現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用

郭煥君

摘要：食品安全檢測(cè)工作的進(jìn)行能夠?qū)κ称樊?dāng)中所含有的病原微生物進(jìn)行快速的檢測(cè)。如今，不同類型的病原微生物檢測(cè)方法逐漸出現(xiàn)，分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)在特異性與靈敏性等方面表現(xiàn)出一定的優(yōu)勢(shì)，受到了人們的關(guān)注。基于此，本文對(duì)食品安全檢測(cè)體系中，現(xiàn)代分析生物學(xué)技術(shù)的運(yùn)用展開了研究與分析。

關(guān)鍵詞：食品微生物檢測(cè)；分子生物學(xué)技術(shù)；PCR 技術(shù)；基因探針；基因芯片

引言

食品安全體系要求食品當(dāng)中不含有可能威脅人體健康的物質(zhì)或者元素，對(duì)食品中所含有的病原微生物進(jìn)行及時(shí)有效的檢測(cè)是食品安全檢測(cè)體系的關(guān)鍵內(nèi)容。傳統(tǒng)形式的病原微生物檢測(cè)方案步驟比較繁瑣，工作效率水平低下，同時(shí)對(duì)生長速度緩慢或者新型微生物的檢測(cè)敏感性比較低。所以，需要對(duì)分子生物學(xué)技術(shù)積極進(jìn)行運(yùn)用，實(shí)現(xiàn)檢驗(yàn)病原微生物的效果。

一、PCR技術(shù)

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)被簡稱為PCR技術(shù)，運(yùn)用變性以及復(fù)性的原理，在體外運(yùn)用DNA的聚合酶，在引物引導(dǎo)與脫氧核糖核苷酸等的參與下，使得模板在一段時(shí)間內(nèi)進(jìn)行大量擴(kuò)增，這一技術(shù)能夠?qū)μ囟―NA序列進(jìn)行選擇性放大，所以被運(yùn)用在生命科學(xué)體系當(dāng)中，在病原微生物檢測(cè)工作體系當(dāng)中所發(fā)揮的作用愈發(fā)重要。

傳統(tǒng)意義上的食品微生物檢測(cè)的技術(shù)需要被劃分為四個(gè)不同的步驟，基本上需要耗費(fèi)四天以上的時(shí)間才能夠獲取相應(yīng)的結(jié)果，檢測(cè)的步驟比較繁瑣，耗費(fèi)的時(shí)間比較多，特異性與靈敏性并不理想，這導(dǎo)致食品微生物檢測(cè)工作變得滯后，無法有效地指導(dǎo)生產(chǎn)過程。PCR技術(shù)技術(shù)則能夠?qū)κ称樊?dāng)中所存在的病原微生物進(jìn)行快速與準(zhǔn)確地檢測(cè)，這為食品行業(yè)微生物的檢測(cè)體系帶來了新的希望。

在PCR技術(shù)體系當(dāng)中，對(duì)PCR檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響的因素主要是引物設(shè)計(jì)與靶序列的選取。曾有研究人員運(yùn)用實(shí)時(shí)定量的PCR技術(shù)對(duì)食品當(dāng)中所存在的李斯特菌進(jìn)行了檢測(cè)。實(shí)時(shí)定量的技術(shù)是運(yùn)用對(duì)PCR直接進(jìn)行測(cè)定的過程中熒光信號(hào)變化進(jìn)行測(cè)定的方式，借助電腦的分析軟件對(duì)擴(kuò)增情況展開動(dòng)態(tài)檢測(cè)與定量狀況進(jìn)行總結(jié)，這使得實(shí)時(shí)定量的PCR技術(shù)逐漸從定性轉(zhuǎn)變到定量。此外，實(shí)時(shí)定量的PCR技術(shù)無法開展凝膠電泳活動(dòng)，能夠有效降低交叉感染狀況出現(xiàn)的概率，反應(yīng)的自動(dòng)化與特異性水平更高。在對(duì)食品微生物進(jìn)行檢測(cè)的過程中，會(huì)使用到不同類型的PCR技術(shù)方法，其靈敏度更高，消耗的時(shí)間更少，在進(jìn)行檢測(cè)工作時(shí)，為了避免出現(xiàn)人為失誤，需要對(duì)陽性對(duì)照樣本進(jìn)行設(shè)置。

二、基因探針的檢測(cè)技術(shù)

基因探針技術(shù)也被稱為核酸分子的雜交技術(shù)，這一技術(shù)如今在分子生物學(xué)體系內(nèi)得到了廣泛運(yùn)用，屬于基礎(chǔ)性的DNA分析方法。基因探針指的是帶著標(biāo)記的特異性的基因片段，這一檢測(cè)技術(shù)主要運(yùn)用的是堿基的配對(duì)原理，使得互補(bǔ)的核酸單鏈能夠轉(zhuǎn)變成為雙鏈。如今，基因探針的技術(shù)已經(jīng)在食品微生物檢測(cè)體系當(dāng)中得到了廣泛運(yùn)用，能夠快速、準(zhǔn)確地對(duì)病原微生物進(jìn)行檢測(cè)。

基因探針的技術(shù)主要是對(duì)食品致病病原菌進(jìn)行有效檢測(cè)。運(yùn)用分離與標(biāo)記病原體的核酸片段來對(duì)基因探針進(jìn)行配置，使得探針能夠與待檢測(cè)的樣品雜交，若是樣本當(dāng)中含有特定的邊緣體，探針會(huì)和目的性的核酸序列進(jìn)行結(jié)合，運(yùn)用特定方案對(duì)標(biāo)記物進(jìn)行檢測(cè)，從而對(duì)特定病原體的有無進(jìn)行檢測(cè)。如今，國內(nèi)與國外的研究人員已經(jīng)研究出了不同類型的基因探針對(duì)食品當(dāng)中的微生物進(jìn)行檢測(cè)，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)特定病原體進(jìn)行確定的效果。

三、基因芯片技術(shù)

基因芯片技術(shù)指的是芯片上所存在的探針以及樣品當(dāng)中的靶基因片段發(fā)生特異性的核酸雜交過程。在對(duì)食品中的致病菌進(jìn)行檢測(cè)與分析的過程中，需要選取細(xì)菌體系的共有基因，將其視為靶基因，借助一對(duì)通用性質(zhì)的引物予以擴(kuò)增，再使用新品當(dāng)中的探針對(duì)不同細(xì)菌的獨(dú)特堿基進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)區(qū)分不同類型細(xì)菌的效果，這一檢測(cè)方法的檢測(cè)范圍能夠進(jìn)一步擴(kuò)大，檢測(cè)品質(zhì)能夠進(jìn)一步提高。如今，很多的研究人員開始使用基因芯片的技術(shù)對(duì)食品當(dāng)中比較常見的微生物進(jìn)行檢測(cè)，取得了比較優(yōu)良的檢測(cè)結(jié)果。基因芯片技術(shù)屬于生命與信息科學(xué)體系的結(jié)合體，屬于發(fā)展迅速的高新技術(shù)系統(tǒng)。如今，研究活動(dòng)處于不斷深化的過程中，基因芯片技術(shù)在食品微生物檢測(cè)體系當(dāng)中的應(yīng)用愈發(fā)廣泛，為食品科學(xué)研究活動(dòng)的進(jìn)行奠定基礎(chǔ)。

結(jié)束語

目前食品安全的問題逐漸發(fā)展成為全球性的公共衛(wèi)生問題，人們對(duì)這一問題的重視程度也不斷加深，對(duì)食源性的致病菌進(jìn)行檢測(cè)與預(yù)防是有效提升食品安全的關(guān)鍵基礎(chǔ)。所以，需要?jiǎng)?chuàng)建出靈敏度更高、更為可靠與方便的微生物技術(shù)體系，從而滿足食品安全需求，使得食品微生物檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展與現(xiàn)代社會(huì)的發(fā)展趨勢(shì)相適應(yīng)。