血清sLOX-1、cTnI及CK-MB檢測在缺氧缺血性腦病診斷中的價值

張 婷，徐水亮

鄂東醫療集團黃石市中心醫院/湖北理工學院附屬醫院檢驗科，湖北黃石 435000

缺氧缺血性腦病是指圍生期新生兒窒息所引起的腦缺氧缺血性損傷，是新生兒神經系統異常和死亡的主要因素[1]。缺氧缺血性腦病在新生兒中的發病率為0.2%～0.4%，并且患兒的預后較差，病死率較高[2]。目前，對缺氧缺血性腦病的臨床診斷主要依靠影像學診斷結果、患兒的臨床表現及病史綜合進行判斷，缺乏客觀、準確且有效的血清生化標志物[3]。可溶性血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(sLOX-1)主要由血管內皮細胞和自然殺傷細胞分泌產生，具有誘導平滑肌細胞凋亡和促進炎性反應等功能，是心血管疾病診斷和治療的新興生物標志物[4-5]。心肌肌鈣蛋白I(cTnI)主要分布于心肌，當心肌出現損傷時被大量分泌至血液中，是心肌損傷的臨床診斷標志物，在急性心肌梗死和心力衰竭等心血管疾病的臨床診斷中具有一定價值[6-7]。肌酸激酶同工酶(CK-MB)主要存在于心肌，參與肌酸的代謝調節，心肌損傷時迅速釋放入血，是反映急性心肌梗死和心力衰竭的典型生化標志物[8-9]。目前，缺氧缺血性腦病新生兒的血清學診斷標志物仍然較少，本研究通過檢測血清sLOX-1、cTnI及CK-MB水平，旨在分析它們在缺氧缺血性腦病新生兒中的水平及其與新生兒神經行為測評(NBNA)評分的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2017年2月至2019年10月本院診治的120例缺氧缺血性腦病新生兒納入觀察組，納入標準：(1)出生后24 h內發生缺氧缺血性腦病；(2)符合中華醫學會兒科學分會制訂的新生兒缺氧缺血性腦病診斷標準[10]；(3)無貧血和呼吸道阻塞性疾病；(4)腦部CT結果顯示有低密度灶改變。排除標準：(1)存在遺傳代謝性疾病；(2)心肺功能異常；(3)合并其他類型腦部疾病；(4)治療期間轉院；(5)治療期間死亡，以及治療結束出院后失訪。120例缺氧缺血性腦病患兒中男67例，女53例；新生兒為其母親首胎98例，非首胎22例；出生時孕周37～43周，平均(39.88±2.61)周；患兒出生體質量為2 190～4 310 g，平均(3 033.79±836.37)g。參考新生兒缺氧缺血性腦病分度標準[11]，將120例患兒進一步分為輕度組(65例)、中度組(38例)和重度組(17例)。選擇同期在本院婦產科出生的120例健康新生兒作為對照組，其中男69例，女51例；新生兒為其母親首胎95例，非首胎25例；出生時孕周為37～42周，平均(39.15±2.13)周；出生體質量2 235～4 408 g，平均(3 089.46±853.83)g。觀察組與對照組的性別比例、首胎比例和出生孕周等一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。臨床研究開展前均與新生兒家屬簽署知情同意書，且經本院醫學倫理委員會審核通過。

1.2方法 對照組新生兒于出生后立即采集3 mL靜脈血，而觀察組新生兒則分別于出生后1、2、7 d采集3 mL靜脈血。靜脈血采集后均在室溫下靜置30 min，5 000 r/min離心30 min，離心半徑12 cm，吸取上清液至另一潔凈離心管中，—80 ℃凍存。采用酶聯免疫吸附試驗法檢測血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平。sLOX-1檢測試劑盒購自上海恒斐生物科技有限公司，生產批號：E13567，cTnI檢測試劑盒購自武漢菲恩生物科技有限公司，生產批號：EH0348，CK-MB檢測試劑盒購自蘇州瑞諾德生物科技有限公司，生產批號：ML0447。

1.3觀察指標 于喂養1 h后檢測各組新生兒的NBNA評分[12]，主要包括行為能力評估(6項)、原始反射評估(3項)、主動肌張力評估(4項)和被動肌張力評估(4項)，總分<35分為腦損傷，35～36分為可疑腦損傷，>36分為正常。比較對照組(出生后1 d)和觀察組(出生后1 d)的血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平，比較輕度組、中度組和重度組在出生后1、2、7 d的血清sLOX-1、cTnI、CK-MB水平及NBNA評分。

2 結 果

2.1對照組與觀察組的血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平比較 觀察組血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 對照組與觀察組的血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平比較

2.2不同程度缺氧缺血性腦病患兒血清sLOX-1、cTnI、CK-MB水平及NBNA評分動態變化 出生后1、2、7 d，重度組血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平明顯高于中度組和輕度組，而NBNA評分明顯低于中度組和輕度組，差異有統計學意義(P<0.05)。出生后1、2、7 d，中度組血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平明顯高于輕度組，而NBNA評分明顯低于輕度組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

2.3血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平與NBNA評分的相關性分析 血清sLOX-1、cTnI、CK-MB水平與NBNA評分均呈負相關(r=-0.907、-0.855、-0.835，P<0.05)，見圖1。

2.4血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平對缺氧缺血性腦病新生兒的診斷價值 血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平聯合檢測的診斷價值明顯高于各項指標單獨檢測，見表3。

表2 不同程度缺氧缺血性腦病患兒血清sLOX-1、cTnI、CK-MB水平及NBNA評分動態變化

組別nCK-MB(ng/mL)1 d2 d7 dNBNA評分(分)1 d2 d7 d輕度組656.81±2.208.62±2.786.02±1.9434.76±5.7032.57±5.3436.69±6.01中度組3818.69±5.66*20.48±6.21*19.43±5.89*29.77±5.62*27.61±5.21*31.42±5.93*重度組1743.85±8.18*#47.05±7.07*#45.72±8.70*#5.26±1.46*#4.34±1.21*#22.42±6.23*#F14.73713.11116.33418.01918.4895.365P<0.001<0.001<0.001 <0.001<0.001<0.001

注：A為血清sLOX-1水平與NBNA評分的相關性分析；B為血清cTnI水平與NBNA評分的相關性分析；C為血清CK-MB水平與NBNA評分的相關性分析。

表3 血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平對缺氧缺血性腦病新生兒的診斷價值

3 討 論

缺氧缺血性腦病主要由腦部缺氧缺血所致，目前普遍認為細胞代謝紊亂、免疫功能失調、炎性反應、氧化應激反應和圍生期缺血再灌注等是缺氧缺血性腦病的主要發病機制[13-14]，因此，缺氧缺血性腦病是多因素作用的結果。缺氧缺血性腦病的發病過程較為復雜，病死率高且后遺癥多[15]，因此，尋找與缺氧缺血性腦病發病密切相關的血清標志物，并將其應用于缺氧缺血性腦病患兒的診斷和治療中具有重要的臨床意義。

本研究發現，缺氧缺血性腦病患兒血清sLOX-1水平明顯升高，并且隨患兒病情嚴重程度增加其血清sLOX-1水平也隨之升高，表明sLOX-1水平升高與缺氧缺血性腦病的發生及病情嚴重程度關系密切。分析其原因可能是由于在缺氧缺血性腦病發病過程中存在嚴重的氧化應激反應，氧化應激過程中產生大量的氧自由基并使低密度脂蛋白發生氧化作用。KATTOOR等[16]的研究報道顯示，sLOX-1能夠結合氧化型的低密度脂蛋白。STANKOVA等[17]的研究結果顯示，sLOX-1與低密度脂蛋白結合會導致低密度脂蛋白的大量降解，從而產生脂質代謝紊亂，因此，缺氧缺血性腦病患兒血清sLOX-1水平升高是一種反饋調節機制，sLOX-1能夠中和氧化應激產生的氧化型低密度脂蛋白，減少氧化型低密度脂蛋白對心腦血管造成的損傷，同時sLOX-1水平異常升高會促進低密度脂蛋白的異常降解，導致患兒容易發生脂質代謝紊亂，致使病情加劇[18]。進一步研究發現，血清sLOX-1水平與NBNA評分呈負相關，表明sLOX-1水平升高可能引起患兒的神經功能損傷。分析其原因可能是由于sLOX-1水平升高與氧化應激的發生密切相關，氧化應激產生的過氧化物分子及超氧化物分子具有較強的氧化性，會對細胞膜上的受體蛋白造成氧化損傷，從而抑制神經元細胞的增殖和損傷修復等過程，導致神經元細胞大量死亡進而引起患兒出現神經功能損傷[19]。

本研究結果也表明，cTnI也與缺氧缺血性腦病的發生及病情嚴重程度關系密切。分析其原因可能是由于cTnI參與炎性反應的發生，ZHANG等[20]的研究報道顯示，cTnI能夠活化腫瘤壞死因子-α(TNF-α)信號通路，由于TNF-α信號通路下游靶基因為白細胞介素和腫瘤生長因子等，因此在缺氧缺血性腦病患兒血清cTnI水平升高會活化TNF-α信號通路，進而促進炎性反應的發生。白細胞介素和腫瘤生長因子等作用于組織細胞，并引起組織細胞損傷，導致局部組織壞死。隨著血清cTnI水平升高，心腦血管組織壞死程度也隨之增加，患兒病情逐漸加劇[21]。同時GU等[22]的研究發現，cTnI水平異常升高會抑制腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信號通路的活化，因此，在缺氧缺血性腦病患兒中血清cTnI水平異常升高會抑制AMPK信號通路，引起患兒神經元細胞糖代謝異常，進而導致神經元細胞損傷和凋亡，使患兒病情加劇。本研究進一步分析發現，cTnI水平升高也會引起患兒的神經功能損傷。分析其原因可能是由于cTnI水平升高會促進炎癥因子的釋放，導致患兒腦部炎性反應的發生。已有研究結果顯示，腦部炎性反應的發生與神經元壞死之間存在正相關性[23]，因此，缺氧缺血性腦病患兒的腦部炎性反應會促進神經元細胞凋亡，導致患兒的神經功能損傷。

同時，本研究發現CK-MB參與缺氧缺血性腦病的發病過程，與患兒病情嚴重程度關系密切，并且與患兒的神經功能損傷密切相關。分析其原因可能是由于腦組織發生缺氧缺血性損傷時，CK-MB大量釋放至腦部內環境中。EL-MENYAR等[24]的研究結果顯示，CK-MB能夠插入到神經元細胞膜上，并促進神經元細胞的損傷，同時抑制神經元的自我修復和再生功能，因此，缺氧缺血性腦病患兒血清CK-MB水平升高會促進腦部損傷。同時，已有研究結果顯示，CK-MB能夠抑制細胞內的脂質代謝和糖代謝過程[25]，因此，缺氧缺血性腦病患兒血清CK-MB水平升高會抑制神經元細胞的脂質代謝和糖代謝過程，使神經元細胞的增殖和修復功能下降，導致患兒病情加劇。同時，LI等[26]的研究結果顯示，CK-MB是絲氨酸-蘇氨酸激酶(AKT)信號通路的下游靶基因，缺氧缺血性腦病發病過程中可能誘導AKT信號通路的活化，進而促進CK-MB的表達，使患兒血清CK-MB水平升高。

本研究結果還顯示，血清sLOX-1、cTnI和CK-MB聯合診斷缺氧缺血性腦病新生兒的價值較高，ROC曲線下面積為0.879，靈敏度和特異度分別為87.26%和83.79%，明顯優于sLOX-1、cTnI和CK-MB單獨檢測的價值。提示檢測新生兒血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平可作為診斷缺氧缺血性腦病的重要生化標志物。

綜上所述，缺氧缺血性腦病新生兒血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平異常升高，并且隨患兒病情加劇逐漸升高。血清sLOX-1、cTnI和CK-MB水平與NBNA評分均呈負相關，在缺氧缺血性腦病的診斷和治療中具有一定臨床價值。