周明夏 錢捷 顧長青


摘要:為開展大腸桿菌分離株臨床常用藥物敏感性研究,對從江蘇省不同地區養雞場分離到的139株大腸桿菌進行了藥物敏感性檢測。結果顯示,139株大腸桿菌分離株對氨芐青霉素、磺胺甲基異噁唑、慶大霉素、四環素、諾氟沙星、卡那霉素、鏈霉素、先鋒IV等13種抗生素的耐藥率超過了50%,尤其是對強力霉素、氨芐青霉素、四環素、鏈霉素、磺胺甲基異噁唑及先鋒IV的耐藥性都超過了90%。泰州地區黃羽肉雞大腸桿菌耐藥性性非常嚴重,只有阿奇霉素、諾氟沙星、左旋氧氟沙星中度敏感或敏感,臨床治療試驗表明諾氟沙星對該地區的大腸桿菌病起到了很好的控制作用。該試驗為江蘇省部分地區防治雞大腸桿菌病提供了一定的用藥參考。
關鍵詞:禽致病性大腸桿菌(APEC);藥敏試驗;耐藥性
中圖分類號:S858.31? ? ? ? 文獻標識碼:A? ? ? ? 文章編號:1007-273X(2021)02-0005-02
在家禽飼養中,禽大腸桿菌病是一種比較常見的疾病,該病主要由禽致病性大腸桿菌(APEC)引起,臨診病型主要有肉芽腫、大腸桿菌性敗血癥、氣囊炎、腫頭綜合征、腹膜炎及輸卵管炎和黃囊感染等,不僅傳播速度快,而且傳播范圍非常廣,發病率一般高達11%~69%,死亡率一般在3.8%~20.0%[1],對我國養禽業的發展造成了嚴重的影響。目前針對大腸桿菌一般采用藥物和疫苗進行控制,臨床上雞大腸桿菌一般用藥物進行預防和治療[2],為更合理地防治該病,要進行藥敏試驗并注意交替輪換使用藥物,避免病原菌產生抗藥性[3]。本研究以在江蘇省不同地區分離到的黃羽肉雞139株大腸桿菌分離株為試驗菌株,對菌株針對15種常用藥物敏感性進行研究,同時對其發展趨勢進行分析,從而為禽大腸桿菌病臨床用藥提供試驗數據參考。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 菌株來源 試驗菌株為從江蘇省不同地區(南通、泰州、常州)養雞場分離到的139株大腸桿菌菌株。
1.1.2 培養基 LB培養基,OXOID公司;瓊脂粉,中國國藥(集團)上海化學試劑公司。
1.1.3 藥敏紙片 氯霉素(30? μg/片)、阿奇霉素(15 μg /片)、鏈霉素(10 μg /片)、四環素(30 μg/片)、諾氟沙星/氟哌酸(10 μg /片)、慶大霉素(10 μg /片)、卡那霉素(30 μg /片)、頭孢拉定/先鋒IV(30 μg /片)、左旋氧氟沙星(5 μg /片)、氟苯尼考(30 μg /片)、氨芐青霉素/氨芐西林(10 μg /片)、強力霉素/多西環素 (30 μg /片)、多粘菌素B(300 IU)、磺胺甲基異惡唑(300 μg /片)、新霉素(30 μg /片)均從杭州微生物試劑有限公司購入。
1.1.4 試驗黃羽肉雞場養殖和臨床發病情況 選取泰州市某正在發生大腸桿菌病的黃羽肉雞場2個,養殖場1的養殖情況:養殖量4 800羽,35日齡,用藥前病雞數量245羽,用藥前死亡57羽。養殖場2的養殖情況:養殖量4 500羽,32日齡,用藥前病雞數量156羽,用藥前死亡36羽。
1.2 方法
1.2.1 藥敏試驗 根據美國國家臨床實驗室標準委員會(National committee for clinical laboratory standards,NCCLS)2007年發布的標準選擇抗生素和進行實驗與判定。
1.2.2 治療給藥方法和療效評價標準 選取敏感藥物,集中給藥和飲水,全天藥物分別于上午、下午2次進行集中投藥,按照1 g藥加 5 kg水的比例連續投藥3 d,期間如出現死亡,進行大腸桿菌分離培養,陽性則判斷為感染死亡;投藥后雞群不再死亡、食欲及精神恢復正常,大腸桿菌病臨床癥狀消失則視為治愈。根據死亡雞只數計算死亡率,結束后根據實際治愈數量計算治愈率[4]。
2 結果與分析
本次試驗使用15種抗生素檢測139株APEC分離株藥物敏感性,具體結果見表1。15種供試抗生素中,APEC分離株對其中13種(四環素、磺胺甲基異噁唑、慶大霉素、氯霉素、諾氟沙星、卡那霉素、新霉素、氨芐青霉素、先鋒IV、左旋氧氟沙星、氟苯尼考、強力霉素、鏈霉素)耐藥性高于50%,特別是對氨芐青霉素、四環素、先鋒IV、磺胺甲基異噁唑、強力霉素、鏈霉素的耐藥率均已超過90%。
根據本次藥敏試驗結果判斷,30株南通地區分離出來的大腸桿菌中,大部分對強力霉素、氨芐青霉素、氯霉素、四環素、鏈霉素、先鋒IV、磺胺甲基異噁唑等耐藥,對多粘菌素等敏感度為中等,對慶大霉素敏感度較高。66株常州地區分離的大腸桿菌對多粘菌素敏感度較高,對其他藥物的敏感性較低或耐藥,尤其是氨芐青霉素、四環素、先鋒IV、強力霉素、磺胺甲基異噁唑等均為100%耐藥性。43株泰州地區分離的大腸桿菌對四環素、強力霉素、先鋒IV、磺胺甲基異噁唑、鏈霉素、氯霉素、氨芐青霉素、新霉素、慶大霉素、卡那霉素、氟苯尼考、多粘菌素等表現出耐藥性;其中多數菌株對諾氟沙星、左旋氧氟沙星及阿奇霉素為中度敏感或敏感,根據此結果,泰州地區雞場臨床用藥可選擇諾氟沙星,其治療結果見表2。結果顯示,泰州市2個養殖場用藥后死亡率分別為 0.65%、0.44%,死亡率明顯降低,說明諾氟沙星對大腸桿菌病發揮了理想的治療效果。
3 分析與討論
本次藥敏試驗的 139 株大腸桿菌菌株分別從南通、常州和泰州感染大腸桿菌病的病例中分離而來,結果顯示,目前該地區禽致病性大腸桿菌已經表現出相當突出的耐藥性,在選擇藥物預防和治療禽大腸桿菌病的范圍越來越窄,以前治療表現較好的藥物目前已很難保證療效能夠繼續保持,通過研究某一地區雞源性大腸桿菌耐藥性,能夠進一步明確該地區細菌耐藥性現狀,有利于更好地對雞大腸桿菌病防治藥物進行篩選,從而指導實際生產[5]。因此本試驗結果具有一定臨床參考價值。
本次試驗根據抗菌藥所屬類別、針對的細菌類型和臨床使用情況,選定了15 種抗生素,這些抗生素在針對革蘭氏陰性菌感染方面都具有一定的代表性。試驗結果顯示,大腸桿菌在臨床上耐藥現象已十分嚴重,這將會嚴重影響到家禽養殖業的發展。因此有必要大規模普查臨床大腸桿菌耐藥情況,從而對臨床用藥進行相應的指導。如果在臨床實際用藥中能夠進行交叉、聯合、輪替用藥,提高治療療程的合理性,就能夠有效降低大腸桿菌出現耐藥性的機率,從而使防治效果得到提升。
本次臨床治療試驗證明,諾氟沙星對該場大腸桿菌病起到較好的控制效果,證明藥敏試驗結果與臨床治療效果符合,但臨床方面仍要注意診斷結果的準確性及藥品用法、用量和療程的正確性等,避免出現耐藥性。
參考文獻:
[1] 陳 祥,高 崧,焦新安,等. 禽病原性大腸桿菌的致病機理[J].中國家禽,2007, 29(18):54-57.
[2] BOGAARD A . Colibacillosis in poultry[J]. Tijdschr diergeneeskd,1992, 117(4):124-125.
[3] 郝智慧,肖希龍,邱 梅,等.不同區域雞大腸桿菌對抗菌藥的耐藥性比較[J].中國獸醫科學,2009,39(1):84-88.
[4] 王寶杰.濰坊市肉雞大腸桿菌病的流行病學調查及藥物防治研究[D].山東泰安:山東農業大學,2008.
[5] 周廷宣,冉茂菊.雞致病性大腸桿菌藥敏實驗[J].中國畜禽傳染病,1995 (2):57-58.