能緊密相關(guān)[33]。研究表明，COS能夠促進(jìn)腸道隱窩細(xì)胞增殖活性來(lái)改善腸道形態(tài)，從而提高養(yǎng)分消化利用效率[34]。史宇濤等[35]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加COS能夠提高白羽肉雞十二指腸絨毛高度，降低空腸隱窩深度。張?chǎng)魏５萚36]也報(bào)道了飼糧中添加COS可顯著降低斷奶仔豬空腸隱窩深度。Walsh等[37]研究表明，飼糧中添加COS可提高斷奶仔豬十二指腸及空腸的絨毛高度和絨毛高度與隱窩深度的比值，從而提高機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力。本試驗(yàn)結(jié)果表明，COS能夠提高生長(zhǎng)育肥豬十二指腸的絨毛高度與隱窩深度的比值。結(jié)合生長(zhǎng)性能結(jié)果，飼糧添加COS顯著降低了生長(zhǎng)育肥豬的料重比，提示COS可能是通過(guò)提高小腸絨毛高度與隱窩深度的比值，提高腸道的消化吸收能力，進(jìn)而提高生長(zhǎng)育肥豬對(duì)飼糧的利用效率。

4 結(jié) 論

本研究結(jié)果表明，基礎(chǔ)飼糧添加30 mg/kg COS能夠顯著降低生長(zhǎng)育肥豬的料重比，提高飼料轉(zhuǎn)化率。低能低蛋白質(zhì)飼糧中添加30 mg/kg COS對(duì)生長(zhǎng)育肥豬的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響，表明在降低飼糧成本的前提下，添加COS具有良好的經(jīng)濟(jì)效益。此外，基礎(chǔ)飼糧中添加COS可在一定程度上提高生長(zhǎng)育肥豬肌肉中風(fēng)味物質(zhì)肌苷酸、谷氨酸、苯丙氨酸和丙氨酸的含量。同時(shí)，基礎(chǔ)飼糧中添加COS可以增強(qiáng)生長(zhǎng)育肥豬免疫功能和抗氧化功能以及改善腸道黏膜形態(tài)。